一种LDR技术的EGFR突变检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一种特异性PCR技术和LDR技术检测EGFR基因突变的试剂盒，特别涉及肿瘤患者组织以及患者血液中EGFR基因突变的诊断。本试剂盒针对分子靶向抗癌药物疗效相关的特定突变位点，设计特定的引物序列和探针序列，在进行多重PCR后，通过野生型探针和突变型探针与目的片段连接后在测序仪上进行片段分析，根据结果的峰图判读结果。本发明专利技术可对EGFR基因特定突变位点进行检测，可以用于分子靶向抗肿瘤药物疗效的预测和肿瘤患者临床个体化用药方案的指导。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及PCR技术和高温连接酶(LDR)技术检测试剂盒，特别涉及到特异性引物的多种PCR和多重LDR技术检测表皮生长因子受体(epidermal growth factorreceptor, EGFR)常规突变检测的试剂盒。
技术介绍
肺癌是当今世界上最常见的恶性肿瘤，男性肺癌占恶性肿瘤发病率的首位，女性肺癌仅次于乳腺癌据第二位。全球每年大约有1180000人死于肺癌。而在我国，肺癌的发病率也逐年上升,其中非小细胞肺癌(non-small cell lung caner,NSCLC)占肺癌的80%,确诊时多为晚期。虽然手术、化疗、放疗技术在不断提高，但NSCLC患者的预后仍然很差，总体5年生存率仍然小于20%。近年来一些针对肿瘤特定分子靶点的抗肿瘤靶向药物显示了一些疗效，其中以表皮 生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)为革巴点的 EGFR 酪氨酸激酶抑制剂(EGFR tyrosine kinasesin-hibitor, EGFR-TKI)吉非替尼(Gefitinib)在NSCLC的治疗中显示了一定的疗效。吉非替尼是一种本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种采用特异性引物探针的高温连接酶技术(LDR技术)检测EGFR基因突变的试剂盒，该试剂盒包括：PCR缓冲液，酶1，酶2，LDR反应液，阴性质控品，野生型质控品，19外显子质控品，20外显子质控品，21外显子L858R质控品，21外显子L861Q质控品和分隔并集中包装这些管的试剂盒子。其中19外显子，20外显子和21外显子的引物序列分别是：19外显子上游引物：HEX?CCCCAGCAATATCAGCCTTA19外显子下游引物：CCACACAGCAAAGCAGAAAC20外显子上游引物：FAM?CATTCATGCGTCTTCACCTG20外显子下游引物：TTATCTCCCCTCCCCGTATC2...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：江培学，杨志军，王微，詹伟，陈伟华，吴大治，夏懿，
申请(专利权)人：上海复星医学科技发展有限公司，上海复星医药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：