基质金属蛋白酶9的抗体制造技术

本发明专利技术提供涉及结合到基质金属蛋白酶-9MMP9蛋白质(MMP9也称为明胶酶-B)上的结合蛋白(例如抗体和其抗原结合片段)的组合物和使用方法，其中所述结合蛋白包含免疫球蛋白Ig重链(或其功能片段)和Ig轻链(或其功能片段)。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术是在细胞外酶、细胞外基质酶、蛋白酶和免疫学的领域内。
技术介绍
基质金属蛋白酶(MMP)是参与形成和重塑细胞外基质的细胞外酶家族。这些酶含有保守催化域，在所述保守催化域中，锌原子由三个组氨酸残基配位。当前，已知这一家族的超过20名成员，所述成员被组织成包括胶原酶、明胶酶、溶基质素(stromelysin)、基质溶素(matrilysin)、釉质溶素(enamelysin)和膜MMP在内的若干群组。MMP2和MMP9属于基质金属蛋白酶的明胶酶群组。除了含有大多数MMP所共有的信号肽、前肽、催化、锌结合和血液结合素样域以外，明胶酶还含有多个纤维结合蛋白样域和O-糖基化域。异常活性的某些MMP已显示在肿瘤生长、癌转移、发炎和血管疾病中起作用。参见，例如胡(Hu)等人(2007)自然评论:药物发现(Nature Reviews:Drug Discovery)6:480-498。因此，在特定治疗环境中会需要抑制一种或一种以上MMP的活性。然而，某些其它MMP的活性常为正常功能所必需。由于大多数MMP抑制剂靶向保守催化域，且因此抑制许多不同的MMP，故其治疗性使用已引起因为必需的非致病相关MMP受到抑制而导致的副作用。纵使有这一问题，已证明还是难以开发对特定MMP具有特异性的抑制剂，因为酶促活性的抑制通常需要抑制剂靶向催化域。因此，基质金属蛋白酶酶促活性的大多数抑制剂很可能与一种以上MMP反应，归因于所述一种以上MMP的催化域中的同源性。因而，仍然存在对特异性抑制单个MMP的催化活性且不与其它MMP反应的治疗试剂的需求。
技术实现思路
本专利技术提供了涉及结合到基质金属蛋白酶-9 (MMP9)蛋白质(MMP9也称为明胶酶-B)上的结合蛋白(例如抗体和其抗原结合片段)的组合物和使用方法，其中所述结合蛋白包含免疫球蛋白(Ig)重链(或其功能片段)和Ig轻链(或其功能片段)。本专利技术另外提供特异性结合到MMP9上且不结合到其它相关基质金属蛋白酶上的MMP9结合蛋白。所述MMP9结合蛋白应用于有必要或需要获得MMP9的特异性调节(例如抑制)(例如不直接影响其它基质金属蛋白酶的活性)的应用中。因此，在本专利技术的某些实施例中，抗MMP9抗体是MMP9的活性的特异性抑制剂 。具体地说，本文所公开的MMP9结合蛋白将适用于抑制MMP9,同时允许其它相关基质金属蛋白酶的正常功能。因此，本专利技术尤其提供:1.一种MMP9结合蛋白，其包含免疫球蛋白重链或其功能片段和免疫球蛋白轻链或其功能片段，其中所述蛋白不结合到除MMP9以外的基质金属蛋白酶上。2.根据实施例1所述的蛋白质，其中所述重链包含选白SEQ ID NO:13到SEQ IDNO: 15中的一者或一者以上的互补决定区(CDR)，且所述轻链包含选白SEQ ID N0:16到SEQID NO:18中的一者或一者以上的⑶R。3.根据实施例2所述的蛋白质，其中所述重链包含选自由SEQ ID NO:3或SEQ IDNO:5到SEQ ID NO:8组成的群组的可变区，且所述轻链包含选自由SEQ ID NO:4或SEQ IDNO:9到SEQ ID NO:12组成的群组的可变区。4.根据实施例1所述的蛋白质，其中所述重链是IgG。5.根据实施例1所述的蛋白质，其中所述轻链是K链。6.根据实施例1所述的蛋白质，其中所述蛋白质对MMP9的结合抑制了 MMP9的酶促活性。7.根据实施例6所述的蛋白质，其中所述抑制是非竞争性的。8.根据实施例1所述的蛋白质，其中所述重链由具有选自由SEQ ID NO:19到SEQID NO:22组成的群组的核苷酸序列的聚核苷酸编码，且所述轻链由具有选自由SEQ ID NO:23到SEQ ID NO:26组成的群组的核苷酸序列的聚核苷酸编码。9.一种载体，其包含一种或一种以上聚核苷酸，所述聚核苷酸具有选自由SEQ IDNO:19到SEQ ID NO:26组成的群组的核苷酸序列。10.一种细胞，其包含根据实施例9所述的载体。11.一种医药组合 物，其包含根据实施例1所述的蛋白质。12.一种医药组合物，其包含根据实施例9所述的载体。13.一种医药组合物，其包含根据实施例10所述的细胞。附图说明图1展示小鼠单克隆抗MMP9抗体(AB0041)的重链可变区的氨基酸序列，以及重链的人类化变异体的氨基酸序列(VH1-VH4)，所述氨基酸序列经比对以展示由人类化得到的构架氨基酸序列中的差异。CDR以斜体形式展示，且人类化变异体中与亲本小鼠单克隆相比不同的氨基酸加下划线。图2展示小鼠单克隆抗MMP9抗体(AB0041)的轻链可变区的氨基酸序列，以及这一轻链的人类化变异体的氨基酸序列(VH1-VH4)，所述氨基酸序列经比对以展示由人类化得到的构架氨基酸序列中的差异。CDR以斜体形式展示，且人类化变异体中与亲本小鼠单克隆相比不同的氨基酸加下划线。图3展示MMP9蛋白质的示意图。具体实施例方式除非另外指明，否则本专利技术的实践采用细胞生物学、毒理学、分子生物学、生物化学、细胞培养、免疫学、肿瘤学、重组DNA和相关领域中的标准方法和常规技术，这是处于此项技术的技能范围内的。所述技术描述于文献中，且从而可供所属领域的技术人员使用。参见，例如阿尔贝茨B.(Alberts, B.)等人细胞分子生物学(Molecular Biologyof the Cell) ”,第5版,加兰科学出版公司(Garland Science),纽约州纽约(New York,NY), 2008 ;富特D.(Voet, D.)等人“基础生物化学:分子水平下的生命(Fundamentals ofBiochemistry:Life at the Molecular Level) ”,第 3 版，约翰威立父子出版公司(JohnWiley&Sons),新泽西州霍伯肯(Hoboken, NJ), 2008 ;萨姆布鲁克 J.(Sambrook, J.)等人，“分子克隆:实验室手册(Molecular Cloning:A Laboratory Manual) ”,第3版,冷泉港实验室出版社(Cold Spring Harbor Laboratory Press), 2001 ;奥苏贝尔 F.(Ausubel, F.)等人，“分子生物学实验指南(Current Protocols in Molecular Biology) ”,约翰威立父子出版公司，纽约，1987和定期更新；弗莱士尼R.1.(Freshney, R.1.)，“动物细胞培养:基础技术手册(Culture of Animal Cells:A Manual of Basic Technique) ”,第 4 版，约翰威立父子出版公司，新泽西州萨默塞特(Somerset, NJ), 2000 ;和“酶学方法(Methods inEnzymology) ”丛书,学术出版社(Academic Press),加利福尼亚州圣地亚哥(San Diego,CA)。此外，参见例如“免疫学实验指南(Current Protocols in Immunology)”，(R科伊科(R-Coico)丛书编辑)，威立出版公司(Wiley)，2010年8月最新更新。MMP9结合蛋白本专利技术提供结本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：斯科特·艾伦·麦考利，玛利亚·沃伊斯贝戈，
申请(专利权)人：吉联亚生物科技有限公司，
类型：
国别省市：