The invention belongs to the field of biological detection, in particular to a fast detection kit for nuclear matrix protein 22 and its application. The invention provides a nuclear matrix protein 22 ELISA kit consists of nuclear matrix protein 22 monoclonal antibody coated solid-phase carrier, horseradish peroxidase labeled nuclear matrix protein 22 monoclonal antibody, acridine ester, washing liquid and nuclear matrix protein 22 calibrator composition. The invention provides a nuclear matrix protein 22 rapid detection kit can detect patients after surgical treatment or body fluid of patients with recurrent and metastatic tumor of nuclear matrix protein 22 expression level, has important clinical significance in diagnosis of bladder cancer; but also has the advantages of the present invention to provide the detection results of nuclear matrix protein 22 rapid detection kit accuracy and high stability, good sensitivity, is conducive to the early diagnosis and prognosis of patients with bladder cancer.
【技术实现步骤摘要】
一种核基质蛋白22的快速检测试剂盒及其应用
本专利技术属于生物检测领域,具体涉及一种核基质蛋白22的快速检测试剂盒及其应用。
技术介绍
膀胱肿瘤是泌尿系统最常见的肿瘤,90%以上为移行细胞癌,膀胱移行细胞癌(transitionalcellcarcinomaofbladder)多发生于50-70岁之间,其中80%以上为表浅肿瘤,有10%~20%发展为浸润性膀胱癌。目前对膀胱癌诊断和术后复查的手段主要有膀胱镜和尿细胞学检查,膀胱镜虽准确,但其是一种侵入性检查,操作复杂、费时费力、费用高额,且会增加患者的痛苦,使得很多患者对此方法有抵触情绪,同时其还难以发现原位癌或扁平癌。尿细胞学检查虽无创,且特异性较好,但敏感性低,对于分期较低、分化较好的肿瘤,其敏感性仅为30%或更低,而且受诊断医师主观因素的影响较大。因此,寻找一种简便、无创且能早期诊断膀胱癌的检测方法具有很大意义。核基质蛋白22(NMP-22)是核基质的重要组成部分,其与DNA的复制、转录及RNA的合成、基因表达的调控有关。NMP-22是核有丝分裂装置蛋白(NuMA)的一个亚单位,NuMA和有丝分裂期间纺锤体的形成有关,其主要功能为协调核有丝分裂期间染色体正确均匀地分配到子代细胞。因此,NMP-22多分布于有丝分裂较活跃的组织,如上皮细胞,尤其是尿路上皮细胞。现代研究发现,当细胞恶变(malignanttransformation)时,核内遗传物质在分裂末期分配极度异常,NMP22的合成激增。膀胱癌患者尿液NMP-22含量升高是由于癌细胞增殖异常活跃使细胞内NMP-22含量增高,在细胞凋亡过程中释放到尿 ...
【技术保护点】
一种核基质蛋白22的快速检测试剂盒,其特征在于,由核基质蛋白22单克隆抗体包被的固相载体、辣根过氧化物酶标记核基质蛋白22单克隆抗体、吖啶酯、洗涤液和核基质蛋白22校准品组成。
【技术特征摘要】
1.一种核基质蛋白22的快速检测试剂盒,其特征在于,由核基质蛋白22单克隆抗体包被的固相载体、辣根过氧化物酶标记核基质蛋白22单克隆抗体、吖啶酯、洗涤液和核基质蛋白22校准品组成。2.如权利要求1所述的核基质蛋白22的快速检测试剂盒,其特征在于,所述核基质蛋白22单克隆抗体包被的固相载体的制备方法为:将核基质蛋白22单克隆抗体加入pH为4.2的柠檬酸钠缓冲液中制成包被液,所述核基质蛋白22单克隆抗体的添加量是柠檬酸钠缓冲液体积的0.8-1.2%,将所述包被液加入96孔微孔板中,每孔100μL,放置4℃条件下过夜,甩掉包被液,接着每孔加入300μL封闭液,室温放置3-5h,甩掉封闭液,室温除湿干燥24h,即得。3.如权利要求2所述的核基质蛋白22的快速检测试剂盒,其特征在于,所述封闭液由以下组分组成:柠檬酸钠缓冲液30-50g/L、十四烷基三甲基氯化铵12-16g/L、绿原酸2-4g/L、葛根素0.6-1.2g/L、氯化钠4-6g/L和Prclin3000.1-0.3g/L,余量为水。4.如权利要求3所述的核基质蛋白22的快速检测试剂盒,其特征在于,所述封闭液由以下组分组成:柠檬酸钠缓冲液45g/L、十四烷基三甲基氯化铵14g/L、绿原酸3g/L、葛根素0.8g/L、氯化钠5g/L和Prclin3000.2g/L,余量为水。5.如权利要求1所述的核基质蛋白22的快速检测试剂盒,其特征在于,所述辣根过氧化物酶标记核基质蛋白22单克隆抗体的制备方法为:取10mg辣根过氧化物酶加1ml水中溶解,混匀4-6min后加浓度为0.08mol/L的NaIO4水溶液1ml混合,然后置于冰箱内20-30min后,加0.4mol/L的...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈立国,邹伟权,张亚丽,李庆祥,母润红,王涛,苏焱,
申请(专利权)人:广州华弘生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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