抗基质金属蛋白酶9的抗体制造技术

本发明专利技术提供涉及结合到基质金属蛋白酶-9 MMP9蛋白(MMP9又称为明胶酶-B)的结合蛋白(例如抗体和其抗原结合片段)的组合物及使用方法，例如其中所述结合蛋白包含免疫球蛋白Ig重链(或其功能片段)和Ig轻链(或其功能片段)。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗基质金属蛋白酶9的抗体相关申请案的交叉参考本申请案主张2012年2月29日申请的美国临时申请案61/605,181、2013年1月22日申请的美国临时申请案61/755,444及2012年2月29日申请的PCT申请案第PCT/US2012/027160号的优先权。这些文献的内容以全文引用的方式并入本文中。有关依据联邦政府资助的研究作出的专利技术的权利的声明不适用。
本专利技术属于细胞外酶、细胞外基质酶、蛋白酶及免疫学领域。
技术介绍
基质金属蛋白酶(MMP)属于涉及到细胞外基质形成和重塑的细胞外酶家族。这些酶含有一个保守的催化结构域，其中锌原子经三个组氨酸残基配位。已知这一家族的超过20个成员，组织成包括胶原酶类、明胶酶类、基质溶解素类、基质溶素类、釉质溶解素类及膜MMP类在内的多个群组。MMP2和MMP9属于基质金属蛋白酶的明胶酶群组。除含有大多数MMP共有的信号肽、前肽、催化结构域、锌结合结构域及血红素结合蛋白样结构域外，明胶酶还含有多个纤连蛋白样结构域和一个O-糖基化结构域。MMP涉及到多种疾病。MMP抑制剂部分由于特异性和功效而并不完全令人满意。因此，需要具有特异性并且有效的MMP抑制剂。癌症以及炎症性疾病和自体免疫性疾病，例如结肠直肠癌、IBD(包括克罗恩氏病(Crohn'sdisease，CD)、溃疡性结肠炎(UC)及未定型结肠炎)、类风湿性关节炎(RA)等的治疗并不完全令人满意。因此，需要有效用于这些疾病，特别是用于可用治疗剂无效的个体的治疗。
技术实现思路
本专利技术提供涉及结合到基质金属蛋白酶-9(MMP9)蛋白(又称为明胶酶-B)的结合蛋白(例如抗体和其抗原结合片段)的组合物和使用方法。所述结合蛋白通常为抗体或其片段(例如，抗原结合片段)并且通常含有免疫球蛋白(Ig)重链(或其功能片段)和Ig轻链(或其功能片段)。重链通常为IgG，例如IgG1或IgG4，或其经修饰型式。轻链通常为κ链。MMP9结合蛋白(例如抗体)为特异性结合到MMP9并且不结合其它相关基质金属蛋白酶的结合蛋白。这些MMP9结合蛋白可用于需要或希望获得对MMP9的特异性调节(例如，抑制)，例如而不直接地影响其它基质金属蛋白酶的活性的应用中。因此，在本专利技术的某些实施例中，抗MMP9抗体或其片段是MMP9活性的特异性抑制剂。在一些方面中，本文所揭示的MMP9结合蛋白将可用于抑制MMP9，同时允许其它相关基质金属蛋白酶的正常功能。所述抗体和片段可参照其氨基酸序列或其部分，和/或各种功能(例如与MMP9或其特定表位的结合特异性，或与特定抗体竞争结合的能力)和/或活性(例如抑制MMP9的能力，例如非竞争性抑制)进行描述。所述抗体和片段可作为一种医药组合物的一部分，其中结合到基质金属蛋白酶9的抗体和其片段包含具有氨基酸序列为SEQIDNO:15的重链互补决定区(CDR)的重链可变(VH)区，及医药学上可接受的赋形剂。所述VH区可另外包含氨基酸序列为SEQIDNO:13和/或14的CDR。VH区也可包含如SEQIDNO:3、5、6、7或8中所陈述的氨基酸序列。VH区也可包含与如SEQIDNO:3、5、6、7或8中所陈述的氨基酸序列具有95％序列一致性的氨基酸序列。在另一个实施例中，包含结合到基质金属蛋白酶9的抗体和其抗原结合片段的所揭示的医药组合物包含具有氨基酸序列为SEQIDNO:18的轻链互补决定区(CDR)的轻链可变(VL)区，及医药学上可接受的赋形剂。所述VL区可另外包含氨基酸序列为SEQIDNO:16和/或17的CDR。VL区也可包含如SEQIDNO:4、9、10、11或12中所陈述的氨基酸序列。VL区也可包含与如SEQIDNO:4、9、10、11或12中所陈述的氨基酸序列具有95％序列一致性的氨基酸序列。在一个实施例中，VH区具有SEQIDNO:7中所陈述的氨基酸序列并且VL区具有SEQIDNO:12中所陈述的氨基酸序列。在另一个实施例中，MMP9结合蛋白包含VH区，其包含具有选自由SEQIDNO:13、14、15、34、35、36及47组成的群组的氨基酸序列的CDR；及VL区，其具有含选自由SEQIDNO:16、17、18、37、38、39、42、43、44及48组成的群组的氨基酸序列的CDR。另外，MMP9结合蛋白可包含VH区，其具有选自由SEQIDNO:1、3、5、6、7、8、34、35、36及46组成的群组的氨基酸序列；及VL区，其具有选自由SEQIDNO:2、4、9、10、11、12、37、38、39、42、43、44及45组成的群组的氨基酸序列。此外，MMP9结合蛋白可包含与选自由SEQIDNO:30、32、46及47组成的群组的氨基酸序列具有95％序列一致性的VH区；及与选自由SEQIDNO:31、33、41、45及48组成的群组的氨基酸序列具有95％序列一致性的VL区。此外，MMP9结合蛋白可包含具有选自由SEQIDNO:30、32、46及47组成的群组的氨基酸序列的VH区；及具有选自由SEQIDNO:31、33、41、45及48组成的群组的氨基酸序列的VL区。本专利技术的另一实施例涉及一种医药组合物，其包含特异性结合到MMP9的表位的分离的抗体或其片段，其中所述表位包含在MMP9的区域内的氨基酸残基，所述区域由SEQIDNO:27的残基104-119、残基159-166或残基191-202组成；及医药学上可接受的赋形剂。在一个方面中，所述表位包含SEQIDNO:27的E111、D113、R162或I198。在另一个实施例中，所揭示的医药组合物另外包含一或多种选自由以下组成的群组的治疗剂：消炎剂、免疫治疗剂、化学治疗剂、抗癌剂、抗纤维化药剂或其组合。治疗剂的实例包括(但不限于)白蛋白结合型紫杉醇(nab-paclitaxel)、mFOLFOX6、FOLFIRI、卡铂(carboplatin)、紫杉醇(paclitaxel)、培美曲塞(pemetrexed)、贝伐单抗(bevacizumab)、抗赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)抗体、抗盘状结构域受体1(DDR1)抗体或其组合。还提供了例如使用非竞争性抑制MMP9的药剂抑制个体中的MMP9活性和/或治疗个体的疾病或病况的方法，及用于这些方法中的药剂(例如上述抗MMP9抗体和其它MMP9结合蛋白中的任一种)。所述方法一般是通过向个体投予例如有效量的MMP9结合蛋白，例如，如本文所提供的MMP9结合抗体或其片段，例如上述结合蛋白或片段中的任一种来进行。所述抗体或片段一般特异性结合到并且非竞争性抑制MMP9，通常由此使个体中的MMP9活性得到抑制。在一些情形中，所述抗体或片段为结合在催化结构域外部的MMP9，例如结合于上述表位之一中的抗体或片段。在一些情形中，所述抗体或片段实质上不结合到除MMP9外的MMP蛋白和/或实质上不结合到MMP2。另外提供了检测或监测MMP9活性的方法，所述方法包含使样品与MMP9结合蛋白接触，及评估MMP9结合蛋白-MMP9复合物的存在或不存在；其中不存在所述MMP9结合蛋白-MMP9复合物指示所述样品不具有所述MMP9活性，并且存在所述MMP9结合蛋白-MMP9复合物指示所述样品具有所述MMP9活性。MMP9活性可通过使用本文所揭示本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种医药组合物，其包含：结合到基质金属蛋白酶9MMP9的分离的抗体或其片段，其包含：具有氨基酸序列为SEQ ID NO:15的互补决定区CDR的重链可变VH区；和医药学上可接受的赋形剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.02.29 US PCT/US2012/027160;2012.02.29 US 61/61.一种医药组合物，其包含：a)医药学上可接受的赋形剂；和b)结合到基质金属蛋白酶9MMP9的分离的抗体或其片段，其包含：具有三个互补决定区CDR的重链可变VH区，其中重链CDR1是GYTFTSYWMN、重链CDR2是EIYPISGRTNYNEKFKV以及重链CDR3是SRANWDDY；和具有三个CDR的轻链可变VL区，其中轻链CDR1是SASQGISNYLN、轻链CDR2是YTSILHS以及轻链CDR3是QQYGWLPRT。2.根据权利要求1所述的医药组合物，其中所述VH区具有陈述于SEQIDNO:47的氨基酸序列；且所述VL区具有陈述于SEQIDNO:48的氨基酸序列。3.根据权利要求1或2中任一权利要求所述的医药组合物，其中所述抗体或片段抑制MMP9的酶活性。4.根据权利要求3所述的医药组合物，其中所述酶活性的所述抑制是非竞争性的。5.根据权利要求1或2中任一权利要求所述的医药组合物，其另外包含一或多种选自由以下组成的群组的治疗剂：消炎剂、免疫治疗剂、化学治疗剂、抗癌剂、抗纤维化药剂或其组合。6.根据权利要求5所述的医药组合物，其中所述一或多种治疗剂选自由以下组成的群组：白蛋白结合型紫杉醇、mFOLFOX6、FOLFIRI、卡铂、紫杉醇、培美曲塞、贝伐单抗、抗赖氨酰氧化酶样蛋白2LOXL2抗体、抗盘状结构域受体1DDR1抗体或其组合。7.一种有效量的医药组合物在制备用于抑制罹患MMP9相关性疾病或病况的个体中的MMP9活性的药物中的用途，其中所述医药组合物包含：a)医药学上可接受的赋形剂；和b)结合到基质金属蛋白酶9MMP9的分离的抗体或其片段，其包含：具有陈述于SEQIDNO:13、14和15的互补决定区CDR的重链可变VH区；和具有陈述于SEQIDNO:16、17和18的互补决定区CDR的轻链可变VL区。8.根据权利要求7所述的用途，其中所述MMP9相关性疾病或病况是a)癌症、自体免疫性、炎症性或纤维化疾病或病况；b)选自由如下组成的群组的癌症：胰脏癌(pancreaticcancer)、食管胃腺癌(esophagogastricadenocarcinoma)、非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer)、肺鳞状细胞癌(lungsquamouscellcarcinoma)、肺腺癌(lungadenocarcinoma)、胃腺癌(gastricadenocarcinoma)、头颈鳞状细胞癌(headandnecksquamouscellcarcinoma)、肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma)、结肠直肠癌(colorectalcancer)；c)选自由如下组成的群组的自体免疫性或炎症性疾病或病况：类风湿性关节炎、炎症性肠病IBD、败血病、多发性硬化、肌营养不良、狼疮、过敏症或哮喘。9.根据权利要求7所述的用途，其中所述MMP9相关性疾病或病况是：结肠直肠癌(colorectalcarcinoma)、胰脏腺癌(pancreaticadenocarcinoma)、结肠直肠腺癌(colorectaladenocarcinoma)、溃疡性结肠炎UC、克罗恩氏病CD或未定型结肠炎。10.根据权利要求7或9中任一权利要求所述的用途，其中结合到MMP9的分离的抗体或其片段包含具有陈述于SEQIDNO:3、5、6、7或8的氨基酸序列的VH区和具有陈述于SEQIDNO:4、9、10、11或12的氨基酸序列的VL区。11.根据权利要求10所述的用途，其中结合到MMP9的分离的抗体或其片段包含具有陈述于SEQIDNO:3的氨基酸序列的VH区和具有陈述于SEQIDNO:4的氨基酸序列的VL区。12.根据权利要求10所述的用途，其中结合到MMP9的分离的抗体或其片段包含具有陈述于SEQIDNO:7的氨基酸序列的VH区和具有陈述于SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL区。13.根据权利要求8所述的用途，其中所述癌症是胰脏癌(pancreaticcancer)、胃腺癌(gastricadenocarcinoma)、肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma)或结肠直肠癌(colorectalcancer)；所述自体免疫性或炎症性疾病或病况是类风湿性关节炎或炎症性肠病IBD。14.根据权利要求8所述的用途，其中所述癌症是结肠直肠癌(colorectalcarcinoma)、胰脏腺癌(pancreaticadenocarcinoma)，所述炎症性肠病是UC或CD。15.一种有效量的医药组合物在制备用于抑制罹患MMP9相关性疾病或病况的个体中的MMP9活性的药物中的用途，其中所述医药组合物包含：a)医药学上可接受的赋形剂；和b)结合到基质金属蛋白酶9MMP9的分离的抗体或其片段，其包含：具有三个CDR的VH区，其中重链CDR1是GYTFTSYWMN、重链CDR2是EIYPISGRTNYNEKFKV以及重链CDR3是SRANWDDY；和具有三个CD...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔安妮·I·亚当肯维克兹，维多莉亚·史密斯，宗·蔡，迈克尔·J·霍金斯，
申请(专利权)人：吉联亚生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US