LOX和LOXL2抑制剂及其应用制造技术

本申请涉及抗-LOX和抗-LOXL2抗体以及它们在纯化、诊断和治疗方法中的应用。抗体包括单克隆抗体、人源化抗体及其功能片段。可利用抗-LOX和抗-LOXL2抗体鉴定和治疗诸如纤维变性病症等病症，或防止上皮细胞生长状态向间充质细胞状态过渡。

【技术实现步骤摘要】
LOX和LOXL2抑制剂及其应用本申请是2008.08.01提交的CN200880101321.3，题为“LOX和LOXL2抑制剂及其应用”的分案申请。交叉引用本申请要求以下申请的优先权：2007年8月2日提交的美国临时申请号60/963,282，名为“MethodsforSelectingInhibitorsofTumorInvasion,Angiogenesis,andMetastasis(选择肿瘤侵入、血管生成和转移的抑制剂的方法)”(代理人案件号35120-704101)；2007年8月2日提交的美国临时申请号60/963,249，名为“TreatmentofDiseasesWithInhibitorsofActiveLysylOxidase(用活性赖氨酰氧化酶抑制剂治疗疾病)”(代理人案件号35120-706.101)；2007年8月2日提交的美国临时申请号60/963,214，名为“TreatmentofDiseasesThroughInhibitionofBothLysylOxidaseandLysylOxidase-LikeProteins(通过同时抑制赖氨酰氧化酶和赖氨酰氧化酶样蛋白质来治疗疾病)”(代理人案件号35120-706.102)；2007年8月2日提交的美国临时申请号60/963,248，名为“DiagnosisorMonitoringofDiseasesbyAssessingActiveLysylOxidaseLevelsorActivity(通过评估活性赖氨酰氧化酶水平或活性来诊断或监测疾病)(代理人案件号35120-706.103)；和2007年8月2日提交的美国临时申请号60/963,246，名为“CombinationTherapyIncludingLysylOxidaseModulators(包含赖氨酰氧化酶调节剂的组合治疗)”(代理人案件号35120-707.101)，本申请还与以下申请有关：2008年8月1日提交，名为“MethodsforSelectingInhibitorsofTumorInvasion,Angiogenesis,andMetastasis(选择肿瘤侵入、血管生成和转移的抑制剂的方法)”的共同待批美国专利申请(代理人案件号35120-704.201)，序列号[[__]]12/185,054，和2008年8月1日提交，名为“MethodsforSelectingInhibitorsofTumorInvasion,Angiogenesis,andMetastasis(选择肿瘤侵入、血管生成和转移的抑制剂的方法)”的PCT专利申请(代理人案件号35120-704.601)，序列号[[__]]PCT/US2008/009354，各份申请通过引用全文纳入本文。序列表的引用序列表在本申请实施例12之后。专利技术背景癌症是美国护其它发达国家的严重公众健康问题。目前，在美国每4例死亡中即有一例死于癌症。癌症治疗包括用化疗药物治疗患者来杀伤肿瘤细胞。然而，肿瘤细胞的亚组常对药物治疗耐受并能存活，从而在原部位或远端转移部位再次繁衍，进而导致可检测的疾病复发和发病率。据信，具有侵入性增加和转移能力以及药物耐受性改变等特性的许多癌肿瘤细胞经历包括或类似于EMT(上皮-间充质过渡)的形态转化。经历EMT的细胞丧失上皮细胞正常的黏着性并经历各种改变，包括E-钙粘蛋白表达和间充质标记物表达丧失，运动性增加、侵入性增加和对细胞死亡的耐受性增加。目前癌症的主导疗法是外科手术、放疗和化疗。化疗方法，例如抗-肿瘤抗生素，烷化剂、亚硝基脲化合物、长春花-生物碱、类固醇激素和抗-代谢药物构成了肿瘤学家可用疗剂的主体。虽然在癌症治疗领域已取得了进展，但癌症依然是主要的健康问题。血管生成是在已有毛细血管外形成新血管，其是各种生理学和病理学过程中一系列至关重要的事件。正常的组织生长，例如胚胎发育、伤口愈合和月经周期的特征在于依赖新血管形成来供应氧和营养物以及除去废物。大量不同且无关的疾病也与新血管系统有关。某些病状中，血管生成较低，应提高以改善疾病情况。然而，更常见的是，血管生成过度是各种病状的重要特征，包括以细胞增殖不正常或不受控为特征或与之有关的病状。涉及过度血管生成的病状包括，例如癌症(实体瘤和血液学肿瘤)、心血管疾病(例如动脉粥样硬化和再狭窄)、慢性炎症(类风湿性关节炎、克罗恩病)、糖尿病(糖尿病性视网膜病)、银屑病、子宫内膜异位、新生血管性青光眼和肥胖症(3)。这些病症可从血管生成的化疗抑制中获益。血管生成过程通常使正常情况下休眠的内皮增殖和迁移，细胞外周基质发生受控蛋白水解并且通过产生毛细血管而合成新胞外基质组分。新的胞内和胞间接触的建立，内皮细胞形态分化成毛细血管样管状网络支持它们随后的成熟、支化、重塑和选择性退化，从而形成高度组织的功能性微血管网络。在正常情况下，血管内皮与其周围基质组分以及与促血管生成和血管抑制细胞因子和协调生理学血管生成的生长因子的自分泌、旁分泌和两侧分泌(amphicrine)相互作用在空间和时间上受到严格调控。血管生成对肿瘤组织生长至关重要。观察到肿瘤比正常组织具有更多血管已有100多年了。几项实验性研究提示原发性肿瘤生长和转移需要新生血管形成。与上述良好协调的正常组织生长过程相反，活性肿瘤生长所需的病理性血管生成通常是持续性和持久的，血管生成表型的初始获得是各种实体瘤和血液学肿瘤类型产生的共同机制。不能募集和维持血管网络的肿瘤通常在原位保持休眠，就像无症状的病损。转移也依赖于血管生成：肿瘤细胞要成功转移，其通常必须能使用原发性肿瘤的血管系统、在循环中活下来、停在靶器官的微血管系统中、离开该血管系统、在靶器官中生长并在靶部位诱导血管生成。因此，血管生成看来是转移级联反应开始以及完成所必需的。因此，血管生成对于肿瘤生长和转移的重要性为化疗提供了最佳的潜在靶位。合适的抗-血管生成剂可通过延迟血管生成的开始(即，阻断“血管生成开关”)或通过阻断许多肿瘤类型特征性的持续和病灶新血管形成而直接或间接影响肿瘤-相关的血管生成。现正在多个临床试验中积极研究针对肿瘤-相关内皮以及涉及持续的病理性血管生成的多种分子和细胞过程及靶标的抗-血管生成治疗的安全性和效率。然而，就发现和/或鉴定到安全和/或有效的抗血管生成剂而言，迄今为止成功有限。纤维化是纤维组织的异常累积，作为伤口愈合过程的一部分会在受伤组织中发生。这种组织损伤可以是物理伤害、炎症、感染、接触毒素和其它原因所致。例如，肝脏(肝)纤维化可作为对慢性肝损伤的伤口愈合反应的一部分而发生。纤维化可作为血色病、威尔逊病、酒精中毒、血吸虫病、病毒性肝炎、胆管阻塞、接触毒素和代谢紊乱的并发症而发生。据信，这种疤痕组织的形成表示身体试图包裹受伤的组织。肝纤维化的特征在于胞外基质的累积，这在数量上与正常肝脏中不同。不作检查，肝纤维化会发展成肝硬化(定义为存在包裹的结节)、肝衰竭和死亡。Li和Frieman(Gastroenterol.Hepatol.14:618-633,1999)总结道，肝纤维化的实际和提出的治疗方案包括去除潜在的诱因(例如，毒素或感染因子)；抑制炎症(使用，例如皮质激素IL-1受体拮抗剂或本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段特异性结合具有SEQ ID NO:6所示氨基酸序列的表位。

【技术特征摘要】
2007.08.02 US 60/963,246;2007.08.02 US 60/963,249;1.一种分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段结合赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)，所述抗体或抗原结合片段具有可变重链，所述可变重链的氨基酸序列是SEQIDNO:1；和所述抗体或抗原结合片段具有可变轻链，所述可变轻链的氨基酸序列是SEQIDNO:2。2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段特异性结合包含SEQIDNO:6所示氨基酸序列的多肽。3.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段抑制LOXL2蛋白的酶活性。4.如权利要求3所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抑制是非竞争性的。5.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述可变重链具有三个互补决定区(CDR)，其中重链CDR1为SEQIDNO:41，重链CDR2为SEQIDNO:42，且重链CDR3为NWMN...

【专利技术属性】
技术研发人员：V·史密斯，S·奥格，P·范瓦拉西拉，V·E·巴里，D·马歇尔，A·K·霍尔泽，H·罗德里格斯，大保三穗，S·A·麦克考雷，C·A·加西亚，D·H·T·柏曼，
申请(专利权)人：吉联亚生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US