结合赖氨酰氧化酶样2（LOXL2）的抗体和其使用方法技术

本公开提供赖氨酰氧化酶样2(LOXL2)多肽结合剂，包含例如特异结合LOXL2多肽的抗体；和还提供包含其的组合物。所述结合剂能用于多种也提供的治疗和诊断方法。

【技术实现步骤摘要】
相关申请的交叉参考本申请要求2010年2月4日提交的美国临时专利申请第61/301,550号的权益，该专利申请通过引用全文纳入本文以用于所有目的。背景癌症在美国和其他发达国家中是严重的公共健康问题。当前，在美国四分之一的死亡病例由癌症引起。癌症疗法涉及用化疗药物治疗病人以杀死肿瘤细胞。然而，肿瘤细胞亚组通常耐受药物治疗并且在起始位点和远端转移位点存活而重新繁殖，导致可检测到的疾病复发和发病。很多癌肿瘤细胞有侵入和转移能力增加、和药物抗性改变的特性，认为其经历了形态转变，包含或类似与EMT(上皮间充质转化)。经历EMT的细胞丧失上皮细胞的正常粘着特性并经历一系列改变，包含E-钙粘着蛋白表达的丧失和间充质标记的表达、移动性增加、侵入性增加和对细胞死亡的抗性增加。已从鸡、大鼠、小鼠、牛和人中纯化赖氨酰氧化酶型酶。已知的赖氨酰氧化酶型酶包含长约205个氨基酸的共有催化结构域，其位于所述蛋白羧基末端部分且含有该酶的活性位点。所述活性位点包括含保守氨基酸序列的铜结合位点，所述序列含配位Cu(II)原子的4个组氨酸残基。所述活性位点还包含赖氨酰酪氨酰醌(LTQ)辅因子，由赖氨酸和酪氨酸残基(对应于大鼠赖氨酰氧化酶的lys314和tyr349，以及人赖氨酰氧化酶的lys320和tyr355)之间的分子内共价连接形成。形成LTQ辅因子的酪氨酸残基周围序列也在赖氨酰氧化酶型酶中保守。所述催化结构域还包含10个保守性半胱氨酸残基，其参与5个二硫键的形成。所述催化结构域还包括纤连蛋白结合域。最后，所述催化结构域中存在含有4个半胱氨酸残基的类似生长因子和细胞因子受体结构域的氨基酸序列。专利技术概述本专利技术提供特异结合LOXL2多肽的抗体，并且还提供包含其的组合物。所述抗体能用于多种也提供的治疗和诊断方法。因此，本专利技术包括但不限于所述下列实施方式。1.特异性结合由序列中氨基酸325-434所定义表位的赖氨酰氧化酶样2(LOXL2)的分离抗体示于图1和SEQIDNO:1。2.如实施方式1所述的分离抗体，其中所述表位包含序列TPAMGLQKK(SEQIDNO:2)内的氨基酸。3.如实施方式1所述的分离抗体，其中所述抗体抑制LOXL2多肽的酶活性。4.如实施方式1所述的分离抗体，其中所述抗体不抑制LOXL2多肽的酶活性。5.如实施方式1所述的分离抗体，其中所述抗体结合表位的亲和性约为107M-1-约1012M-1。6.如实施方式1所述的分离抗体，其中所述抗体包含重链，并且其中所述抗体的重链是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4的同种型。7.如实施方式1所述的分离抗体，其中所述结合剂进行可检测标记。8.如实施方式1所述的分离抗体，其中所述抗体是Fv、scFv、Fab、F(ab')2或Fab'。9.如实施方式1所述的分离抗体，其中所述抗体是人源化抗体。10.如实施方式1所述的分离抗体，其中所述抗体是嵌合抗体。11.如实施方式1所述的分离抗体，其中所述抗体包含选自非肽合成聚合物、脂质、脂肪酸、多糖、糖类或造影剂的共价连接部分。12.如实施方式11所述的分离抗体，其中所述合成聚合物是聚(乙二醇)聚合物。13.如实施方式1所述的分离抗体，其中所述抗体固定在固体支持物上。14.如实施方式1所述的分离抗体，其中所述抗体包含共价或非共价连接到抗体上的癌症化疗剂。15.一种治疗LOXL2相关病症的药盒，所述药盒包含含有如实施方式1所述的分离LOXL2结合剂的组合物，和药学上可接受的载体或赋形剂。16.如实施方式15所述的药盒，其中所述LOXL2相关病症是肿瘤、转移、血管生成或纤维化。17.如实施方式15所述的药盒，其中所述LOXL2结合剂包含可检测标记、治疗剂或两者都有。18.一种诊断LOXL2相关病症的方法，所述方法包含：通过将所述样品接触实施方式1所述的分离抗体，评价对象的样品中LOXL2的水平，其中样品内LOXL2水平相较参比样品的改变指示LOXL2相关病症的出现。19.如实施方式18所述的方法，其中所述LOXL2相关病症是肿瘤、转移、血管生成或纤维化。20.如实施方式19所述的方法，其中样品内LOXL2水平相较参比样品的增加指示其肿瘤或转移的出现或肿瘤或转移生长的增加。21.如实施方式20所述的方法，其中所述参比样品是取样时间点比对象样品更早的样品或与对象样品组织类型相同的未影响组织的样品，或者另一个体的样品。22.如实施方式18所述的方法，其中所述抗体进行可检测标记。23.一种通过用如实施方式1所述的分离抗体接触样品或细胞组织来抑制LOXL2活性的方法。24.如实施方式23所述的方法，其中接触发生在体外或离体。25.如实施方式23所述的方法，其中接触发生在体内。26.如实施方式23所述的方法，其中抑制LOXL2降低选自肿瘤生长、血管生成和纤维化的对象病症。27.一种降低对象中肿瘤生长的方法，所述方法包含给予所述对象如实施方式1所述的抗体。28.如实施方式27所述的方法，其中所述肿瘤是原发性肿瘤或转移肿瘤。29.如实施方式27所述的方法，其中所述肿瘤是实体瘤。30.一种抑制对象中血管生成的方法，所述方法包含给予所述对象如实施方式1所述的抗体。31.一种通过给予所述对象如实施方式1所述的抗体来抑制对象中纤维化疾病的方法。32.一种使用如实施方式1所述的抗体通过检测LOXL2水平和/或活性来监控对象响应抗LOXL2治疗的方法。附图简要说明图1显示人LOXL2蛋白的氨基酸序列(SEQIDNO:1)。示出所述信号肽序列(氨基酸1-25)，所述四个富含半胱氨酸清除受体(SRCR)域，和所述催化结构域。SRCR1从氨基酸58-159(包含端点)延伸；SRCR2从氨基酸188-302(包含端点)延伸，SRCR3从氨基酸325-425(包含端点)延伸，SRCR4从氨基酸435-544(包含端点)延伸和催化结构域从氨基酸548-774(包含端点)延伸。图2中图片A显示所述人LOXL2蛋白的示意图，示出所述SRCR1、SRCR2、SRCR3和SRCR4结构域。还示出所述催化结构域(标记的“LOX样结构域”)，和某些合成LOXL2构建中存在的myc表位标签和His6纯化标签(标记的“6Xhis”)的定位。示意图下面显示由结构域多肽集合表示的序列部分，用于实施例4中讨论的作图实验。也参见表2。图2中图片B显示所述多肽的所述氨基酸序列，示意图示于图2中图片A。...

【技术保护点】
一种特异结合由图1和SEQ ID NO:1所示序列的氨基酸325‑434所定义表位的赖氨酰氧化酶样2(LOXL2)的分离抗体。

【技术特征摘要】
2010.02.04 US 61/301,5501.一种特异结合由图1和SEQIDNO:1所示序列的氨基酸325-434所定义表位的赖氨酰
氧化酶样2(LOXL2)的分离抗体。
2.一种治疗LOXL2相关病症的药盒，所述药盒包含
含有如权利要求1所述的经分离LOXL2结合剂的组合物，和
药学上可接受的载体或赋形剂。
3.一种诊断LOXL2相关病症的方法，所述方法包含：
通过用权利要求1所述的分离抗体接触所述样品，评价对象的样品中LOXL2的水平，
其中样品内LOXL...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·A·麦克考雷，H·罗德里格斯，C·A·加西亚，V·史密斯，
申请(专利权)人：吉联亚生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US