一种检测 TUBB3 mRNA 基因表达量的试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了一种检测TUBB3mRNA基因表达量的试剂盒及方法。该试剂盒包括用于制作标准曲线的标准品、内参基因实时定量PCR体系。通过该方法能准确、快速、定量地确定TUBB3基因表达量。本发明专利技术所述方法和试剂盒应用在临床中，有利于医生合理化选择抗微管类进行治疗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体涉及一种检测TUBB3 mRNA基因表达量的试剂盒及方法。
技术介绍
抗微管类药物是一类以细胞微管蛋白为作用靶点的药物。通过作用于细胞微管而影响纺锤体形成，并抑制细胞有丝分裂的一类广谱化疗药。目前常用的抗微管类药物主要有:紫杉醇、多西他赛、长春碱、长春新碱和长春瑞滨等。紫杉醇/多西他赛作用于肿瘤细胞后，可以促进肿瘤细胞内的微管聚合以及稳定已聚合的微管，导致细胞内大量微管聚集，进而干扰细胞各种功能，特别是使细胞停止分裂。长春碱/长春新碱等可以抑制肿瘤细胞内微管蛋白的聚合、抑制纺锤体微管的形成，使核分裂停滞于细胞分裂中期，从而抑制肿瘤细胞生长。微管蛋白α和微管蛋白β构成的α，β异二聚体是微管装配的基本单位，也是许多抗微管类药物的作用靶点。其中TUBB3编码的β-tubulin-1II(III型微管蛋白)与抗微管类药物的疗效关系最为密切。多种肿瘤细胞系的研究及大量临床试验结果均显示TUBB3 mRNA的表达水平与抗微管类药物的疗效密切相关(Pascal S and Charles D.Lancet Oncol.2008;9:168-75.)。低表达患者接受本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测?TUBB3?mRNA?基因表达量的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括以下组成部分：（1）TUBB3基因标准品：含有TUBB3基因编码序列的重组载体，所述TUBB3基因编码序列如SEQ?ID?NO.1所示；（2）检测TUBB3基因的上、下游引物：TUBB3?上游引物：5’??GGCCTCTTCTCACAAGTACG??3’；TUBB3?下游引物：5’??GAAGAGATGTCCAAAGGCCC??3’。

【技术特征摘要】
1.一种检测TUBB3 mRNA基因表达量的试剂盒，其特征在于:所述试剂盒包括以下组成部分: (OTUBB3基因标准品:含有TUBB3基因编码序列的重组载体，所述TUBB3基因编码序列如SEQ ID N0.1所示； (2)检测TUBB3基因的上、下游引物: TUBB3-上游引物:5’ - GGCCTCTTCTCACAAGTACG -3’ ； TUBB3-下游引物:5’ - GAAGAGATGTCCAAAGGCCC -3’。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于:所述重组载体的空载体为PUC57载体。3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于:所述试剂盒还包括逆转录缓冲液、逆转录引物Oligo-(dT)、dNTPs溶液、M-MLV逆转录酶、定量PCR缓冲液和TaqDNA聚合酶。4.一种基于权利要求1至3任一项所述试剂盒检测TUBB3 mRNA基因表达量的方法，包括如下步骤: (O从待测标本中提取总...

【专利技术属性】
技术研发人员：张伟，郭成贤，陈小平，刘昭前，周宏灏，
申请(专利权)人：周宏灏，
类型：发明
国别省市：