一种检测 ERCC1 mRNA 基因表达量的试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了一种检测ERCC1mRNA基因表达量的试剂盒及方法。该试剂盒包括用于制作标准曲线的标准品、内参基因实时定量PCR体系。通过该方法能准确、快速、定量地确定ERCC1基因表达量。本发明专利技术所述方法和试剂盒应用在临床中，有利于医生合理化选择铂类进行治疗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体涉及一种检测ERCCl mRNA基因表达量的试剂盒及方法。
技术介绍
钼类药物是最常用的肿瘤化疗药物之一，包括顺钼、卡钼和奥沙利钼等。其药理学机制主要是通过引起肿瘤细胞内DNA的交联，阻碍DNA合成与复制，从而抑制肿瘤细胞的生长。DNA修复是钼类药物耐药性产生的主要原因。ERCCl (excision repair crosscomplementation I,切除修复交叉互补基因I)是核苷酸外切修复家族中的重要成员，参与DNA链的切割和损伤修复过程。ERCCl表达量直接影响DNA的修复。ERCCl在所有的肿瘤细胞中都存在表达，而且表达水平差异很大。临床研究已证实ERCCl参与钼类药物耐药的发生，其表达水平与多种肿瘤钼类药物化疗的疗效和生存期呈负相关(Olaussen KA et al.N Engl J Med.2006; 355(10): 983-91.)，即表达水平低的患者对钼类药物敏感，反之表达水平高的患者则耐药。美国国家综合癌症网络(NCCN)临床实践指南(第二版，2010)中明确指出:在接受钼类药物化疗前进行ERCCl基因水平的表达检测(N本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测?ERCC1?mRNA?基因表达量的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括以下组成部分：（1）ERCC1基因标准品：含有ERCC1基因编码序列的重组载体，所述ERCC1基因编码序列如SEQ?ID?NO.1所示；（2）检测ERCC1基因的上、下游引物：ERCC1?上游引物：5’??TGTCCAGGTGGATGTGAAAG??3’；ERCC1?下游引物：5’??GAGGATCAATGTGCAGTCGG??3’。

【技术特征摘要】
1.一种检测ERCCl mRNA基因表达量的试剂盒，其特征在于:所述试剂盒包括以下组成部分: (1)ERCCl基因标准品:含有ERCCl基因编码序列的重组载体，所述ERCCl基因编码序列如SEQ ID N0.1所示； (2)检测ERCCl基因的上、下游引物: ERCCl-上游引物:5’ - TGTCCAGGTGGATGTGAAAG -3’ ； ERCCl-下游引物:5 ’ - GAGGATCAATGTGCAGTCGG -3’。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于:所述重组载体的空载体为PUC57载体。3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于:所述试剂盒还包括逆转录缓冲液、逆转录引物Oligo-(dT)、dNTPs溶液、M-MLV逆转录酶、定量PCR缓冲液和TaqDNA聚合酶。4.一种基于权利要求1至3任一项所述试剂盒检测ERCCl mRNA基因表达量的方法，包括如下步骤: (O从待测标本中提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：张伟，郭成贤，陈小平，刘昭前，周宏灏，
申请(专利权)人：周宏灏，
类型：发明
国别省市：