用于检测牛白细胞粘附缺陷病的引物及探针、试剂盒和方法技术

本发明专利技术公开了用于检测牛白细胞粘附缺陷病的引物及探针。本发明专利技术还涉及用于检测牛白细胞粘附缺陷病的实时荧光定量PCR检测方法，所述方法包括本发明专利技术的引物和探针。本发明专利技术还涉及用于检测牛白细胞粘附缺陷病的试剂盒，所述试剂盒包括本发明专利技术的引物和探针。本发明专利技术的实时荧光定量PCR检测方法，用于检测活体牛或非活体牛时，具有操作简便，耗时短，成本低，特异性强，重复性和稳定性高，灵敏度高的特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于动物检测生物
，具体涉及应用实时荧光定量PCR的方法检测牛白细胞粘附缺陷病的引物及探针、试剂盒和方法。
技术介绍
牛白细胞粘附缺陷病((bovineleukocyte adhesion deficiency, BLAD)是一种常染色体单基因隐性遗传疾病，它的特征表现为严重的重复性感染、伤口愈合延迟和发育不良，而且还伴有明显的持续性中性粒细胞增多。BLAD发生的分子生物学理论根据是在基因CD18的383的位置上发生点突变，腺嘌呤突变为鸟嘌呤，即导致在粘附分子CD18的氨基酸128天门冬氨基酸由甘氨酸代替(D128G)。患有BLAD牛的中性粒细胞的白细胞粘附分子的β 2整合素(⑶11a，b，c/⑶18)的表达出现障碍，致使白细胞粘附依赖性功能表现出明显的异常。1983年，报道了一例Holstein小母牛发病，怀疑是白细胞功能障碍，称为粒细胞病。1987年，日本报道有几例Holstein牛与持续性和反复性中性粒细胞病有相似的临床特征。1990年，人们从一头患粒细胞综合症的牛身上发现β 2整合素分子在白细胞上的表达缺陷，这种病与人LAD是非常相似的，因此命名为BLAD。本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于检测牛白细胞粘附缺陷病的引物及探针，其特征在于：引物包括上游引物：5’?TTGCGTTCAACGTGACCTTC?3’和下游引物5’??TCACCCCCCAGCTTCTTG??3’；探针包括突变型等位基因探针：HEX?5’?CCATCGGCCTGTAC?3’?MGB和野生型等位基因探针：FAM?5’?CCCATCGACCTGTACT?3’?MGB。

【技术特征摘要】
1.于检测牛白细胞粘附缺陷病的引物及探针，其特征在于:引物包括上游引物:5’ -TTGCGTTCAACGTGACCTTC-3’ 和下游引物 5’ - TCACCCCCCAGCTTCTTG -3，;探针包括突变型等位基因探针:HEX-5’ -CCATCGGCCTGTAC-3’ -MGB和野生型等位基因探针:FAM-5’ -CCCATCGACCTGTACT-3’ -MGB。2.于检测牛白细胞粘附缺陷病的试剂盒，其特征在于:含有如权利要求1所述的引物和探针。3.于检测牛白细胞粘附缺陷病的方法，其特征在于:使用如权利要求1所述的引物和探针或如权利要求2所述的试剂盒，采用实时荧光定量PCR的方法，包括实时荧光定量PCR反应体系的配制及实时荧光定量PCR反应。4.权利要求3所述的用于检测牛白细胞粘附缺陷病的方法，其特征在于:在实时荧光定量PC...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢明星，彭小莉，刘棠，陈伟玲，王群力，王景明，徐维佳，孙福泉，王伟，
申请(专利权)人：厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：