一种检测Camv35S启动子的RPA引物、试剂盒及检测方法技术

一种检测Camv35S启动子的RPA引物、试剂盒及检测方法，该RPA引物具有高度专一性，用生物素、地高辛或FITC分别进行标记后，在RPA扩增反应中，无需引入探针，RPA扩增结束后，利用双标记核酸产物检测试纸条，仅需5～10分钟，就能快速检测被检制品中是否含有转基因成分，检测结果准确可靠，灵敏度高，直观性强，省去了电泳的步骤，也无需用到高致癌性的荧光染料溴化乙锭，大大缩短了实验进程，简化了实验步骤，在准确性及快速检测方面得到了显著的提高。

RPA primer, reagent kit and detection method for detecting Camv35S promoter

A RPA primer, detection of Camv35S promoter kit and the detection method, the RPA primers have high specificity, were labeled with biotin or digoxigenin, respectively FITC, RPA amplification reaction, without introducing the probe, after RPA amplification, using double labeling product of nucleic acid detection strip, only 5 ~ 10 minutes, can be detected whether the rapid detection of products containing genetically modified ingredients, accurate and reliable, high sensitivity, strong visibility, electrophoresis step is omitted, also no need to use the fluorescent dye ethidium bromide high carcinogenicity, shorten experimental process, simplify the experimental procedures, has been significantly improved in terms of accuracy rapid detection and.

【技术实现步骤摘要】
一种检测Camv35S启动子的RPA引物、试剂盒及检测方法
本专利技术属于转基因安全生物
，具体涉及一种检测Camv35S启动子的RPA引物、试剂盒及检测方法。
技术介绍
转基因技术快速发展，目前，在我国已经有多个转基因作物品系进入安全评价阶段，申请商业化种植。与此同时，因转基因作物扩散引起的安全性问题受到了公众的广泛关注。为保护消费者的知情权和选择权，落实转基因产品标识制度、防止转基因作物未经安全批准进入生产流通环节，迫切需要建立快速简便的核酸检测方法，用于市场监管和例行监测。而在转基因检测中，目前，常规PCR检测方法存在操作繁琐、成本高、单一性等问题，不能适应现代经济的快速发展和频繁的贸易往来。重组酶聚合酶扩增(RecombinasePolymeraseAmplification，RPA)，与普通PCR不同，其模仿体内复制机理，反应不需要退火过程，整个反应简单快速，能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。利用该方法建立的检测技术体系，适合于大规模的转基因植物的检测，可以极大的提高现场检测效率，并为我国在转基因产品的现场速测方面跻身世界前列奠定良好的基础。RPA方法的关键本文档来自技高网...

【技术保护点】
一组检测Camv35S启动子的RPA引物，包括：RPA‑35S‑F：5'‑CCTCTGCCGACAGTGGTCCCAAAGATGGACC‑3'；RPA‑35S‑R：5'‑CCCTTACGTCAGTGGAGATATCACATCAATCC‑3'。

【技术特征摘要】
1.一组检测Camv35S启动子的RPA引物，包括：RPA-35S-F：5'-CCTCTGCCGACAGTGGTCCCAAAGATGGACC-3'；RPA-35S-R：5'-CCCTTACGTCAGTGGAGATATCACATCAATCC-3'。2.检测Camv35S启动子的RPA标记引物组，其由正向引物RPA-35S-F-地和反向引物RPA-35S-R-FITC组成，或由正向引物RPA-35S-F-生和反向引物RPA-35S-R-FITC组成，或由正向引物RPA-35S-F-生和反向引物RPA-35S-R-地组成；其中，所述正向引物为经生物素或地高辛对权利要求1所述RPA-35S-F引物的5'端标记的标记引物，具体为：RPA-35S-F-地：5'-Dig-CCTCTGCCGACAGTGGTCCCAAAGATGGACC-3'；RPA-35S-F-生：5'-Biotin-CCTCTGCCGACAGTGGTCCCAAAGATGGACC-3'；所述反向引物为用FITC或地高辛对权利要求1所述RPA-35S-R引物的5'端标记的标记引物，具体为：RPA-35S-R-FITC：5'-6-FAM-CCCTTACGTCAGTGGAGATATCACATCAATCC-3'；RPA-35S-R-地：5'-Dig-CCCTTACGTCAGTGGAGATATCACATCAATCC-3'。3.一种检测Camv35S启动子的RPA检测试剂盒，其含有权利要求1所述的RPA引物或权利要求2所述的RPA标记引物组。4.一种检测Camv35S启动子的RPA检测方...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘华，唐雪明，王金斌，郑思英，白蓝，蒋玮，吴潇，潘爱虎，贾军伟，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：上海,31