【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
应用ＡＳ－ＰＣＲ在体外检测牛白细胞粘附缺陷的方法，其步骤如下 １）设计特异性引物对，该引物对的ＤＮＡ序列如下所示： 基因ＣＤ１８的扩增引物： 突变型：扩增产物长度为５００ｂｐ， 引物１，正向引物：５′ＡＡＧＡＴＧＡＣＧＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡ ３′， 引物２，反向引物：５′ＧＴＣＣＡＴＣＡＧＧＴＡＧＴＡＣＡＧＧＣ ３′； 野生型：扩增产物长度为８１８ｂｐ； 引物３：５′ＣＡＡＧＧＧＣＴＡＣＣＣＣＡＴＣＧＡ ３′， 引物４：５′ＣＡＧＧＡＣＴＧＣＧＴＧＧＣＴＡＡＡ３′； ２）ＰＣＲ过程如下： 将同一份ＤＮＡ样本使用２个２０μＬ体系进行扩增：２０μＬ体系包括１０×Ｂｕｆｆｅｒ２．０μＬ，２５ｍＭＭｇ２＋１．５μＬ，１０μＭ用于ＡＳ－ＰＣＲ反应的引物各０．５μＬ，１０ｍＭｄＮＴＰ０．４μＬ，５Ｕ／μＬＴａｑ酶０．４μＬ，５００ｎｇ／μＬＤＮＡ１．０μＬｄｄＨ↓［２］Ｏ１３．７μＬ，混匀、瞬时离心； ＰＣＲ反应条件：９４℃预热１０ｍｉｎ，９４℃变性４５ｓ，６５℃４５ｓ，７２℃延伸４５ｓ，从第二步９４℃变性到第四步７２延伸进行３５个循环，７２℃延伸１０ｍｉｎ，１５℃１０ｍｉｎ。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张淑君，杨利国，王成，张滢寅，贾启涛，李翔，熊家军，滑国华，梁爱心，刘耘，江一波，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：83
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。