一种检测M BCR融合基因mRNA表达量的试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种检测M?BCR融合基因mRNA的荧光定量PCR诊断试剂盒，属于生物技术领域。包含检测用引物、荧光探针、cDNA第一链合成试剂、荧光定量PCR混合液、阴性对照和阳性对照，所述检测用引物、荧光探针包括M?BCR融合基因引物、内参基因ABL引物及Taqman荧光探针。能有效地检测e14a3、e13a3、e14a2和e13a2等M?BCR融合基因形式。M?BCR融合基因是多能造血干细胞恶性克隆的基因标志，是慢性粒细胞白血病典型的分子标志物，其与抑制白血病细胞的凋亡有关。采用敏感性及特异性均较高的荧光定量PCR检测M?BCR融合基因mRNA表达量，其检测结果的特异性和敏感度均显著提高。本发明专利技术试剂盒为临床慢性粒细胞白血病患者制定治疗方案以及预测预后提供了一种全新的快速简便的基因诊断技术。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体涉及一种检测M BCR融合基因mRNA表达量的试剂盒。
技术介绍
慢性粒细胞白血病（chronic myelocytic leukemia,CML）患者的血细胞中除了90%出现Ph1染色体阳性以外，还多伴随有t(9；22)(q34；q11)易位，即位于9号染色体长臂上的abl原癌基因易位到22号染色体长臂的断裂点集中区bcr，形成M BCR融合基因。该融合基因负责编码具有增强酪氨酸激酶的活性的P210蛋白，从而改变细胞多种蛋白质酪氨酸磷酸化水平和细胞微丝机动蛋白的功能，导致细胞内信号传导异常，使细胞丧失对周围环境的反应性，延缓凋亡的发生。BCR-ABL融合基因转阴率和Ph+细胞消失率与慢性粒细胞白血病患者的疾病进展密切相关。一旦BCR-ABL融合基因转阴率和Ph+细胞消失率得不到及时改善，慢性粒细胞白血病将有可能从慢性期发展到加速期和急变期。酪氨酸激酶抑制剂是治疗慢性粒细胞白血病的主要药物，但有患者对此类药物存在原发性抵抗或者由于长期给予此药而出现继发性抵本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测M？BCR融合基因mRNA表达量的试剂盒，包含检测用引物、荧光探针、cDNA第一链合成试剂、荧光定量PCR混合液、阴性对照和阳性对照，其特征在于，所述检测用引物、荧光探针包括M？BCR融合基因引物、内参基因ABL引物及Taqman荧光探针，其中：M？BCR融合基因上游引物序列如序列表中SEQ？ID？NO:1所示；M？BCR融合基因下游引物序列如序列表中SEQ？ID？NO:2所示；M？BCR融合基因Taqman荧光探针如序列表中SEQ？ID？NO:3所示；ABL基因上游引物序列如序列表中SEQ？ID？NO:4所示；ABL基因下游引物序列如序列表中SEQ？ID？NO:5所示；ABL基因Ta...

【技术特征摘要】
2012.09.29 CN 201210376427.21.一种检测M BCR融合基因mRNA表达量的试剂盒，包含检测用引物、荧光探针、
cDNA第一链合成试剂、荧光定量PCR混合液、阴性对照和阳性对照，其特征在于，所述
检测用引物、荧光探针包括M BCR融合基因引物、内参基因ABL引物及Taqman荧光探
针，其中：
M BCR融合基因上游引物序列如序列表中SEQ ID NO:1所示；
M BCR融合基因下游引物序列如序列表中SEQ ID NO:2所示；
M BCR融合基因Taqman荧光探针如序列表中SEQ ID NO:3所示；
ABL基因上游引物序列如序列表中SEQ ID NO:4所示；
ABL基因下游引物序列如序列表中SEQ ID NO:5所示；
ABL基因Taqman荧光探针如序列表中SEQ ID NO:6所示；
所述cDNA第一链合成试剂含有MgC12、逆转录酶缓冲液、dNTPs、RNA酶抑制剂、
Oligo(dT)15、AMV逆转录酶和无RNase去离子水；所述荧光定量PCR混合液含有PCR预
混合液、Mg2+、dNTPs、dUTP、Taq酶、UNG酶和无RNase去离子水。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括内部阳性控制序列、
内部阳性控制序列的引物和Taqman荧光探针，其中：内部阳性控制序列如序列表中SEQ ID
NO:7所示；内部阳性控制序列的上游引物如序列表中SEQ ID NO:8所示；...

【专利技术属性】
技术研发人员：李艳，童永清，
申请(专利权)人：李艳，童永清，
类型：发明
国别省市：