一种葡萄芽变的快速区分方法技术

技术编号:8410143 阅读:396 留言:0更新日期:2013-03-14 00:44
本发明专利技术公开了一种葡萄芽变的快速区分方法,包括以下步骤:提取亲本葡萄植株及对应的疑似芽变葡萄植株的DNA,用iPBS引物分别对DNA扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳区分芽变,亲本及疑似芽变品种电泳条带有差异,疑似芽变品种为芽变。本发明专利技术以3组早熟芽变葡萄品种为原料,利用iPBS分子标记有效区分了芽变葡萄品种,同时本发明专利技术无需预知反转录转座子的相关序列,具有较强的通用性,为有效选择变异奠定了理论基础。本发明专利技术操作简便、用途广泛,节约了大量的人力和物力,便于推广。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种葡萄芽变的快速区分方法,属于生物学分子标记领域。
技术介绍
芽变(bud sport、bud mutation)是体细胞突变(somatic mutation)的一种。芽变选种作为葡萄育种的一种方式,与其它育种方式(实生选种、杂交育种、辐射诱变育种、原生质体融合育种等)相比,有着独特的优势。其变异性状在田间容易被发现,可通过嫁接繁殖被保存下来而没有童期的干扰,可较快地进行鉴定和推广应用。芽变是细胞中遗传物质的突变,只有梢端组织分生层的细胞发生突变时才有可能成为一个芽变。组织发生层学说是目前解释芽变的主要学说,被子植物梢端分生组织都有几个相互区分的细胞层,叫组织发生层,分别用LⅠ、LⅡ、LⅢ表示。植物的组织即由这三层细胞分别衍生而成,各个组织发生层按不同的方式进行细胞分裂,并且衍生为特定的组织。LⅠ层细胞进行垂周分裂,形成一层细胞,衍生为表皮和果肉。LⅡ层细胞进行垂周分裂,形成1-3层细胞,衍生为皮层的外层及孢原组织。LⅢ层细胞既有平周分裂,又有垂直分裂和斜向分裂,形...

【技术保护点】
一种葡萄芽变的快速区分方法,其特征在于,包括以下步骤:提取亲本葡萄植株及对应的疑似芽变葡萄植株的DNA,用iPBS引物分别对DNA进行PCR扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳区分芽变,亲本及疑似芽变品种电泳条带有差异,疑似芽变品种为芽变。

【技术特征摘要】
1.一种葡萄芽变的快速区分方法,其特征在于,包括以下步骤:提取亲本葡萄植株及对
应的疑似芽变葡萄植株的DNA,用iPBS引物分别对DNA进行PCR扩增,扩增产物进行琼
脂糖凝胶电泳区分芽变,亲本及疑似芽变品种电泳条带有差异,疑似芽变品种为芽变。
2.根据权利要求1所述的一种葡萄芽变的快速区分方法,其特征在于,所述的提取葡萄
植株的DNA可以从葡萄植株的叶片、根、茎、果实或花中提取。
3.根据权利要求2所述的一种葡萄芽变的快速区分方法,其特征在于,所述的葡萄植株
的DNA提取方法,包括以下步骤:
1)研钵预冷后,放入叶片、聚乙烯基吡咯烷酮和液氮,研磨成细粉放入离心管并﹣20℃
冷藏30min;
2)将热的CTAB提取缓冲液装入步骤1)的离心管中,使叶片组织均匀分散在缓冲液中,
65℃水浴90min,每隔5min轻轻颠倒摇匀一次;
3)将步骤2)的离心管冷却至室温,加入等体积的氯仿:异戊醇体积比为24:1的混合溶
液,摇匀,4000r/m离心10min;
4)取上清液,加入等体积的氯仿:异戊醇体积比为24:1的混合溶液,摇匀,4000r/m离
心10min;
5)取上清液,加入2...

【专利技术属性】
技术研发人员:郭大龙张国海侯小改张潇玉郭明晓
申请(专利权)人:河南科技大学
类型:发明
国别省市:

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