一种RB1基因突变检测特异性引物和液相芯片制造技术

本发明专利技术公开了一种RB1基因检测特异性引物和液相芯片，该液相芯片主要包括有：每种由5’端的tag序列和3’端针对目的基因突变位点的特异性引物序列组成的ASPE引物，所述特异性引物序列为：针对C1654T位点的SEQ?ID?NO.7及SEQ?ID?NO.8；针对C1666T位点的SEQ?ID?NO.9及SEQ?ID?NO.10；和/或针对C1981T位点的SEQ?ID?NO.11及SEQ?ID?NO.12；有anti-tag序列包被的微球；扩增引物。本发明专利技术所提供的检测液相芯片的检测结果与测序法的吻合率高达100％，实现多个突变位点的野生型和突变型并行检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学领域，涉及医学和生物技术，具体的是涉及一种RBl基因突变检测特异性引物和液相芯片。
技术介绍
视网膜母细胞瘤基因KRetinoblastomal，RBl)是人类第一个分离克隆的抑癌基因。因为该基因与视网膜母细胞瘤的发生密切相关，因此被命名为视网膜母细胞瘤基因。RBl基因是细胞周期的负调控因子，通过与转录因子结合调节细胞增殖和分化所需基因的表达，从而维持细胞生长发育的平衡。因此，该基因的功能与细胞周期、细胞衰老、细胞凋亡、细胞分化和生长抑制等有关。目前，对RBl基因突变进行检测和分析的方法很少，主要有直接测序法和单链构象多态性分析法(Single-Strand ConformationPolymorphism, SSCP),其中最常用的方法有PCR产物的SSCP分析法。SSCP分析法主要是通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离具有不同空间结构的单链DNA分子，并通过放射性自显影、银染或溴化乙锭显色分析结果，通过单链DNA带迁移率与正常对照的相对比，判定该链构象发生改变，进而推断该DNA片段中有碱基突变，该方法简便、快速；但是，SSCP分析法并不能确定碱基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种RB1基因突变检测液相芯片，其特征是，包括有：(A).针对RB1基因不同突变位点分别设计的野生型和突变型的ASPE引物：每种ASPE引物由5’端的tag序列和3’端针对目的基因突变位点的特异性引物序列组成，所述特异性引物序列为：针对C1654T位点的SEQ?ID?NO.7及SEQ?ID?NO.8；针对C1666T位点的SEQ?ID?NO.9及SEQ?ID?NO.10；和/或针对C1981T位点的SEQ?ID?NO.11及SEQ?ID?NO.12；所述tag序列选自SEQ?ID?NO.1～SEQ?ID?NO.6；(B).有anti?tag序列包被的、具有不同颜色编码的微球，所述anti?ta...

【技术特征摘要】
1.一种RBl基因突变检测液相芯片，其特征是，包括有 (A).针对RBl基因不同突变位点分别设计的野生型和突变型的ASPE引物每种ASPE引物由5’端的tag序列和3’端针对目的基因突变位点的特异性引物序列组成，所述特异性引物序列为针对C1654T位点的SEQ ID NO. 7及SEQ ID NO. 8 ;针对C1666T位点的SEQID NO. 9 及 SEQ ID NO. 10 ;和 / 或针对 C1981T 位点的 SEQ ID NO. 11 及 SEQ ID NO. 12 ;所述 tag 序列选自 SEQ ID NO.1 SEQ ID NO. 6 ； (B).有ant1-tag序列包被的、具有不同颜色编码的微球,所述ant1-tag序列与微球连接中间还设有间隔臂序列；所述ant1-tag序列选自SEQ ID NO. 13 SEQ ID NO. 18，且所述ant1-tag序列能相应地与(A)中所选的tag序列互补配对； (C).用于扩增出需要检测的、具有相应突变位点的目标序列的引物。2.根据权利要求1所述的RBl基因突变检测液相芯片，其特征是，所述扩增引物为针对 C1654T、C1666T 位点的 SEQ ID NO. 19 及 SEQ ID NO. 20 ;和 / 或针对 C1981T 位点的 SEQIDNO. 21 及 SEQ ID NO. 22。3.根据权利要求1所述的RBl基因突变检测液相芯片，其特征是，所述ASPE引物为针对C1654T位点的由SEQ ID NO.1和SEQ ID NO. 7组成的序列及由SEQ ID NO. 2和SEQ IDNO. 8组成的序列；针对C1666T位点的由SEQ ID NO. 3和SEQ ID NO. 9组成的序列及由SEQID NO. 4和SEQ ID NO. 10组成的序列；和/或针对C1981T位点的由SE...

【专利技术属性】
技术研发人员：许嘉森，何嘉英，陈家欣，
申请(专利权)人：广州益善生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：