本发明专利技术公开了一种五味子酚单体的分离纯化方法，属于中药活性成分的分离纯化技术领域。本发明专利技术是以五味子为原料，通过乙醇回流提取、正己烷及乙酸乙酯萃取、溶解结晶得到五味子酚单体。本发明专利技术通过最适宜的工艺及参数条件，使产品中五味子酚的含量达到98%以上；整个工艺过程操作简便、工艺稳定、成本低廉，适合工业化生产，且分离效率高、产品纯度高，即可大量实现五味子酚单体的高纯度分离制备。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种中药活性成分的分离纯化方法，具体涉及从五味子中提取一种木脂素即五味子酚的方法，属于中药分离纯化
技术介绍
五味子酌·英文名schisanhenol, schizanhenol, CAS :69363-14-0,分子式为C23H3tlO6,分子量为402. 20，结构式如下基 -1 五味子作为传统常用中药，有敛肺生津、补肾养心、收敛固涩之功效，主治肺虚喘咳、津亏口渴、自汗盗汗、梦遗滑精、久泻久痢、失眠健忘、心悸怔忡，是常用中药之一。近年发现它除了具保肝降酶作用外，还具有抗癌、抗艾滋病毒(HIV)、拮抗血小板活化因子(PAF)和抑制醛糖还原酶等多种活性。五味子含有多种木脂素类化合物，其中的五味子酚为主要的特征性成分。由于五味子酚对中枢神经系统有镇静、催眠、抗惊厥的作用，因而对于保护脑神经细胞，促进脑内蛋白质合成和改善智力、体力有一定功效。同时，对多种实验动物还有明显的呼吸兴奋作用，使呼吸加深、加快，并能对抗吗啡的呼吸抑制作用。五味子酚可以降低肝炎患者血清中的谷丙转氨酶，主要的降酶机制是促进肝细胞修复或抑制肝细胞病变，使细胞膜通透性降低，从而减少漏入血浆中的转氨酶，临床上用于治疗肝炎。五味子酚能促进肝糖原合成，力口强糖代谢，和增加肝细胞蛋白质的合成；同时有促进淋巴细胞DNA合成的作用，增加淋巴母细胞生成，促进脾免疫功能。因此，从原植物中分离得到该化合物，对质量控制指标、阐明其药理作用以及为新药开发寻找先导化合物具有重要的意义。中国专利CN200910242188. X公开了一种五味子单体成分的分离制备方法，将五味子乙醇提取物用石油醚萃取，将石油醚萃取物采用硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯洗脱，HPLC监测，收集洗脱流分粗提物A，粗提物B ;洗脱剂石油醚-乙酸乙酯体积比为3-5 1 ;粗提物A和粗提物B分别应用高速逆流色谱进行分离，得到五味子酚、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙和五味子酯乙单体，纯度均高于98%。该方法制备复杂，步骤多，制备成本高，且不适用于大量制备或者工业化生产。
技术实现思路
本专利技术旨在克服现有技术的缺陷，提供一种快速简便、成本低廉、可适用于大量制备或工业化生产的五味子酚的分离纯化方法。本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的。—种五味子酚的分离纯化方法，其特征在于以五味子为原料通过提取、萃取、结晶得到五味子酚单体，具体包括如下工艺步骤 A、提取 将五味子粉碎成I 4mm的粗粉，加入质量百分比浓度为95%的乙醇溶液，回流提取3-5次，每次1. 5-3小时，提取液过滤，合并过滤液，浓缩回收乙醇，得50°C下相对密度为1.30-1. 40的浓浸膏； 所述乙醇溶液的加入量为五味子乙醇溶液=IKg: (8 12)L。 B、萃取 将步骤A所得的浓浸膏按体积比加入10量的水进行分散，用正己烷萃取3-5次，除去正己烷萃取液，水相用乙酸乙酯萃取4-6次，合并乙酸乙酯萃取液，回收滤液至干，得黄绿色的五味子酚粗品； C、结晶 按照黄绿色固体物甲醇=Ig: (10-1000) ml计算，将步骤B得到的五味子酚粗品用甲醇完全溶解，溶解完全后用纳米有机膜过滤，滤液加入2-5倍量体积的蒸馏水，在2-4°C中冷藏结晶，根据晶体具体纯度，重复结晶2 3次，直至纯度彡98%，于100°C干燥后即可得到五味子酚单体产品。步骤C所述甲醇可以用乙醇或丙酮替代。本专利技术的优点在于1、本专利技术通过步骤A的提前，确保了提取物中小极性杂质的有效去除。2、本专利技术通过步骤B的萃取，使五味子酚达到了很好的富集效果。3、本专利技术通过步骤C的结晶，进一步纯化了五味子酚，有效保证了五味子酚的纯度。4、本专利技术通过步骤A、B、C的顺序搭配，以及适当的参数组合，有效分离出了五味子酚单体；整个工艺过程操作简便、工艺稳定、成本低廉，适合工业化生产，且分离效率高、产品纯度高达98%以上。附图说明图1是本专利技术实施例1五味子酚单体产品的HPLC图谱。具体实施例方式下面结合具体实施方式对本专利技术作进一步的详细描述，但不应将此理解为本专利技术的范围仅限于下述实施例。下述各实施例中，终产品五味子酚单体的纯度复检均采用反相分析型液相色谱(RP-HPLC)法，色谱条件如下 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水V/V=60:40为流动相；柱温30°C;流速1.Oml/min ;检测波长为 254 nm。实施例1一种五味子酚单体的分离纯化方法，包括如下工艺步骤 A、提取 将五味子200g粉碎成I 4mm的粗粉，加入质量百分比浓度为95%的乙醇溶液1. 6L，回流提取3次，每次1. 5小时，将提取液过滤，合并过滤液，减压浓缩回收乙醇，得相对密度为1. 32的浓浸膏150ml ； B、萃取 将步骤A所得的浓浸膏加1. 5L水分散，用正己烷萃取3次，除去正己烷萃取液，水相用乙酸乙酯萃取5次，合并乙酸乙酯萃取液，回收滤液至干，得黄绿色的五味子酚粗品1. Sg ； C、结晶 将步骤B得到的黄绿色固体用55ml甲醇完全溶解，溶解完全后用纳米有机膜过滤，滤液加入20ml蒸馏水，在4°C中冷藏结晶，重复结晶2次，在100°C干燥得到五味子酚1. 2g,纯度 >98%。实施例2 一种五味子酚单体的分离纯化方法，包括如下工艺步骤 A、提取 将五味子200g粉碎成I 4mm的粗粉，加入质量百分比浓度为95%的乙醇溶液2L，回流提取4次，每次2小时，将提取液过滤，合并过滤液，减压浓缩回收乙醇，得浓浸膏相对密度为1. 35 (50°C)，体积 120ml ； B、萃取 将步骤A所得的浓浸膏加1. 2L水分散，用正己烷萃取4次，除去正己烷萃取液，水相用乙酸乙酯萃取6次，合并乙酸乙酯萃取液，回收滤液至干，得黄绿色的五味子酚粗品2.1g ； C、结晶 将步骤B得到的黄绿色固体用21ml甲醇完全溶解，溶解完全后用纳米有机膜过滤，滤液加入20ml蒸馏水，在2 V中冷藏结晶，重复结晶2次，在100°C干燥得到五味子酚1. 6g，纯度 >98%。实施例3 一种五味子酚单体的分离纯化方法，包括如下工艺步骤 A、提取 将五味子200g粉碎成I 4mm的粗粉，加入质量百分比浓度为95%的乙醇溶液2. 4L，回流提取5次，每次3小时，将提取液过滤，合并过滤液，减压浓缩回收乙醇，得浓浸膏相对密度为1. 30 (50°C)，体积 160ml。B、萃取 将步骤A所得的浓浸膏加1. 6L水分散，用正己烷萃取5次，除去正己烷萃取液，水相用乙酸乙酯萃取4次，合并乙酸乙酯萃取液，回收滤液至干，得黄绿色的五味子酚粗品1. 5g ； C、结晶 将步骤B得到的黄绿色固体用1500ml甲醇完全溶解，溶解完全后用纳米有机膜过滤，滤液加入25ml蒸馏水，在，3°C中冷藏结晶，重复结晶3次，在100°C干燥得到五味子酚l.Og，纯度 >98%。实施例4一种五味子酚单体的分离纯化方法，包括如下工艺步骤 A、提取 将五味子200g粉碎成I 4mm的粗粉，加入质量百分比浓度为95%的乙醇溶液1. 8L，回流提取4次，每次2小时，将提取液过滤，合并过滤液，减压浓缩回收乙醇，得浓浸膏相对密度为1. 33 (50°C)，体积 145本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种五味子酚的分离纯化方法，其特征在于以五味子为原料通过提取、萃取、结晶得到五味子酚单体，具体包括如下工艺步骤：A、提取将五味子粉碎成1～4mm的粗粉，加入质量百分比浓度为95%的乙醇溶液，回流提取3?5次，每次1.5?3小时，提取液过滤，合并过滤液，浓缩回收乙醇，得50℃下相对密度为1.30?1.40的浓浸膏；B、萃取将步骤A所得的浓浸膏按体积比加入10量的水进行分散，用正己烷萃取3?5次，除去正己烷萃取液，水相用乙酸乙酯萃取4?6次，合并乙酸乙酯萃取液，回收滤液至干，得黄绿色的五味子酚粗品；C、结晶按照黄绿色固体物:甲醇=1g:（10?1000）ml?计算，将步骤B得到的五味子酚粗品用甲醇完全溶解，溶解完全后用纳米有机膜过滤，滤液加入2?5倍量体积的蒸馏水,在2?4℃中冷藏结晶，根据晶体具体纯度，重复结晶2～3次，直至纯度≥98%，于100℃干燥后即可得到五味子酚单体产品。
【技术特征摘要】
1.一种五味子酚的分离纯化方法，其特征在于以五味子为原料通过提取、萃取、结晶得到五味子酚单体，具体包括如下工艺步骤 A、提取 将五味子粉碎成I 4mm的粗粉，加入质量百分比浓度为95%的乙醇溶液，回流提取3-5次，每次1. 5-3小时，提取液过滤，合并过滤液，浓缩回收乙醇，得50°C下相对密度为1.30-1. 40的浓浸膏； B、萃取 将步骤A所得的浓浸膏按体积比加入10量的水进行分散，用正己烷萃取3-5次，除去正己烷萃取液，水相用乙酸乙酯萃取4-6次，合并乙酸乙酯萃取液，回收滤液至干，得黄绿色的五味子酚粗品； C、结晶 按照黄绿色固体物甲醇=Ig: (10-1000) ml计算，将步骤B得到的五味子酚粗品用甲醇完全溶解，溶解完全后用纳米有机膜过滤，滤液加入2-5倍量体积的蒸馏水，在2-4°C中冷藏结晶，根据晶体具体纯度，重复结晶2 3次，直至纯度> 98%，于100°C干燥后即可得到五味子酚单体产品。2.根据权利要求1所述五味子酚的分离纯化方法，其特征在于步骤A所述乙醇溶液的加入量为五味子乙醇溶液=IKg: (8 12)L。3.根据权利要求1所述五味子酚的分离纯化方法，其特征在于步骤C所述甲醇可以用乙醇或丙酮替代。4.根据权利要求1所述五味子酚的分离纯化方法，其特征在于包括如下工艺步骤 A、提取 将五味子200g粉碎成I 4mm的粗粉，加入质量百分比浓度为95%的乙醇溶液1. 6L，回流提取3次，每次1. 5小时，将提取液过滤，合并过滤液，减压浓缩回收乙醇，得相对密度为1. 32的浓浸膏150ml ； B、萃取 将步骤A所得的浓浸膏加1. 5L水分散，用正己烷萃取3次，除去正己烷萃取液，水相用乙酸乙酯萃取5次，合并乙酸乙酯萃取液，回收滤液至干，得黄绿色的五味子酚粗品1. Sg ； C、结晶 将步骤B得...
【专利技术属性】
技术研发人员：李启发，夏柯，文焕松，郭建华，刘丁，
申请(专利权)人：成都普思生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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