甘蔗黄锈病菌PCR检测方法技术

本发明专利技术涉及一种甘蔗黄锈病菌的PCR检测方法，包括基因组DNA的提取、PCR检测体系建立和PCR扩增产物的检测。本发明专利技术的甘蔗黄锈病菌PCR检测方法，具有灵敏度高，所需要的DNA用量少的特点；与常规的根据病菌培养后的孢子形态特征鉴定或根据田间种植后病害表型症状鉴定的方法相比，具有实用性好、准确性高和操作简便快速等优点。为甘蔗黄锈病菌的鉴定，提供了高灵敏度的快速检测体系，可用于田间甘蔗黄锈病菌的早期诊断及检测，对我国抗黄锈病甘蔗育种和抗黄锈病甘蔗种质资源的保护具有重要的意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种甘蔗病原菌的检测方法，具体涉及甘蔗黄锈病菌PCR检测方法，属于生物

技术介绍
甘鹿黄锈病(Sugarcane orange rust disease)属真菌性病害，由属于屈恩柄锈菌的甘鹿黄锈病菌引起。病原菌可经由风快速传播,然后通过气孔侵入，造成感病品种蔗茎产量和蔗糖分的损失。与甘蔗褐锈病不同，甘蔗黄锈病在春季更流行，适宜的环境条件更利于病害发展，例如温暖湿润的夏季和凉爽的秋季。甘蔗黄锈病主要危害甘蔗叶片，在叶片上产生淡黄色小斑点，后病斑在叶片正背两面产生长2 10 ram的橙黄色夏孢子堆，因此称为黄锈病。危害症状最初较轻，病斑不明显，随病斑扩大，拉长的黄色病斑留下浅黄绿色晕圈，且颜色由桔色发展到橙棕色。与一般的褐锈病不同，桔色锈斑从来不会发展为暗褐色。锈病脓包在叶表成团发生，且大多发生在低层叶片表面，病斑多在叶片基部。控制甘蔗黄锈病发生的首要措施为培育和栽种抗黄锈病甘蔗品种，在此过程中，如何检测目标甘蔗品种中是否含有甘蔗黄锈病菌以及检测的的效率和准确性与甘蔗抗黄锈病育种的进程和效果密切相关。目前，一般采取两种方法判断种茎是否带菌一种是采用分离培养技术，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甘蔗黄锈病菌的PCR检测方法，包括基因组DNA的提取、PCR检测体系建立和PCR扩增产物的检测，其特征在于：？（1）PCR检测体系的建立：PCR扩增体系为总体积25？μl，内含2.5？μl？10×PCR缓冲液，2.5？μl？25？mmol/L？MgCl2，0.5？μl？10？mmol/L？dNTP，10？μmol/L？的检测引物PCR？F和PCR？R各1.0？μl，1.25？U？Taq？DNA？Polymerase，20？30？ng基因组DNA，ddH2O补足到25？μl；？PCR扩增程序如下：94？℃？4？min；94？℃？1？min，56？℃？45？s，72？℃？1？min，35个循环...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：阙友雄，许莉萍，黄宁，郭晋隆，高世武，罗俊，袁照年，陈如凯，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：