甘蔗褐锈病菌PCR检测方法技术

本发明专利技术涉及一种甘蔗褐锈病菌的PCR检测方法，包括基因组DNA的提取、PCR检测体系建立和PCR扩增产物的检测。本发明专利技术的甘蔗褐锈病菌PCR检测方法，具有灵敏度高，所需要的DNA用量少的特点；与常规的根据病菌培养后的孢子形态特征鉴定或根据田间种植后病害表型症状鉴定的方法相比，具有实用性好、准确性高和操作简便快速等优点。为甘蔗褐锈病菌的鉴定，提供了高灵敏度的快速检测体系，可用于田间甘蔗褐锈病菌的早期诊断及检测，对我国抗褐锈病甘蔗育种和抗褐锈病甘蔗种质资源的保护具有重要的意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种甘蔗病原菌的检测方法，具体涉及甘蔗褐锈病菌PCR检测方法，属于生物

技术介绍
甘鹿褐锈病(Sugarcane brown rust disease)属真菌性病害，由属于黑顶柄锈菌的甘鹿褐锈病菌me I anocephal a)弓\起。该病主要由夏孢子传播,借风力附着在蔗叶表面，经气孔侵入。该病在美国、澳大利亚、印度和毛里求斯等国家普遍发生并多次爆发流行，不仅造成蔗茎产量损失，还对蔗糖分积累造成影响，影响程度因品种抗病性不同而有差异，严重时减产可高达40 %，并导致蔗糖分降低，幅度在10-36 %之间。甘蔗褐锈病主要发生在叶片上，其发生与温度密切相关，16-22 °C为发病最适宜 温度。初次侵染源主要来自甘蔗本身或其他中间寄主。受褐锈病菌侵染后，初期甘蔗叶片上长出黄色小斑点，色泽呈褐色至橙褐色，周围有黄色晕环，后期病斑因夏孢子堆呈脓疱状，最后病斑变黑色，叶组织坏死，使甘蔗叶片失去光合能力，表现早衰。培育抗病品种，提高目标甘蔗品种的抗褐锈病性，并避免栽种感病品种，是控制甘蔗褐锈病的最经济有效的措施。在甘蔗抗褐锈病育种过程中，如何检测目标甘蔗品种中是否含有甘蔗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甘蔗褐锈病菌的PCR检测方法，包括基因组DNA的提取、PCR检测体系建立和PCR扩增产物的检测，其特征在于：？（1）PCR检测体系的建立：？PCR扩增体系为总体积25？μl，内含2.5？μl？10×PCR缓冲液，2.5？μl？25？mmol/L？MgCl2，0.5？μl？10？mmol/L？dNTP，10？μmol/L？的检测引物PCR？F和PCR？R各1.0？μl，1.25？U？Taq？DNA？Polymerase，20？30？ng基因组DNA，ddH2O补足到25？μl；？PCR扩增程序如下：94？℃？4？min；94？℃？1？min，58？℃？45？s，72？℃？1？min，35个循...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：阙友雄，许莉萍，罗俊，黄宁，袁照年，郭晋隆，徐景升，陈如凯，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：