用于检测乙型肝炎病毒的抗药性株系的核酸引物组、测定试剂盒及检测乙型肝炎病毒的抗药性株系的方法技术

本发明专利技术提供了检测乙型肝炎病毒的抗药性株系的方法，其包括使用引物组通过ＬＡＭＰ扩增样品溶液中的乙型肝炎病毒核酸以产生扩增产物，然后将扩增产物与含有来源于抗药性株系的多核苷酸的探针和／或含有来源于非抗药性株系的多核苷酸的探针杂交，以检测乙型肝炎病毒的抗药性株系。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于检测编码对于抗药性乙型肝炎病毒是特异性的氨基酸序列的核苷酸序列的核酸引物组、测定试剂盒及检测乙型肝炎病毒的抗药性株系的方法。 背景领域 作为治疗HBV患者的方法，存在施用抑制HBV增殖的化学药物例如逆转录酶抑制 剂的方法。这样的化学药物通过结合dCTP在DNA复制过程中通常结合的位点(从而展示 竞争性抑制逆转录酶在整合dCTP中的功能(work)的作用)和通过在复制过程中被整合入 DNA(-)链(从而展示阻止DNA链延伸的作用)来抑制HBV增殖。 然而，已知当长时间施用例如拉米夫定时，可出现在某些氨基酸区域(例如，YMDD 区域)具有突变的突变病毒，并且该突变病毒抗拉米夫定，从而引起病毒的量的再增加 (Kanzo (Liver)，第47巻，No. 11， 499-502 (2006))。因此，当通过监测显示抗药性株系 出现时，需要采取紧急对策例如改变药物等。通过使用PCR扩增乙型肝炎病毒(在下文中 称为HBV)的DNA，然后通过序列分析阅读编码上述氨基酸突变的核苷酸序列来进行抗药性 株系的检测(Int. J.Med.Sci. 20052(1))。然而，期望有以更容易的方式检测抗药性株系的 方法。 本专利技术的公开内容 鉴于上述问题，本专利技术的目的是提供能够在短时间内容易且便宜地检测HBV的抗药性株系的核酸引物组、测定试剂盒及检测乙型肝炎病毒的抗药性株系的方法。 为了实现该目的，本专利技术提供了检测乙型肝炎病毒的抗药性株系或非抗药性(drug-nonresistant)株系的方法，包括 使用引物组通过LAMP扩增样品溶液中的乙型肝炎病毒的核酸以产生扩增产物， 和 将扩增产物与含有来源于乙型肝炎病毒的抗药性株系的多核苷酸的探针和/或 含有来源于乙型肝炎病毒的非抗药性株系的多核苷酸的探针杂交，以检测乙型肝炎病毒的 抗药性或非抗药性株系， 其中所述引物组包括FIP引物、F3引物、BIP引物和B3引物，并且至少一个组选 自 引物组l，其中FIP引物由SEQ ID NO :3表示，BIP引物由SEQID N0:4表示，F3引 物由SEQ ID NO :27表示，以及B3引物由SEQ IDN0:28表示，禾口 引物组2，其中FIP引物由SEQ ID NO :5表示，BIP引物由SEQID N0:6表示，F3引 物由SEQ ID NO :29表示，以及B3引物由SEQ IDN0 :30表示， 所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点181和204上 的氨基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域； 引物组3，其中FIP引物由SEQ ID NO :7表示，BIP引物由SEQ IDN0:8表示，F3引 物由SEQ ID NO :31表示，以及B3引物由SEQ ID NO :32表示， 引物组4，其中FIP引物由SEQ ID NO :9表示，BIP引物由SEQ IDN0:10表示，F3引物由SEQ ID NO :31表示，以及B3引物由SEQ ID NO :32表示， 引物组11，其中FIP引物是由SEQ ID NO :7表示的多核苷酸，BIP引物由SEQ IDNO :121表示，F3引物由SEQ ID NO :31表示，以及B3引物由SEQ ID NO :123表示，禾口 引物组12，其中FIP引物是由SEQ ID NO :9表示的多核苷酸，BIP引物由SEQ IDNO :122表示，F3引物由SEQ ID NO :31表示，以及B3引物由SEQ ID NO :124表示， 所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点204和236上的氨基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域； 引物组5，其中FIP引物是由SEQ ID NO :15表示的多核苷酸，BIP引物由SEQ IDNO :16表示，F3引物由SEQ ID NO :33表示，以及B3引物由SEQ ID NO :34表示， 引物组6，其中FIP引物是由SEQ ID NO :17表示的多核苷酸，BIP引物由SEQ IDNO :18表示，F3引物由SEQ ID NO :35表示，以及B3引物由SEQ ID NO :36表示， 引物组7，其中FIP引物是由SEQ ID NO :19表示的多核苷酸，BIP引物由SEQ IDNO :20表示，F3引物由SEQ ID NO :37表示，以及B3引物由SEQ ID NO :38表示，禾口 引物组8，其中FIP引物是由SEQ ID NO :21表示的多核苷酸，BIP引物由SEQ IDNO :22表示，F3引物由SEQ ID NO :39表示，以及B3引物由SEQ ID NO :40表示， 所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点236上的氨基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域；禾口 引物组9，其中FIP引物是由SEQ ID NO :23表示的多核苷酸，BIP引物由SEQ IDNO :24表示，F3引物由SEQ ID NO :41表示，以及B3引物由SEQ ID NO :42表示，禾口 引物组IO，其中FIP引物是由SEQ ID NO :25表示的多核苷酸，BIP引物由SEQ IDNO :26表示，F3引物由SEQ ID NO :43表示，以及B3引物由SEQ ID NO :44表示， 所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点181上的氨基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域。 根据本专利技术，可在短时间内容易地、便宜地并且准确地检测到HBV的抗药性株系或非抗药性株系。 附图概述 附图说明图1是LAMP法的示意图。 图2是显示LAMP法的中间产物和内部引物(inner primer) (FIP， BIP)的退火位置的示意图。 图3是显示环引物(loop primer)的排布的示意图。 图4是显示LAMP法的中间产物和环引物(LFc， LBc)的退火位置的示意图。 图5是显示扩增产物的检测位置的示意图。 图6是固定有探针的基质的一个实施方案的平面示意图。 图7是固定有探针的基质的一个实施方案的平面示意图。 图8显示数据库中注册的HBV序列的登录号。 图9显示数据库中注册的HBV序列的登录号。 图10显示HBV的标准序列。 图11显示HBV的标准序列。 图12显示检测靶序列(detection target sequence)的核酸引物序列和相对位点。 用于进行本专利技术的最佳模式 HBV的抗药性株系是一种突变株。抗药性株系与为非抗药性株系的株系(野生型株系)相异在于HBV的聚合酶区域的氨基酸序列中的位点181、204或236上的氨基酸。这样的突变源自HBV基因的突变，并且突变位点是因编码氨基酸序列的核苷酸序列中存在突变而产生的。因此，HBV的抗药性株系可通过鉴定基于所述区域的碱基突变的核苷酸多态性来检测，从而可判断来自受试者例如感染HBV的患者的HBV是抗药性的还是非抗药性的。 基于这样的碱基突变(在下文中称为核苷酸多态性)的核苷酸多态性一直以来主要通过PCR(聚合酶链式反应)来检测。然而，在PCR方法中，预处理例如核酸提取是非常麻烦的。此外，存在必需通过热循环仪等进行复杂的温度控制以及需要2小时或更长的反应时间的不便之处。存在的另外的问题因为PCR法的扩增产物是双链的，因此在本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于ＬＡＭＰ扩增以检测乙型肝炎病毒的抗药性株系和非抗药性株系的核酸引物组，其包括ＦＩＰ引物、Ｆ３引物、ＢＩＰ引物和Ｂ３引物，其中所述引物组选自：引物组１，其中ＦＩＰ引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３表示的多核苷酸组成，ＢＩＰ引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４表示的多核苷酸组成，Ｆ３引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７表示的多核苷酸组成，以及Ｂ３引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８表示的多核苷酸组成，和引物组２，其中ＦＩＰ引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：５表示的多核苷酸组成，ＢＩＰ引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：ＳＥＱＩＤＮＯ：３７表示的多核苷酸组成，以及Ｂ３引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３８表示的多核苷酸组成，和引物组８，其中ＦＩＰ引物是由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１表示的多核苷酸组成，ＢＩＰ引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２表示的多核苷酸组成，Ｆ３引物由ＳＥＱＩＤＮＯ：３９表示的多核苷酸组成，以及Ｂ３引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４０表示的多核苷酸组成，所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点２３６上的氨基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域；和引物组９，其中ＦＩＰ引物是由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３表示的多核苷酸组成，ＢＩＰ引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４表示的多核苷酸组成，Ｆ３引物由ＳＥＱＩＤＮＯ：４１表示的多核苷酸组成，以及Ｂ３引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４２表示的多核苷酸组成，和引物组１０，其中ＦＩＰ引物是由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５表示的多核苷酸组成，ＢＩＰ引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６表示的多核苷酸组成，Ｆ３引物由ＳＥＱＩＤＮＯ：４３表示的多核苷酸组成，以及Ｂ３引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４４表示的多核苷酸组成，所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点１８１上的氨基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域。６表示的多核苷酸组成，Ｆ３引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９表示的多核苷酸组成，以及Ｂ３引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０表示的多核苷酸组成，所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点１８１和２０４上的氨基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域；引物组３，其中ＦＩＰ引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７表示的多核苷酸组成，ＢＩＰ引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８表示的多核苷酸组成，Ｆ３引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１表示的多核苷酸组成，以及Ｂ３引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２表示的多核苷酸组成，引物组４，其中ＦＩＰ引物由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９表示的多核苷酸组...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】JP 2007-10-30 2007-282279;JP 2008-2-14 2008-033725用于LAMP扩增以检测乙型肝炎病毒的抗药性株系和非抗药性株系的核酸引物组，其包括FIP引物、F3引物、BIP引物和B3引物，其中所述引物组选自引物组1，其中FIP引物由SEQ ID NO3表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO4表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ ID NO27表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO28表示的多核苷酸组成，和引物组2，其中FIP引物由SEQ ID NO5表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO6表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ ID NO29表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO30表示的多核苷酸组成，所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点181和204上的氨基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域；引物组3，其中FIP引物由SEQ ID NO7表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO8表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ ID NO31表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO32表示的多核苷酸组成，引物组4，其中FIP引物由SEQ ID NO9表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO10表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ ID NO31表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO32表示的多核苷酸组成，引物组11，其中FIP引物是由SEQ ID NO7表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO121表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO31表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO123表示的多核苷酸组成，和引物组12，其中FIP引物是由SEQ ID NO9表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO122表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO31表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO124表示的多核苷酸组成，所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点204和236上的氨基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域；引物组5，其中FIP引物是由SEQ ID NO15表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO16表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO33表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO34表示的多核苷酸组成，引物组6，其中FIP引物是由SEQ ID NO17表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO18表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO35表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO36表示的多核苷酸组成，引物组7，其中FIP引物是由SEQ ID NO19表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO20表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO37表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO38表示的多核苷酸组成，和引物组8，其中FIP引物是由SEQ ID NO21表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO22表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO39表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO40表示的多核苷酸组成，所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点236上的氨基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域；和引物组9，其中FIP引物是由SEQ ID NO23表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO24表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO41表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO42表示的多核苷酸组成，和引物组10，其中FIP引物是由SEQ ID NO25表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO26表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO43表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO44表示的多核苷酸组成，所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点181上的氨基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域。2. 权利要求1的引物组，其还包括，对于引物组1或2，由至少一个来自SEQ ID NO :45、 SEQ ID NO :46和SEQ ID NO :47中的序列表示的多核苷酸组成的引物；对于引物组3或4， 由至少一个来自SEQ ID NO :48和SEQ ID NO :49中的序列表示的多核苷酸组成的引物；和 对于引物组11或12，由至少一个来自SEQ ID NO :125和SEQ IDNO : 126中的序列表示的引 物，作为环引物。3. 检测乙型肝炎病毒的抗药性或非抗药性株系的方法，其包括 使用引物组，通过LAMP扩增样品溶液中的乙型肝炎病毒核酸以产生扩增产物，禾口 将所述扩增产物与含有来源于乙型肝炎病毒的抗药性株系的多核苷酸的探针和/或含有来源于乙型肝炎病毒的非抗药性株系的多核苷酸的探针杂交，以检测乙型肝炎病毒的 抗药性或非抗药性株系，其中所述引物组包括FIP引物、F3引物、BIP引物和B3引物，并且至少一个引物组选自引物组l，其中FIP引物由SEQ ID NO:3表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO: 4表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ ID NO:27表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID N0:28表示的多核苷酸组成，禾口引物组2，其中FIP引物由SEQ ID N0:5表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO: 6表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ ID NO :29表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO :30表示的多核苷酸组成，所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点181和204上的氨 基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域；引物组3，其中FIP引物由SEQ ID NO:7表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO: 8表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ ID NO :31表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO :32表示的多核苷酸组成，引物组4，其中FIP引物由SEQ ID N0:9表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO: 10表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ ID N0:31表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO :32表示的多核苷酸组成，引物组11，其中FIP引物是由SEQ ID NO :7表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO :121表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO :31表示的多核苷酸组成，以及B3引物 由SEQ ID NO :123表示的多核苷酸组成，禾口引物组12，其中FIP引物是由SEQ ID N0:9表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO :122表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO :31表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO :124表示的多核苷酸组成，所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点204和236上的氨 基酸的核苷酸序列的核苷酸序列区域；引物组5，其中FIP引物是由SEQ ID N0:15表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO :16表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO :33表示的多核苷酸组成，以及B3引物由 SEQ ID N0:34表示的多核苷酸组成，引物组6，其中FIP引物是由SEQ ID N0:17表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO :18表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO :35表示的多核苷酸组成，以及B3引物由 SEQ ID N0:36表示的多核苷酸组成，引物组7，其中FIP引物是由SEQ ID N0:19表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO :20表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO :37表示的多核苷酸组成，以及B3引物由 SEQ ID N0:38表示的多核苷酸组成，禾口引物组8，其中FIP引物是由SEQ ID N0:21表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO :22表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO :39表示的多核苷酸组成，以及B3引物由 SEQ ID N0:40表示的多核苷酸组成，所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点236上的氨基酸 的核苷酸序列的核苷酸序列区域；禾口引物组9，其中FIP引物是由SEQ ID N0:23表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO :24表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO :41表示的多核苷酸组成，以及B3引物由 SEQ ID NO :42表示的多核苷酸组成，禾口引物组IO，其中FIP引物是由SEQ ID NO :25表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO :26表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO :43表示的多核苷酸组成，以及B3引物由 SEQ ID N0:44表示的多核苷酸组成，所述引物组用于扩增含有编码乙型肝炎病毒的聚合酶区域中的位点181上的氨基酸 的核苷酸序列的核苷酸序列区域。4.权利要求3的方法，其中所述含有来源于抗药性株系的多核苷酸的探针和/或含有 来源于非抗药性株系的多核苷酸的探针是至少一个这样的探针组，所述探针组，取决于所 使用的引物组，选自探针组l，其包括至少一个选自下列的探针含有由SEQ ID N0:50表示的多核苷酸或 其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:51表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:52表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :53表示的多核苷酸或其互补 链的探针，含有由SEQ ID NO :54表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :55 表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQID NO :56表示的多核苷酸或其互补链的探 针，和含有由SEQ ID N0:57表示的多核苷酸或其互补链的探针，探针组2，其包括至少一个选自下列的探针含有由SEQ ID N0:58表示的多核苷酸或 其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:59表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:60表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:61表示的多核苷酸或其互补 链的探针，含有由SEQ ID N0:62表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :63 表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQID NO :64表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:65表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :66表示的 多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:67表示的多核苷酸或其互补链的探针，含 有由SEQ ID NO:68表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :69表示的多核 苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:70表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由 SEQID N0:71表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :72表示的多核苷酸或 其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:73表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:74表示的多核苷酸或其互补链的探针，和含有由SEQ ID NO :75表示的多核苷酸或其互 补链的探针，禾口探针组3，其包括至少一个选自下列的探针含有由SEQ ID N0:76表示的多核苷酸或 其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:77表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:78表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :79表示的多核苷酸或其互补 链的探针，含有由SEQ ID NO :80表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :81 表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQID NO :82表示的多核苷酸或其互补链的探 针，含有由SEQ ID N0:83表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :84表示的 多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:85表示的多核苷酸或其互补链的探针，含 有由SEQ ID N0:86表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :87表示的多核 苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:88表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由 SEQID N0:89表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :90表示的多核苷酸或 其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:91表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:132表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO : 133表示的多核苷酸或其互 补链的探针，含有由SEQ ID N0:134表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO: 135表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:136表示的多核苷酸或其互补 链的探针，并且每一个探针的全长为15至45个碱基。5.权利要求4的方法，其中所述引物组是至少一个选自下列引物组的引物组引物组l，其中FIP引物由SEQ ID N0:3表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO: 4表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ ID NO :27表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO :28表示的多核苷酸组成，禾口引物组2，其中FIP引物由SEQ ID N0:5表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO: 6表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ ID N0:29表示的多核苷酸组成，以及B3引物由SEQ ID NO :30表示的多核苷酸组成，引物组ll，其中FIP引物是由SEQ ID N0:7表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO :121表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO :31表示的多核苷酸组成，以及B3引物 由SEQ ID NO :123表示的多核苷酸组成，禾口引物组12，其中FIP引物是由SEQ ID NO :9表示的多核苷酸组成，BIP引物由SEQ ID NO :122表示的多核苷酸组成，F3引物由SEQ IDNO :31表示的多核苷酸组成，以及B3引物 由SEQ ID NO :124表示的多核苷酸组成，禾口含有来源于抗药性株系的多核苷酸的探针和/或含有来源于非抗药性株系的多核苷 酸的探针是包含至少一个选自下列探针的探针的探针组含有由SEQ ID N0:93表示的多 核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:96表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ IDN0 :99表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:105表示的多核苷 酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:108表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由 SEQ ID N0:113表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:117表示的多核苷 酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:119表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由 SEQ ID N0:147表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :149表示的多核苷酸 或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:152表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:155表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :157表示的多核苷酸或 其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:158表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:161表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:164表示的多核苷酸或其互 补链的探针，含有由SEQ ID N0:167表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ IDNO : 169表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :171表示的多核苷酸或其互补 链的探针，含有由SEQ ID N0:173表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO: 174表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID N0:176表示的多核苷酸或其互补 链的探针，含有由SEQ ID N0:179表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO: 181表示的多核苷酸或其互补链的探针，含有由SEQ ID NO :183表示的多核苷酸或其互补 链的探针，含有由SEQ ID NO :184表示的多核苷酸或其互...

【专利技术属性】
技术研发人员：高桥匡庆，桥本美智惠，伊藤桂子，木津庆子，三代俊治，高桥和明，宫崎和典，桥本幸二，源间信弘，
申请(专利权)人：株式会社东芝，
类型：发明
国别省市：JP[日本]