【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种实时荧光PCR检测方法，具体涉及猪细小病毒与猪圆环病毒2型 二重STOR Green I实时荧光PCR检测方法。
技术介绍
猪细小病毒病(PPV)是由猪细小病毒感染引起的以母猪繁殖障碍为主要特征的 病毒性传染病，其特征是母猪孕前期感染该病毒时，经胎盘使胚胎或胎儿受到侵袭，引起母 猪流产、胚胎死亡、胎儿畸形、胎儿木乃伊化及不孕等，同时还可引起仔猪的皮炎和腹泻，但 其它类型的猪感染后无明显临床症状。PPV在猪群中检出率甚高，在猪群中的血清抗体阳性 率达50% 80%，是困扰养猪业发展的主要病毒性繁殖障碍性疾病之一。猪圆环病毒2型(PCM)是近年来新发现畜禽病毒之一，是迄今发现的一种最小的 动物病毒，根据PCV的致病性、抗原性及核苷酸序列可分成PCVl和PCV2两种基因型。PCVl 无致病性，广泛存在于猪原代细胞系及猪群中；PCV2有致病性，可引起猪断奶后多系统衰 竭综合征、猪皮炎与肾病综合征、断奶猪和育肥猪的呼吸道疾病、猪的繁殖障碍等疾病，并 与猪的繁殖与呼吸综合征、细小病毒病、伪狂犬病毒病、幼龄仔猪的先天性震颤等疾病的发 生密切相关。目前，国内外对以上病毒已开展了大量相关研究，建立了病毒分离、免疫荧光法、 ELISA方法、免疫组化法等方法，以及多种检测PPV、PCV2的PCR方法，如竞争PCR、套式PCR 和原位杂交等。但病毒分离耗时，原位杂交虽然有很高的灵敏度，但操作繁琐，成本较高，周 期较长，并且对病料的要求较高。目前PCR具有较高的敏感性和特异性，广泛应用于临床诊 断。但由于不同的引物之间差别较大，以及PCR扩增时各种因素的影响，诊...
【技术保护点】
猪细小病毒与猪圆环病毒２型二重ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ Ｉ实时荧光ＰＣＲ检测引物，其特征在于：猪圆环病毒２型引物的序列如下：上游引物Ｐ１：５′－ＴＡＡ ＣＴＡ ＣＴＣ ＣＴＣ ＣＣＧ ＣＣＡＴＡＣ－３′；下游引物Ｐ２：５′－ＧＣＣ ＴＡＣ ＧＴＧ ＧＴＣ ＴＡＣ ＡＴＴ ＴＣＣ－３′；猪细小病毒引物的序列如下：上游引物Ｐ３：５′－ＴＧＧ ＧＡＧ ＧＧＣ ＴＴＧ ＧＴＴ ＡＧＡ－３′；下游引物Ｐ４：５′－ＴＧＧ ＴＧＧ ＴＧＡ ＧＧＴ ＴＧＣ ＴＧＡ Ｔ－３′。
【技术特征摘要】
1.猪细小病毒与猪圆环病毒2型二重STORGreen I实时荧光PCR检测引物，其特征在于猪圆环病毒2型引物的序列如下 上游引物 Pl 5' -TAA CTA CTC CTC CCG CCATAC-3‘； 下游引物 P2 5' -GCC TAC GTG GTC TAC ATT TCC-3‘； 猪细小病毒引物的序列如下 上游引物 P3 5' -TGG GAG GGC TTG GTT AGA-3‘； 下游引物 P4...
【专利技术属性】
技术研发人员：崔保安，魏战勇，陈红英，李明凤，党玉丽，郭显坡，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：41
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