一种鸭肝炎病毒琼扩抗原及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种鸭肝炎病毒琼扩抗原及其制备方法与应用，所述琼扩抗原是将鸭肝炎病毒接种大量麻鸭胚进行培养增殖，收集胚尿囊液，通过低温超速离心进行病毒的浓缩，并通过蔗糖梯度离心及超速离心进行病毒纯化获得的鸭肝炎病毒琼扩抗原；通过条件优化，确定了最佳抗原和抗体反应浓度，通过特异性试验、重复性试验和灵敏性试验证实该方法简单可行，本发明专利技术利用所述琼扩抗原建立的鸭肝炎病毒抗体检测方法具有特异性强、稳定性好、敏感性高等特点，为鸭肝炎病毒抗体提供了简单、特异、灵敏、成本低廉和实用的检测方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术设及兽医诊断
，尤其是一种鸭肝炎病毒琼扩抗原及其制备方法与 应用。
技术介绍
鸭病毒性肝炎（Duck virus hepatitis，DVH)是由鸭肝炎病毒（Duck hepatitis virus，DHV)引起维鸭的一种传播迅速和高度致死性传染病，W肝脏呈现出血性炎症为特征 的急性烈性传染病。主要特征为肝脏肿大，有出血斑点和神经症状。在新疫区，本病的死亡 率很高，可达90 % W上。1945年在美国首次发现本病，并命名为I型鸭病毒性肝炎。 目前，对鸭病毒性肝炎的预防和控制主要W灭活疫苗、鸡胚弱毒疫苗、高免血清和 高免蛋黄抗体为主，而免疫效果的监测主要是通过中和试验测定中和抗体效价来进行。中 和试验操作繁琐、周期长、且对试验条件和技术的要求较高，一般基层兽医诊断站无法进行 检测。 针对养殖场及基层兽医检疫部口技术欠缺及设备简单的现状，W及鸭病毒性肝炎 血清抗体和蛋黄抗体等产品效价检测及免疫效果评价的需要，十分必要且紧迫需要创建一 种简单实用有效的鸭病毒性肝炎抗体检测方法。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种鸭肝炎病毒琼扩抗原。 本专本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鸭肝炎病毒琼扩抗原，其特征在于：是由下述方法得到的：(1)病毒繁殖：将第5代Ⅰ型和第8代Ⅲ型鸭肝炎病毒接种10日龄非免疫麻鸭胚，收获72小时至96小时内死亡鸭胚尿囊液，放于4℃保存；(2)病毒灭活：将收集的尿囊液经终浓度2‰甲醛混合混匀，于37℃摇床内灭活24小时；(3)病毒浓缩：将灭活好的尿囊液于4℃、8000r/min离心45min，取上清，再于4℃、45000r/min离心2h，弃上清后沉淀用灭菌生理盐水重悬，得到病毒浓缩液，储存于‑70℃；(4)病毒纯化：制备10％、20％、30％、40％和50％5个梯度的蔗糖平衡液，在10％蔗糖液上加上病毒浓缩液，于4℃、40000r/min水平...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李丽琴，王建，程雪娇，朱士江，宋秀梅，王宇鹏，葛兆宁，王勇，焦晓军，余贵菊，甄盼盼，王猛，杨雪，于小婷，张立会，崔志刚，姜淋洁，
申请(专利权)人：天津市中升挑战生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12