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rhTPO昆虫杆状病毒基因治疗载体及其生产方法和应用技术

技术编号:480577 阅读:220 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种新的治疗人体疾病的重组人血小板生成素(rhTPO)昆虫杆状病毒基因治疗载体及rhTPO昆虫杆状病毒,即在pPBacMtam-2的EcoRI位点中插入了全长999个碱基的TPOcDNA,再与野生型杆状病毒DNA共转染昆虫细胞,通过体内重组、噬斑筛选获得的重组病毒。它具有可在哺乳类动物细胞中高效表达TPO的能力,及特异性促进血小板生成的能力,可用于治疗各种原因引起的血小板减少症和出血性疾病。(*该技术在2019年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及一种新的治疗人体疾病的重组人血小板生成素(rhTPO)昆虫杆状病毒基因治疗载体及rhTPO昆虫杆状病毒。它可在昆虫细胞中扩增病毒,但不表达蛋白;而在哺乳类动物细胞中表达蛋白,病毒不会繁殖,具有特异性促进血小板生成的能力,可用于治疗各种原因引起的血小板减少症和出血性疾病。血小板生成素(TPO)是目前已知的唯一可促进血小板生成的细胞因子,1994年美国de.scnvasc最先分离出其基因,1996年即进入临床,足见人们对其重视的程度。众多动物体内、外实验表明,TPO单独作用可使巨核细胞体积增大,倍体数增加,血小板特异性膜蛋白表达增加,在正常和骨髓受抑的动物,TPO均可刺激血小板生成。临床实验结果表明,TPO可显著提高化疗前癌症患者的血小板数目。基因作为一种新的给药方式,已成为临床研究的一个热点。目前,临床基因治疗实验常用的载体为逆转录病毒及腺病毒载体,但由于逆转录病毒只能感染分裂期细胞,因而转染效率极低,且容纳外源基因的容量有限,还可使宿主细胞基因异常激活甚至有灭活的可能;腺病毒虽较之逆转录病毒的转染效率高一些,但其所携带或产生的病毒蛋白可诱发机体局部的炎性反应及全身性细胞免本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基因治疗载体及基因治疗药物,其特征在于:该基因治疗载体是PBacMam-2与rhTPO的重组昆虫病毒载体,即在pPBacMam-2的EcoRI位点中插入了全长999个碱基的TPOcDNA;该基因治疗药物是BM/TPO昆虫杆状病毒,即PBacMam-2/rhTPO的重组载体与野生型杆状病毒DNA共转染昆虫细胞,经体内重组,再通过噬斑筛选获得的重组病毒。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种基因治疗载体及基因治疗药物,其特征在于该基因治疗载体是PBacMam-2与rhTPO的重组昆虫病毒载体,即在pPBacMam-2的EcoRI位点中插入了全长999个碱基的TPOcDNA;该基因治疗药物是BM/TPO昆虫杆状病毒,即PBacMam-2/rhTPO的重组载体与野生型杆状病毒DNA共转染昆虫细胞,经体内重组,再通过噬斑筛选获得的重组病毒。2.根据权利要求1所述的基因工程生产的药物,其特征在于利用昆虫细胞表达体系生产TPO杆状病毒。3.一种生产基因治疗载体工程药物的方法,其特征在于包括重组质粒的构建、共转染、噬...

【专利技术属性】
技术研发人员:侯纬敏董东生陆爱丽
申请(专利权)人:董东生
类型:发明
国别省市:11[中国|北京]

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