杆状病毒载体制造技术

技术编号:7156745 阅读:301 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及用于将基因插入到杆状病毒序列的基因座中的转移载体。所述转移载体包括表达框,该表达框包括与基因可操作地连接的真核启动子,和双向选择框。本发明专利技术还涉及使用该转移载体及衍生的杆粒和杆状病毒的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】杆状病毒载体本专利技术涉及用于将基因插入到杆状病毒序列的基因座中的转移载体。本专利技术还涉及使用转移载体和衍生的杆粒和杆状病毒的方法。已经将杆状病毒表达系统用于在真核细胞中表达数以千计的蛋白质用于结构和生物化学研究(14)。除了表达单个重组蛋白的能力之外,杆状病毒系统也已用于共同表达形成复合物的多种蛋白(15-22)。这一点是重要的,因为基因组范围内的相互作用的筛选揭示了活细胞的多种关键功能是由多亚基蛋白复合物完成的(23)。已经使用了两种主要的策略利用杆状病毒系统实现蛋白质的共表达。使用各自表达一种重组蛋白的两种或者多种病毒共感染细胞是目前为止最常见的方法(19,24,25)。然而,这些研究中蛋白质复合物的产率通常变化很大并且由两种不同的杆状病毒共感染相同的细胞不满足泊松分布(poisson distribution) (26)。因此,尽管共感染方法在技术上简单,但在实践中其仅限于相对简单的复合物的回收,用于不需要大量纯化蛋白的应用。对于例如结构研究和需要多种蛋白质的大规模的疫苗试验的应用而言,以及对于由多个亚基形成的更加复杂的复合物而言,使用了共表达来自插入到多角体蛋白或者PlO 本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于将基因插入到杆状病毒序列的基因座中的转移载体,所述转移载体包括:表达框,所述表达框包括可以与基因可操作地连接的真核启动子;双向选择框,所述双向选择框包括:(i)编码第一个选择标记的可表达序列;和(ii)编码第二个选择标记的可表达序列;和位于表达框和双向选择框侧翼的序列,其中所述的序列大体上对应于杆状病毒序列中的基因座的序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:P·罗伊
申请(专利权)人:伦敦卫生及热带医学学院
类型:发明
国别省市:GB

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