本发明专利技术提供了Kir4.1抑制剂在制备治疗抑郁症的药物中的用途。本发明专利技术还提供了治疗抑郁症的药物组合物，其中包含Kir4.1抑制剂。本发明专利技术还提供了筛选治疗抑郁症的潜在物质的方法，包括给抑郁症动物模型施用待筛选的测试物的步骤，其中所述抑郁症动物模型的外侧缰核中Kir4.1是高表达的。
【技术实现步骤摘要】
钾离子通道抑制剂治疗抑郁症的用途和药物组合物本申请要求2017年5月9日提交的、申请号为201710322245.X、专利技术名称为“Kir4.1抑制剂治疗抑郁症的用途和药物组合物”的中国专利申请的优先权，其全部内容通过引用结合在本申请中。
本专利技术涉及疾病治疗和药物领域。具体的，本专利技术涉及抑郁症的治疗和用于治疗抑郁症的药物组合物和其制备方法。
技术介绍
抑郁症是一种慢性精神障碍性疾病，以显著而持久的心境低落,动力缺失，行为绝望以及快感缺失为主要临床特征，严重的可表现出自杀倾向。外侧缰核(LHb)近年来被认为是研究抑郁症病理生理学的关键脑区，在众多抑郁症的动物模型以及抑郁症病人中都发现了外侧缰核活性的显著升高。神经元的异常活动主要归因于突触传递异常、自身生理特性变化以及神经元内环境的改变。星形胶质细胞参与调节神经细胞的自身活性，递质释放，而且在一系列包括精神分裂、癫痫、老年痴呆、抑郁症等在内的疾病中扮演重要角色(Hamiltonetal.,Frontiersinneuroenergetics2,2010)。对抑郁症死者大脑的解剖学研究表明，其前脑边缘系统中，胶质细胞的数目，形态及功能均发生显著变化(Cotteretal.,Archivesofgeneralpsychiatry58,545-553,2001；Coyleetal.,Archivesofgeneralpsychiatry57,90-93,2000；Rajkowskaetal.,CNS&neurologicaldisordersdrugtargets6,219-233,2007)。利用化学手段诱导星形胶质细胞凋亡足以引起抑郁症状(Banasretal.,Biologicalpsychiatry64,863-870,2008)。抗抑郁药物能直接作用于星形胶质细胞，显著影响其形态及功能。该现象被认为可能是抗抑郁药物在中枢神经系统中起到抗抑郁效应的途径之一(Czehetal.,thejournaloftheEuropeanCollegeofNeuropsychopharmacology23,171-185,2013)。这些证据表明，除了神经元，胶质细胞在精神疾病中也扮演了不容忽视的角色。内向整流型钾离子通道(inwardrectifier-typepotassiumchannel，Kir)是指超级化激活的钾离子通道。已报道的内向整流型钾离子通道有七个蛋白家族成员(Kir1～Kir7)。同类Kir通道因为存在RNA剪接的差异(splicingvariance)又可分为多种亚型，在心脏，肾脏，神经系统等多种组织和器官中分布。Kir4.1(也称为potassiumvoltage-gatedchannelsubfamilyJmember10，Kcnj10)是内向整流型钾离子通道的家族成员之一。在神经系统中，Kir4.1在胶质细胞特异性表达。胶质细胞中的Kir4.1可允许钾离子在细胞膜上通过，通过调节神经细胞周围外液的钾离子浓度，转运胞外过多的钾离子来缓冲细胞外环境，达到控制静息膜电位水平，维持神经系统的内稳态，保持神经系统的正常生理活性的作用。Kir4.1的功能异常将对胶质细胞和神经元的功能产生很大的影响，进而表现出多种神经系统病变。在哺乳动物中，Kir4.1的蛋白序列和编码核酸序列都很保守。本领域已经具有一些常用的抗抑郁药物，但这些药物通常在比较长的一段时间后才能见效。而且导致抑郁症的病理机制还未完全被认识。本领域还需要新的，或是起效更快速、使用剂量更安全的治疗抑郁症的方法和药物。
技术实现思路
本专利技术人经过深入研究，首次发现外侧缰核的星形胶质细胞中的Kir4.1是抑郁症的一个至关重要的调节因子，运用分子、行为和电生理等手段，确定了在外侧缰核中，星形胶质细胞表达的Kir4.1，以一种紧密包绕缰核神经元胞体的方式存在于外侧缰核中，调节胞外钾平衡，改变外侧缰核神经元的发放特性，导致外侧缰核过度活跃，进而调节抑郁表型。本专利技术人还发现和证明了多种可以阻断外侧缰核中Kir4.1功能的试剂，由此提供了通过抑制Kir4.1的活性来治疗(抑制)抑郁症的方法和药物。具体的，本专利技术提供了通过抑制Kir4.1的活性来治疗抑郁症的方法。本专利技术还提供了Kir4.1抑制剂在制备治疗抑郁症的药物中的用途。Kir4.1抑制剂是指能够使得Kir4.1通道的活性下降或者丧失的试剂。Kir4.1通道的活性是指允许钾离子在细胞膜上通过的活性。Kir4.1通过调节神经细胞周围外液的钾离子浓度，转运胞外过多的钾离子来缓冲细胞外环境，达到控制静息膜电位水平，影响神经系统的生理活性。Kir4.1抑制剂包括能够使得Kir4.1通道的活性下降或者丧失的化合物、复合物或混合物，以及在抑制Kir4.1活性的方法(含外科手术方法)中使用的制剂等。在本专利技术的通过抑制Kir4.1的活性来治疗抑郁症的方法和Kir4.1抑制剂在制备治疗抑郁症的药物中的用途中，所述Kir4.1抑制剂是指能够影响Kir4.1蛋白的活性从而影响Kir4.1通道的活性的试剂。所述试剂包括小分子化合物或复合物，或是蛋白、核酸等大分子活性成分，例如与Kir4.1蛋白结合的拮抗剂如抗体，或是影响Kir4.1蛋白的表达水平的核酸等。这些蛋白或核酸可通过本领域公知的技术，例如与合适的表达载体结合传送到目标组织或细胞发挥作用。在本专利技术的其中又一个方面，Kir4.1抑制剂是特异性抑制Kir4.1的抑制剂。特异性Kir4.1抑制剂一般是指，所述Kir4.1抑制剂对其它Kir蛋白没有抑制活性，或是对其它Kir蛋白的抑制活性显著小于对Kir4.1的抑制活性，例如对其它Kir蛋白的抑制活性为对Kir4.1的抑制活性的50％以下，优选20％以下，更优选5％以下。在本专利技术的其中又一个方面，所述Kir4.1抑制剂为干扰Kir4.1表达的干扰RNA或其前体。RNA干扰(RNAi)是通过双链RNA(double-strandedRNA，dsRNA)来诱发同源mRNA高效特异性降解，从而使得目标基因的表达降低甚至消除。在本专利技术中，干扰RNA可包括小干扰RNA(SmallinterferingRNA，siRNA)、短发夹RNA(shRNA)和/或微小RNA(miRNA)。在体内给予干扰RNA的一种方式是通过给予siRNA的前体shRNA实现，例如包括两个短反向重复序列的短发夹RNA。将siRNA序列作为“短发夹”克隆进质粒载体中。当送入动物体内时，该发夹序列被表达出来，形成一个“双链RNA”，利用细胞内的Dicer酶，生成相应的siRNA，发挥RNAi作用。在本专利技术的其中又一个方面，可用于本专利技术的干扰RNA或其前体具有与目标Kir4.1mRNA的片段具有相同或互补，或90％以上相同或互补的序列。例如，在本专利技术的其中又一个方面，所述干扰Kir4.1表达的干扰RNA或其前体具有以下序列：5’-GGACGACCTTCATTGACAT-3’(SEQIDNo.1)；5’-GCTACAAGCTTCTGCTCTTCT-3’(SEQIDNo.2)；5’-GCTCTTCTCGCCAACCTTTAC-3’(SEQIDNo.3)；5’-CCGGAACCTTCCTTGCAAA-3’(SEQ本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.Kir4.1抑制剂在制备治疗抑郁症的药物中的用途。
【技术特征摘要】
2017.05.09 CN 201710322245X1.Kir4.1抑制剂在制备治疗抑郁症的药物中的用途。2.权利要求1的用途，其中所述Kir4.1抑制剂为干扰Kir4.1表达的干扰RNA或其前体，优选为针对Kir4.1的对应序列为SEQIDNo.7的mRNA序列中以下序列片段的干扰RNA或其前体：5’-GGACGACCTTCATTGACAT-3’(SEQIDNo.1)；5’-GCTACAAGCTTCTGCTCTTCT-3’(SEQIDNo.2)；5’-GCTCTTCTCGCCAACCTTTAC-3’(SEQIDNo.3)；5’-CCGGAACCTTCCTTGCAAA-3’(SEQIDNo.4)；5’-GCGTAAGAGTCTCCTCATTGG-3’(SEQIDNo.5)；或5’-GCCCTTAGTGTGCGCATTA-3’(SEQIDNo.6)。3.权利要求1的用途，其中所述Kir4.1抑制剂为钾离子通道活性下降或丧失的突变型Kir4.1蛋白或其编码序列，优选为在Kir4.1蛋白的核孔区，对应Kir4.1序列为SEQIDNo.8的氨基酸序列中第130-132位的GYG发生突变的突变型Kir4.1蛋白，例如突变为为AAA的突变型Kir4.1蛋白。4.权利要求1的用途，其中所述Kir4.1抑制剂为Kir4.1的特异性抗体，包括多克隆抗体或单克隆抗体。5.权利要求1-4中任一项的用途，其中所述药物为在外侧缰核局部给药的剂型。6.治疗抑郁症的药物组合物，其中包含Kir4.1抑制剂。7.权利要求6的药物组合，其中所述Kir4.1抑制剂为：(1)干扰Kir4.1表达的干扰RNA或其前体，优选为针对Kir4.1的对应序列为SEQIDNo.7的mRNA序列中以下序列片段的干扰RNA或其前体：5’-GGACG...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡海岚，崔一卉，杨艳，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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