The invention discloses a potassium channel toxin derived polypeptide, a preparation method and an application thereof, belonging to the field of biotechnology. Nucleotide sequence and amino acid sequence encoding gene of the invention of potassium channel toxin derived peptides such as SEQ BmKT4 respectively ID NO.1 and 2 shown. The gene fragment of BmKT4 peptides constructed into the expression vector pGEX 4T 1, then the recombinant vector was transformed into Escherichia coli Rossetta (DE3) induced expression, can obtain a soluble, non inclusion body state, has good active peptide BmKT4. The potassium channel toxin derived polypeptide BmKT4 of the invention can be used to prolong the life span of the nematode Caenorhabditis elegans, increase the number of eggs, and advance the spawning time. The method for preparing BmKT4 according to the invention has the advantages of simple operation, low production cost and simple purification.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，具体涉及一种钾离子通道毒素衍生多肽及其制备方法与应用。
技术介绍
东亚钳蝎是我国主要的蝎种，是实验研究最为热点的一个蝎种。蝎毒液成分复杂，毒液毒性较低，各成分之间生理活性多样，具有抗癫、抗栓、抗炎、抗肿瘤、中枢镇痛等重要治疗作用。目前很多有药用价值的蝎毒多肽都是从东亚钳蝎中分离得到的。蝎毒多肽按其作用的离子通道进行分类，可分为：Na+通道、K+通道、Cl-通道和Ca2+通道四种。离子通道不仅直接与兴奋细胞有关，还可进一步影响和控制递质释放、肌肉运动、细胞分裂生殖，甚至对学习及维持细胞内环境稳定也起着重要作用。其中，钾离子通道亚型最多，分布最广，几乎存在于所有的真核细胞并发挥着多种至关重要的生物学功能。多肽药物的研发及多肽先导化合物的发现是一项耗资巨大、风险较高的工程。近年来，以各种理论计算方法和分子模拟技术为基础的计算机辅助设计在各种多肽药物的研发中得到广泛应用。程远国等依据HIV膜融合蛋白gp41的空间结构进行全新设计和合成的抗艾滋病药物西夫韦肽在Ⅰ期、Ⅱ期临床试验中均具有良好的抗病毒效果（MengQ,DongT,ChenX,eta...
【技术保护点】
一种钾离子通道毒素衍生多肽BmKT4，其特征在于：氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
【技术特征摘要】
1.一种钾离子通道毒素衍生多肽BmKT4，其特征在于：氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.编码权利要求1所述的钾离子通道毒素衍生多肽BmKT4的基因，其特征在于：核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。3.权利要求1所述的钾离子通道毒素衍生多肽BmKT4的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）以权利要求2所述的基因为模板设计含有酶切位点的上、下游引物进行PCR扩增；（2）用限制性内切酶对PCR产物和表达载体pGEX-4T-1分别进行酶切，酶切后的PCR产物和载体通过T4DNA连接酶连接，构建重组表达载体pGEX-BmKT4；（3）连接产物转化大肠杆菌Rossetta(DE3)感受态细胞，筛选重组表达载体转化成功的大肠杆菌，得到表达多肽BmKT4的重组大肠杆菌；（4）...
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