西兰花多肽活性组分及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种西兰花多肽活性组分及其制备方法和应用。制备方法包括：取西兰花茎叶汁，调节pH至8～10，于30℃～50℃温度中搅拌30～90min，再经离心、沉淀、洗涤、干燥后得到西兰花蛋白粉；加入水，在温度45～60℃、pH4.5～7.5条件下，加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解的时间为4.5～10h，灭酶，冷却，离心，旋转蒸发，浓缩后冷冻干燥，得西兰花多肽酶解物；采用葡聚糖凝胶柱分离，用磷酸盐水溶液作为洗脱液洗脱，收集洗脱液，过滤，蒸干，经收集干燥，得到西兰花多肽活性组分。西兰花多肽活性组分具有明显的辅助降血脂作用，可用于制备辅助降血脂保健品和辅助降血脂药物。

Polypeptide active component of broccoli and preparation method and application thereof

The invention discloses a polypeptide active component of broccoli and a preparation method and application thereof. The preparation method comprises: broccoli juice, pH adjusted to 8 to 10, from 30 to 50 DEG C temperature mixing in 30 ~ 90min, followed by centrifugation, precipitation, washing and drying to obtain the broccoli protein powder; adding water, at a temperature of 45 to 60 DEG C and pH4.5 ~ 7.5 under the condition of adding alkaline protein enzyme hydrolysis, enzymatic hydrolysis time is 4.5 ~ 10h, enzyme inactivation, cooling, centrifugal, rotary evaporation, concentration and freeze drying to polypeptide hydrolysates of broccoli; using Sephadex gel, with phosphate aqueous solution as the eluting, the eluate was evaporated by collecting, filtering, drying get the broccoli polypeptide active component. The active ingredient of broccoli polypeptide has obvious effect of reducing blood fat, and can be used for preparing auxiliary blood fat reducing health care products and auxiliary lipid-lowering drugs.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及西兰花提取物领域，具体涉及一种西兰花多肽活性组分及其制备方法和在制备辅助降血脂保健品和辅助降血脂药物中的应用。
技术介绍
随着人民生活水平的提高和饮食结构的改变，高脂血症发病率逐年升高，并且呈年轻化趋势。研究资料表明，高脂血症是高血压、脑卒中、冠心病和心肌梗塞等心脑血管疾病发生的危险因素，同时也是促进糖耐量异常、糖尿病及其它重要脏器病变的危险因素之一。目前虽有许多化学药物可降低人体血清胆固醇，但对人体常伴有明显的副反应。因此，从天然植物中分离提取具有新型、高效、低毒的生物活性成分，用于相关疾病预防和治疗，已成为近年来世界各国医药界关注和研究的热点。我国植物性食物资源非常丰富，深入研究植物中降脂活性成分在防治疾病中的作用，将对促进人类健康具有不可估量的意义。西兰花(BrassicaoleraceaL.var.botrytisL)又名青花菜，为十字花科芸薹属一二年生植物，被誉为“蔬菜皇冠”，不仅含有蛋白质、多糖、维生素和胡萝卜素，还有丰富的黄酮类物质，黄酮类物质具有抗氧化、抗菌、抗衰老、清除自由基、降血脂、降血压、降血糖、预防心脑血管疾病等生理活性功能。目前有关西兰花降低胆固醇水平的报道较多。胡彩虹等人将西兰花茎叶制成饲料粉，成为我国新型的饲料资源，用含有不同浓度西兰花茎的饲料喂养草鸡，能使草鸡肉质得到改善，并能降低草鸡胸肌和肝脏胆固醇水平(胡彩虹,钱仲仓,刘海萍等.西兰花茎叶粉对绿牧快大型草鸡生长性能和肉质的影响[J].动物营养学报，2010，22(1)：194-200)。2010年，李志兰等报道添加西兰花茎叶粉可改善鸭蛋品质,降低蛋黄胆固醇水平(李志兰,左安燕,胡彩虹.西兰花茎叶粉对蛋鸭生产性能和蛋品质的影响.畜牧与兽医,2010,42(9):37-39)。2010年，郑卫兵等报道了添加西兰花茎叶粉可以改善仙居三黄蛋鸡蛋品质，降低蛋黄胆固醇水平(郑卫兵,潘红英,王德刚,钱仲仓,左安燕,胡彩虹,刘建新.西兰花茎叶粉对仙居三黄蛋鸡蛋品质、受精率和孵化率的影响.草业科学，2010,27(3):148-152)。2009年，王德刚等发现，添加西兰花茎叶粉可以改善仙居三黄蛋鸡蛋品质，降低蛋黄胆固醇水平(王德刚,潘红英,郑卫兵,胡彩虹,刘建新.西兰花茎叶粉对仙居三黄蛋鸡生产性能和蛋品质的影响.饲料工业,2009,30(21):20-24)。来自诺维奇生物科学研究院的研究者通过研究发现，食用西兰花或可降低血液中低密度脂蛋白—胆固醇(LDL-Cholesterol)高达6％。但有关油茶籽(饼)先通过有机溶剂法(95％乙醇)提取出油茶籽(饼)蛋白，然后采用酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶以及复合酶分别对其进行水解，以水解液中活性肽的含量为目标，得到的油茶籽(饼)蛋白水解液能够通过降低血清TC及TG浓度而降低由冠心病引起的死亡率及高血脂症患者的发病率(王层飞，油茶活性肽的制备及其抗氧化、降血脂功能评价研究[D].长沙：中南林业科技大学：2008.)。早在20世纪初，就有人报道了大豆蛋白具有降低血脂和胆固醇的作用，其水解物大豆多肽同样具有此功能，且效果更佳。著名多肽专家邹远东指出大豆多肽具有降低胆固醇作用，可调节血液粘稠度，改善血管通透性，防止动脉血管硬化，防止脑血栓，防止中风。Sugano研究了微生物蛋白酶酶解蛋白得到的大分子片段(HMF)能够迅速降低小鼠血清中的胆固醇含量，还可结合胆汁盐，增加粪便排泄，其中性和酸性类固醇的排泄量与对照组相比分别增加了65-95％和80-170％。还有许多动物实验和临床试验表明：分子相对质量大于5000Da的大豆多肽具有明显的降低胆固醇的作用，并且只对胆固醇值高的人有作用，对正常人没影响。刘忆梅等的实验表明用高(15mg/kg·d)、中(10mg/kg·d)剂量大豆蛋白肽灌胃的小鼠体内低密度脂蛋白胆固醇的浓度降低，动脉硬化指数(AI)值明显降低，这说明大豆多肽具有降低血清中胆固醇含量的效应。西兰花多肽分离辅助降血脂方面的研究还很少有文献报道。西兰花提取物以西兰花多肽和黄酮为主要目标活性成分。目前虽有许多化学药物可降低人体血清胆固醇，但对人体常伴有明显的副反应。植物性食物资源中提取物降血脂活性功能成分报道多种，但尚未见辅助降血脂作用显著的提取物，也未见有关西兰花提取物用于辅助降血脂功能性食品、保健食品和药物方面的报道。为了测试和评估本专利技术西兰花多肽提取物的辅助降血脂方面的应用潜力，已使用本专业技术人员所熟悉的方法测试西兰花多肽提取物的生物活性。这些已知的测试方法包括TC、TG、HDL等脂质代谢指标；ALT、AST、GGT、ALP、CYP7A1、ACAT2、CETP等酶指标测定实验等。结果表明本专利技术特定方法得到的西兰花多肽提取物具有较好的辅助降血脂作用。
技术实现思路
本专利技术提供了一种西兰花多肽活性组分及其制备方法和在制备辅助降血脂保健品和辅助降血脂药物中的应用。为了实现以上目的，本专利技术的第一个方面涉及西兰花多肽活性组分及其制备方法，它是通过以下方法制备得到：一种西兰花多肽活性组分的制备方法，包括以下步骤：(1)取西兰花茎叶汁，调节pH至8～10，于30℃～50℃温度中搅拌30～90min，再经离心、沉淀、洗涤、干燥后得到西兰花蛋白粉；(2)取上述步骤(1)制备得到的西兰花蛋白粉，向西兰花蛋白粉中加入水，在温度45～60℃、pH4.5～7.5条件下，加入西兰花蛋白粉质量百分比1.0～5.0％的碱性蛋白酶进行酶解，酶解的时间为4.5～10h，灭酶，冷却，离心，旋转蒸发，浓缩后冷冻干燥，得西兰花多肽酶解物；(3)取上述步骤(2)制备得到的西兰花多肽酶解物，采用葡聚糖凝胶柱分离，用磷酸盐水溶液作为洗脱液洗脱，收集洗脱液，过滤，蒸干，经收集干燥，得到西兰花多肽活性组分。以下作为本专利技术的优选技术方案：步骤(1)中，所述的西兰花茎叶汁的制备，包括：将西兰花茎和叶粉碎成0.5-5cm长的碎屑，经打浆压榨后，过孔径1.0～5.0mm的滤网除去，收集榨取的汁液即为西兰花茎叶汁。所述的调节pH至8～10采用HCl水溶液和/或NaOH水溶液，进一步优选，所述的HCl水溶液的浓度为0.5～2mol/L。所述的NaOH水溶液的浓度为0.5～2mol/L。进一步优选，所述的HCl水溶液的浓度为1mol/L。所述的NaOH水溶液的浓度为1mol/L。30℃～50℃温度采用水浴保持。进一步优本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种西兰花多肽活性组分的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取西兰花茎叶汁，调节pH至8～10，于30℃～50℃温度中搅拌30～90min，再经离心、沉淀、洗涤、干燥后得到西兰花蛋白粉；(2)取上述步骤(1)制备得到的西兰花蛋白粉，向西兰花蛋白粉中加入水，在温度45～60℃、pH4.5～7.5条件下，加入西兰花蛋白粉质量百分比1.0～5.0％的碱性蛋白酶进行酶解，酶解的时间为4.5～10h，灭酶，冷却，离心，旋转蒸发，浓缩后冷冻干燥，得西兰花多肽酶解物；(3)取上述步骤(2)制备得到的西兰花多肽酶解物，采用葡聚糖凝胶柱分离，用磷酸盐水溶液作为洗脱液洗脱，收集洗脱液，过滤，蒸干，经收集干燥，得到西兰花多肽活性组分。

【技术特征摘要】
1.一种西兰花多肽活性组分的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取西兰花茎叶汁，调节pH至8～10，于30℃～50℃温度中搅拌
30～90min，再经离心、沉淀、洗涤、干燥后得到西兰花蛋白粉；
(2)取上述步骤(1)制备得到的西兰花蛋白粉，向西兰花蛋白粉中加
入水，在温度45～60℃、pH4.5～7.5条件下，加入西兰花蛋白粉质量百分比
1.0～5.0％的碱性蛋白酶进行酶解，酶解的时间为4.5～10h，灭酶，冷却，
离心，旋转蒸发，浓缩后冷冻干燥，得西兰花多肽酶解物；
(3)取上述步骤(2)制备得到的西兰花多肽酶解物，采用葡聚糖凝胶
柱分离，用磷酸盐水溶液作为洗脱液洗脱，收集洗脱液，过滤，蒸干，经收
集干燥，得到西兰花多肽活性组分。
2.根据权利要求1所述的西兰花多肽活性组分的制备方法，其特征在于，
步骤(1)中，所述的西兰花茎叶汁的制备，包括：将西兰花茎和叶粉碎成
0.5～5cm长的碎屑，经打浆压榨后，过孔径1.0～5.0mm的滤网除去，收集榨取
的汁液即为西兰花茎叶汁。
3.根据权利要求1所述的西兰花多肽活性组分的制备方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：党亚丽，么春艳，俞焕腾，王永东，
申请(专利权)人：浙江省医学科学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33