A method for isolating adipose derived mesenchymal stem cells from fat is characterized by the following steps: obtaining fat tissue, obtaining fat, total preadipocyte and adipose derived mesenchymal stem cells. The invention has the advantages that: the one from the fat separation of adipose derived mesenchymal stem cells compared with the existing technology of the method in the invention has the following advantages: 1, the adipose mesenchymal stem cells in good condition, good stability and multilineage differentiation ability; 2, the operation method is simple and repeatable strong; 3, medium and digestive enzyme of excellent formula.
【技术实现步骤摘要】
一种从脂肪中分离脂肪间充质干细胞的方法
本专利技术属于生物
,具体涉及一种从脂肪中分离脂肪间充质干细胞的方法。
技术介绍
脂肪干细胞(adipose-derivedstemceLLs,ADSCs)、ADSC多能细胞是近年来从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。主要恢复组织细胞的修复功能,促进细胞的再生,恢复年轻面容的同时,身体机能也得到充分改善,有效改善亚健康、早衰等疾病,由内而外真正的有效抵抗衰老。脂肪间充质干细胞的体外培养目前主要还是通过组织的机械法处理,之后通过酶消化,裂解法裂解红细胞等手段来收集脂肪干细胞群。分离过程复杂,成交高。且目前没有一个较为统一的操作规范。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种取材简便,步骤简单,具有较高重复性的从脂肪中分离脂肪间充质干细胞的方法。一种从脂肪中分离脂肪间充质干细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)脂肪组织的获取:脂肪组织为专业的美容院在无菌条件下通过抽脂获得的脂肪废弃物,抽取之后以2-8℃保存,储存时间不能超过48小时;(2)脂肪获取:对所获取的脂肪组织进行自然沉淀,去除下层非脂肪层;之后对 ...
【技术保护点】
一种从脂肪中分离脂肪间充质干细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)脂肪组织的获取:脂肪组织为专业的美容院在无菌条件下通过抽脂获得的脂肪废弃物,抽取之后以2‑8℃保存,储存时间不能超过48小时;(2)脂肪的获取:对所获取的脂肪组织进行自然沉淀,去除下层非脂肪层;之后对上层脂肪组织进行2000rpm10分钟离心,去除上层油脂层,利用清洗液进行清洗下层物质,3‑5遍,直到下层清洗液变为清彻;之后1500rpm,5分钟离心,吸取上层脂肪备用,并记录所得脂肪体积;(3)总前脂肪细胞获取:在所获得的脂肪加入等体积的消化酶,37℃恒温摇床100‑280rpm震荡消化20‑60分钟, ...
【技术特征摘要】
1.一种从脂肪中分离脂肪间充质干细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)脂肪组织的获取:脂肪组织为专业的美容院在无菌条件下通过抽脂获得的脂肪废弃物,抽取之后以2-8℃保存,储存时间不能超过48小时;(2)脂肪的获取:对所获取的脂肪组织进行自然沉淀,去除下层非脂肪层;之后对上层脂肪组织进行2000rpm10分钟离心,去除上层油脂层,利用清洗液进行清洗下层物质,3-5遍,直到下层清洗液变为清彻;之后1500rpm,5分钟离心,吸取上层脂肪备用,并记录所得脂肪体积;(3)总前脂肪细胞获取:在所获得的脂肪加入等体积的消化酶,37℃恒温摇床100-280rpm震荡消化20-60分钟,所得消化液1500-2000rpm离心,10分钟,收集底部细胞,得到前脂肪细胞;之后在剩余脂肪中按照体积比1:1再添加消化酶进行第二次酶消化,将第二次酶消化所得的消化液1500-2000rpm,再离心10分钟,收集底部细胞;将2次消化液收集到的底部细胞混合的到总前脂肪细胞;(4)脂肪间充质干细胞的获得:所得的总前脂肪细胞利用培养基重悬,过滤去除杂质,之后进行细胞计数,...
【专利技术属性】
技术研发人员:姚玲玲,杨苗,孟得龙,宋丹,刘得娟,
申请(专利权)人:北京焕生汇生物技术研究院,
类型:发明
国别省市:北京,11
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