The present invention relates to the isolation and application of cartilage stem cells. The present invention uses the method of fibronectin adhesion to isolate soft spindle cells. It is also proposed that the NF- kappa B signaling pathway is a target for the treatment of osteoarthritis, and the NF- kappa B signaling pathway inhibitor is an effective drug for the treatment of osteoarthritis. The invention also provides a method for labeling and activating the cartilage stem cells in vivo by using BrdU-Ki67 differential double labeling method.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学领域，更具体地，本专利技术涉及软骨干细胞的分离及其应用。
技术介绍
因外伤、肿瘤、骨关节炎引起的关节软骨缺损是临床骨科的常见疾病，由于体内关节软骨的自身修复能力极其有限，一旦发生损伤或者病变，很难自愈，甚至导致关节损坏，多需要外源性修复或启动内源性因素修复。目前临床应用较多的、效果肯定的软骨退变与缺损治疗方法是自体软骨细胞移植，但软骨细胞来源有限，体外扩增时极易反分化而丧失表型。成熟的关节软骨是一种富含细胞外基质、无血管、无神经的组织，软骨细胞只占其体积的2％-3％，其余为丰富的软骨基质，主要包括二型胶原(typeⅡcollagen)、高分子的聚集蛋白聚糖(aggrecan)以及极度亲水的透明质酸(hyaluronicacid)。通常情况下软骨细胞不能进行有丝分裂，因而找到能在体外快速增殖、不丧失软骨细胞表型且能够分泌大量胞外基质的种子细胞是治疗软骨缺损需要解决的首要问题。成体干细胞是存在于已经分化组织中的未分化细胞，这种细胞能够自我更新并且能够特化形成组成该类型组织的细胞。成年个体组织中的成体干细胞在正常情况下大多处于休眠状态，在病理状态或在外因诱导下可以表现出不同程度的再生和更新能力。越来越多的研究表明成体干细胞广泛存在于成体组织中，例如肝脏干细胞、表皮干细胞、造血干细胞、神经干/前体细胞、肌腱干细胞等等。对于关节软骨组织，由于其无血管结构，组织内的细胞随年龄增加逐渐减少...
【技术保护点】
NF‑κB信号通路的抑制剂的用途，用于制备缓解或治疗骨关节炎的药物组合物。
【技术特征摘要】
1.NF-κB信号通路的抑制剂的用途，用于制备缓解或治疗骨关节炎的药物
组合物。
2.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的抑制剂选自：
BAY11-7082；特异性干扰NF-κB信号通路基因表达的干扰分子或特异性结合
NF-κB信号通路蛋白的抗体或配体。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的组合物还用于：
促进软骨干细胞的成软骨分化；
抑制炎症因子引起的p65入核；
抑制MMP13的表达；和/或
促进软骨标志基因Sox9、ColIIa、Aggrecan、Has2的表达。
4.一种筛选缓解或治疗骨关节炎的潜在物质的方法，其特征在于，所述的
方法包括：
(1)将候选物质与含有NF-κB信号通路的体系接触；
(2)检测候选物质对NF-κB信号通路的影响；
若所述候选物质抑制NF-κB信号通路或其基因或蛋白的表达或活性，则表
明该候选物质是缓解或治疗骨关节炎的潜在物质。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(1)包括：在测试组中，将
候选物质加入到含有NF-κB信号通路的体系中；和/或
步骤(2)包括：检测测试组的体系中NF-κB信号通路或其基因或蛋白的表达
或活性，并与对照组比较，其中所述的对照组是不添加所述候选物质的含有
NF-κB信号通路的体系；
如果与对照组相比，测试组中在统计学上NF-κB信号通路或其基因或蛋白
的表达或活性受到抑制，就表明该候选物质是缓解或治疗骨关节炎的潜在...
【专利技术属性】
技术研发人员：张晓玲，童文学，胡国立，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：上海;31
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