【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于细胞
,尤其涉及一种用于培养脂肪干细胞的试剂盒及培养方法。
技术介绍
干细胞是一类具有自我复制和多向分化能力的细胞,可以不断进行自我更新,并在特定条件下转变成为一种或多种构成人体组织或器官的细胞。近年来,干细胞技术被广泛用于多种疾病的临床试验及治疗中,并且表现出良好的应用前景,逐渐成为近年来新的医学研究热点之一。脂肪组织中存在一类具有多向分化潜力的细胞,即脂肪干细胞,其具有较高的分化潜能,可向多个方向进行分化,可以分化为骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织或器官的细胞,医学价值很高。脂肪干细胞能够在体外稳定增殖且衰亡率低,具有取材容易、不限年龄及时间、少量组织即可获取大量细胞、适宜大规模培养、对机体损伤小等优点,而且脂肪来源广泛,体内储备量大,适宜自体移植,具有广阔的临床应用前景。为满足医学研究的需求,大量培养脂肪干细胞成为重要的研究课题,而试验人员选择的用于分离、培养、保存脂肪干细胞的试剂和方法不够妥当,往往造成了培养的脂肪干细胞的数量和质量无法达到试验的要求,浪费了人力和其他资源,因此研究一种专门用于稳定的大量扩增培养脂肪干细胞的试剂盒具有重要意义。现有技术中也公开了一些用于培养脂肪干细胞的试剂盒,例如CN 104928238A公布了一种用于制备脂肪间充质干细胞的试剂盒,包括脂肪保存液、脂肪洗涤液、脂肪分解液、细胞洗涤液、细胞培养液、细胞消化液、细胞冻存液,但此试剂盒培养脂肪干细胞的效果不够理想,存在试剂安全性、稳定性不高,细胞存活率和增殖率低等问题。
技术实现思路
为了解决上述技术问题,本专利技术提供一种用于培养脂 ...
【技术保护点】
一种用于培养脂肪干细胞的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括试剂盒本体、若干试剂瓶(1)和若干冰袋,所述试剂盒本体包括顶端开口的盒体(2)、与所述盒体(2)铰接的盒盖(3)和设置在盒体(2)内的插托(4),所述插托(4)与所述盒体(2)的底板平行,其上设有若干个用于放置所述试剂瓶(1)的插孔,所述插托(4)下方设有与所述盒体(2)的底板平行的镂空隔板,所述镂空隔板与其下方的所述盒体(2)形成第一空腔,所述第一空腔的侧壁上设有第一开口(5)和与所述第一开口(5)匹配的第一盖板(6),所述盒盖(3)由盒盖上板、与所述盒盖上板平行的盒盖下板(7)、连接所述盒盖上板和所述盒盖下板(7)的盒盖侧壁(8)组成,所述盒盖下板(7)为镂空结构,所述盒盖上板、所述盒盖下板(7)和所述盒盖侧壁(8)形成第二空腔,所述盒盖侧壁(8)上设有第二开口(9)和与所述第二开口(9)匹配的第二盖板(10),若干所述冰袋分别放置在第一空腔和第二空腔内,若干所述试剂瓶(1)内分别盛装有组织保存液、基础培养基、培养基添加剂、生长因子Ⅰ、生长因子Ⅱ、组织分解液、细胞消化液、洗涤液和冻存液。
【技术特征摘要】
1.一种用于培养脂肪干细胞的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括试剂盒本体、若干试剂瓶(1)和若干冰袋,所述试剂盒本体包括顶端开口的盒体(2)、与所述盒体(2)铰接的盒盖(3)和设置在盒体(2)内的插托(4),所述插托(4)与所述盒体(2)的底板平行,其上设有若干个用于放置所述试剂瓶(1)的插孔,所述插托(4)下方设有与所述盒体(2)的底板平行的镂空隔板,所述镂空隔板与其下方的所述盒体(2)形成第一空腔,所述第一空腔的侧壁上设有第一开口(5)和与所述第一开口(5)匹配的第一盖板(6),所述盒盖(3)由盒盖上板、与所述盒盖上板平行的盒盖下板(7)、连接所述盒盖上板和所述盒盖下板(7)的盒盖侧壁(8)组成,所述盒盖下板(7)为镂空结构,所述盒盖上板、所述盒盖下板(7)和所述盒盖侧壁(8)形成第二空腔,所述盒盖侧壁(8)上设有第二开口(9)和与所述第二开口(9)匹配的第二盖板(10),若干所述冰袋分别放置在第一空腔和第二空腔内,若干所述试剂瓶(1)内分别盛装有组织保存液、基础培养基、培养基添加剂、生长因子Ⅰ、生长因子Ⅱ、组织分解液、细胞消化液、洗涤液和冻存液。2.根据权利要求1所述的用于培养脂肪干细胞的试剂盒,其特征在于:所述组织保存液主要是将α-MEM干粉培养基、青霉素、链霉素、羟甲基纤维素钠、次磷酸钠用注射用水溶解而成,每L所述注射用水分别溶解所述α-MEM干粉培养基30-50g、所述青霉素1×105-2×105U、所属链霉素0.1-0.2g、所述羟甲基纤维素钠8-12g、所述次磷酸钠2-5g。3.根据权利要求2所述的用于培养脂肪干细胞的试剂盒,其特征在于:所述组织保存液中还含有琥珀酸钠和乳糖醇,每L所述注射用水分别溶解所述琥珀酸钠3-8g、所述乳糖醇0.5-1.5g。4.根据权利要求2所述的用于培养脂肪干细胞的试剂盒,其特征在于:所述组织保存液中还含有水杨酸钠和淀粉甘醇酸钠,每L所述注射用水分别溶解所述水杨酸钠2-5g、所述淀粉甘醇酸钠1-3g。5.根据权利要求1所述的用于培养脂肪干细胞的试剂盒,其特征在于:所述培养基添加剂包括如下重量份的各成分:胎牛血清蛋白15-20 乙基甲基纤维素8-12木糖醇5-8 甲酸钠1-3。6.根据权利要求5所述的用于培养脂肪干细胞的试剂盒,其特征在于:所述培养基添加剂还包括如下重量份的各成分:肉桂醇3-8 磷酸酯1-3 抗坏血酸钠1-3。7.根据权利要求5所述的用于培养脂肪干细胞的试剂盒,其特征在于:所述培养基添加剂还包括如下重量份的各成分:甘氨酸钠3-8 D-木糖2-5。8.根据权利要求1所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:张晓南,吴芳春,陈虎,侍晓云,张斌,
申请(专利权)人:北京昱龙盛世生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:北京;11
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