细胞培养装置制造方法及图纸

一种细胞培养器，其具备：流路，其具有导入液体的导入端和底面，所述液体在其中流动，和多个凹部，其形成于所述流路的所述底面，用于收容细胞，所述多个凹部密集地配置于所述流路的所述底面。

【技术实现步骤摘要】
技术分野本专利技术涉及细胞培养器、及细胞培养系统。
技术介绍
作为糖尿病、特别是1型糖尿病的治疗手段，胰脏移植、胰岛移植是有效的，但是，脏器供体数量少、必须服用用于抑制免疫排斥的免疫抑制剂等方面成为严峻的课题。另一方面，正在使用来自于小鼠、人的细胞，广泛进行由诱导多能干细胞(iPS细胞)等多能干细胞来分化诱导胰岛细胞的研究。专利文献1公开了使用TGF-β等刺激因子诱导内胚层细胞、特别是胰岛细胞的方法。但是，该文献虽然公开了将细胞的命运诱导为内胚层系统、特别是胰岛细胞所必须的刺激因子，但是对于诱导时的细胞群的形态是维持平面结构还是形成立体聚集块则没有公开，此外，对于此时的细胞群的尺寸的控制方法等也没有公开。专利文献2中公开了：在包含带正电的纳米尺寸的纤维或粒子的基质上培养胚胎干细胞(ES细胞)或iPS细胞，不使用饲养细胞地由多能干细胞诱导胰岛细胞的方法。但是，对于形成聚集体则没有记载和教导。非专利文献1中公开了：由人多能干细胞分化诱导胰岛细胞后，使其形成细胞聚集体、制作模拟胰岛的方法。此外公开了：通过移植该模拟胰岛，糖尿病模型小鼠的糖尿病状态得到改善。该文献中，在使细胞于培养皿底面上进行贴壁培养的状态下进行分化诱导，在该过程中使细胞群从培养皿底面分离进行非贴壁培养(悬浮培养)，从而形成聚集体。但是，聚集体的形成依赖于悬浮培养中细胞群彼此的偶然性粘附，因此其尺寸是不可控的。专利文献3公开了：利用细胞无法贴壁的水凝胶基材构成凹部、使接种于其中的细胞形成聚集块的方法及器件。但是，该文献中并未公开用于由多能干细胞开始的分化诱导的方法。此外存在如非专利文献2、非专利文献3中记载那样的、通过搅拌培养法形成的聚集体状态的胰岛细胞分化诱导法。专利文献4中列举了在利用表面改性而抑制了细胞贴壁的培养皿中形成细胞聚集块的方法、及作为有助于聚集块的尺寸的因子的接种细胞的密度、培养液中的血清浓度。列举了如下方法：通过在培养皿底面中限制可发生细胞贴壁的区域，结果限制所生成的聚集块的尺寸。但是，该文献中并未公开用于分化诱导的方法。现有技术文献专利文献专利文献1：美国专利第8859286号说明书专利文献2：日本特开2011-115161号公报专利文献3：日本专利第5039715号说明书专利文献4：日本特开2007-135593号公报非专利文献非专利文献1：DIABETES,VOL.61,AUGUST 2012,2016-2029非专利文献2：PLoS ONE.,VOL.7,May 2012,e37004,Thomas C.Schulz等，乔治亚大学、USA非专利文献3：Cell.VOL.159,Oct 2014,428-439,Felicia W Pagliuca等，Harvard University,USA
技术实现思路
专利技术所要解决的问题本专利技术的课题在于，提供一种适合于高效地形成聚集体并进行培养的培养器及培养系统。本专利技术的课题还在于，提供一种适合于高效地形成聚集体并进行培养的培养器和培养系统。即、在对部分细胞种类进行分化诱导时，有时需要形成聚集体。在形成聚集体时，聚集体的中心部依靠扩散来供给细胞的生存所必须的氧气、营养，因此期望将聚集体的大小控制为均匀。但是，专利文献1中虽然公开了将细胞的命运诱导为内胚层系统、特别是胰岛细胞所必须的刺激因子，但是对于聚集体的大小的控制方法等则没有公开。非专利文献1～3的方法中，聚集体的形成是通过细胞间的接触而随机发生的，因此难以控制聚集体的大小，此外在更换培养基时需要通过离心分离进行沉淀操作。专利文献3中没有公开简单地更换培养液的方法。因此，本专利技术的目的在于，提供能够培养聚集体的技术。用于解决问题的方法为了高效地形成聚集体并进行培养，可以采用以下的培养器。但是，以下的培养器及培养系统也可以用于模拟胰岛的制造以外的用途中，还可以用于要求形成聚集体的细胞种类(細胞種)的制造。本专利技术的培养器的第1方式为一种细胞培养器，其具备：流路，其具有导入液体的导入端和底面，前述液体在其中流动，和多个凹部，其形成于前述流路的前述底面，用于收容细胞，前述多个凹部密集地配置于前述流路的前述底面。根据第1方式，能够控制接种细胞数、在1个凹部(即，以不与其它细胞聚集体接触的状态)制作1个细胞聚集体，且能够在将其维持于各孔中的状态下依次更换培养液。通过使多个凹部处于密集状态，能够抑制在凹部以外的部分生成细胞聚集体，此外能够将培养液大致均匀地供给到该多个凹部中，制作尺寸大致均匀的聚集体。本专利技术的培养器的第2方式为一种细胞培养器，其中，前述流路具有排出前述液体的排出端，前述流路包含第1区域，所述第1区域的宽度从前述导入端起扩大到规定的长度，前述第1区域具有与前述流路的底面正交的2个侧壁面，前述2个侧壁面的任一位置的切面与从导入端向着排出端的方向所成的角度为45度以下。根据第2方式，能够将液体同样地供给到各凹部，能够在各凹部形成尺寸大致均匀的细胞聚集体。本专利技术的培养器的第3方式为一种细胞培养器，其中，前述多个凹部在前述流路的前述底面所占的面积为前述底面的面积的一半以上。根据第3方式，能够抑制在凹部以外的部分生成细胞聚集体，能够在凹部内形成尺寸大致均匀的细胞聚集体。本专利技术的培养器的第4方式为一种细胞培养器，其中，导入前述流路的培养液的速度为10cm/s以下。根据第4方式，能够对收容于凹部的细胞同样地供给新鲜的培养液，能够在各凹部形成尺寸大致均匀的细胞聚集体。本专利技术的培养器的第5方式为一种细胞培养器，其中，前述凹部的周缘进行了倒角。根据第5方式，细胞不易滞留在凹部以外的部分，不易在凹部以外的部分生成细胞聚集体，能够无损耗地、高效地形成尺寸大致均匀的细胞聚集体。本专利技术的培养器的第6方式为一种细胞培养器，其中，前述凹部的宽度为100μm以上且5mm以下，前述凹部的高度为100μm以上且5mm以下。根据第6方式，能够在各凹部形成规定尺寸的大致均匀的细胞聚集体。本专利技术的培养器的第7方式为细胞培养系统，其具备：上述任意细胞培养器，调整向前述细胞培养器中导入的前述培养液的量的供给装置，和收容由前述细胞培养器排出的细胞及培养液的收容装置。根据第7方式，能够以期望的速度将培养液导入细胞培养器，能够在各凹部形成规定尺寸的大致均匀的细胞聚集体。专利技术效果根据本专利技术的培养器，能够提供能培养出大致均匀的细胞聚集体的技术。附图说明图1为示出本实施方式的细胞培养系统的构成例的图。图2为示出细胞培养器的构成例的分解立体图。图3为示出本实施方式的细胞培养器的构成例的图。图4为示出图3的X1－X1线处的、细胞培养器的剖面图的例子的图。图5为示出图3的Y1－Y1线处的、细胞培养器的剖面图的例子的图。图6为示出多个孔的剖面形状的例子的图。图7为示出孔的剖面形状的例子的图。图8为示出底面部上的孔的形状的例子的图。图9为示出流路的形状的例子的图。图10为示出盖的变形例的细胞培养器的剖面图。图11为示出孔的配置的例子的图。图12为示出细胞培养器的变形例的图。图13为示出本实施方式的细胞培养系统的变形例1的图。图14为示出本实施方式的细胞培养系统的变形例2的图。具体实施方式以下参照附图对本专利技术的培养器的实施方式进行说明。但是，实施方式的构成是一个例子，本专利技术的构成并非仅限于实施方本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种细胞培养器，其具备：流路，其具有导入液体的导入端和底面，所述液体在其中流动，和多个凹部，其形成于所述流路的所述底面，用于收容细胞，所述多个凹部密集地配置于所述流路的所述底面。

【技术特征摘要】
2015.04.16 JP 2015-0845241.一种细胞培养器，其具备：流路，其具有导入液体的导入端和底面，所述液体在其中流动，和多个凹部，其形成于所述流路的所述底面，用于收容细胞，所述多个凹部密集地配置于所述流路的所述底面。2.根据权利要求1所述的细胞培养器，所述流路具有排出所述液体的排出端，所述流路包含第1区域，所述第1区域的宽度从所述导入端起扩大到规定的长度，所述第1区域具有与所述流路的底面正交的2个侧壁面，所述2个侧壁面的切面与从导入端向着排出端的方向所成的角度为45度以下。3.根据权利要求1或2所述的细胞培养器，其中，所述多个凹部在所述流路的所述底面所占的面积为所述底面的面积的一半以上。4.根据权利要求1或2所述的细胞培养器，其中，所述凹部的周缘进行了倒角。5.根据权利要求1或2所述的细胞培养器，其中，所述凹部的...

【专利技术属性】
技术研发人员：平野邦生，野田雄一郎，
申请(专利权)人：爱科来株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP