经由自体干细胞动员的创伤愈合制造技术

技术编号:15079853 阅读:134 留言:0更新日期:2017-04-07 12:20
本发明专利技术涉及创伤愈合领域。更具体地,本发明专利技术提供了可用于经由自体干细胞动员改善创伤愈合的方法和组合物。在一个实施方式中,用于改善患者的创伤愈合的方法包括向所述患者施用治疗有效量的干细胞动员剂和低剂量的免疫抑制剂。

Wound healing by autologous stem cell mobilization

The present invention relates to the field of wound healing. More specifically, the present invention provides methods and compositions for improving wound healing through autologous stem cell mobilization. In one embodiment, a method for improving the healing of a patient includes administering a therapeutically effective amount of a stem cell mobilizing agent and a low dose of immunosuppressive agent to the patient.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉引用本申请要求于2013年11月22日提交的美国临时申请第61/907,624号以及于2013年4月29日提交的美国临时申请第61/816,827号的权益,所述美国临时申请中的每一个通过引用整体并入本文。
本专利技术涉及创伤愈合领域。更具体地,本专利技术提供了可用于经由自体干细胞动员改善创伤愈合的方法和组合物。以电子方式提交的材料通过引用并入本申请包含序列表。序列表已经以标题为“P12415-03_ST25.txt”的ASCII文本文件经由EFS-Web以电子方式提交。序列表的大小为2,713字节,并且创建于2014年4月24日。据此通过引用整体并入。
技术介绍
在美国每年有多于125万人遭受烧伤以及650万人具有由压力、静脉淤滞或糖尿病引起的慢性皮肤溃疡(SingerandClark,1999)。这些病况的治疗仍不完善并且费用昂贵。希望干细胞疗法可以证明是有益的,因为已经越来越明确确定的是干细胞在创伤愈合中起着重要作用。例如,已经显示,人工皮肤替代物在将干细胞掺入这些膜时更有效。烧伤愈合的质量得到改善(Leonardi等,2012),减少了瘢痕形成并且重建皮肤附属器(Mansilla等,2010;Tamai等,2011;Huang和Burd,2012)。慢性静态糖尿病溃疡的治疗已经通过将患者的骨髓(BM)间充质干细胞(MSC)与埋入可生物降解的胶原膜(ColadermR)的自体皮肤成纤维细胞组合使用而得到改善(Vojtassak等,2006)。已经显示来自胚胎来源和出生后来源的BM细胞修复胶原合成中的遗传缺陷和基膜缺陷,从而促进皮肤创伤愈合(Chino等,2008;Tolar等,2009;Fujita等,2010)。最近,临床试验发现在患有由缺乏Col7引起的发疱皮肤病症的人中的同种异体的全BM移植致使皮肤完整性恢复以及Col7在基膜中表达(Wagner等,2010)。许多基础的细胞研究也已经强调皮肤与BM之间的可塑关系。在具有造血谱系和间充质谱系的真皮中的成纤维细胞样细胞来源于BM,并且这些细胞的数目在皮肤创伤之后增加(Fathke等,2004;Ishii等,2005)。在BM移植之后,供体细胞已经替换一些角化细胞并且已经在表皮中存留至少3年(Korbling等,2002)。BM细胞有助于胎儿皮肤形成,因为将绿色荧光蛋白(GFP)BM细胞输注入小鼠的子宫中导致GFP-阳性细胞在形成的皮肤中积聚,所述皮肤特别是与形成毛囊相关的(Chino等,2008)。这些大量的研究记录BM干细胞在创伤愈合中的重要性并且提出了令人向往的可能性:可利用细胞过程制定实用的治疗方案来治疗需要立即治疗的大量全皮层烧伤和大量软组织损伤。通过利用干细胞改善创伤修复的可能性使用NIH登记簿列出的基于MSC的疗法通过存在的90个临床试验得以证实(Cerqueira等,2012)。为避免价格昂贵且耗时的内源干细胞的制备,我们计划在这些研究中将内源干细胞与AMD3100和他克莫司(Tacrolimus)药理动员。已经显示AMD3100能在动物和人中将来自BM的内源干细胞驱向血流。低剂量的他克莫司证明具有协同效应,组合治疗有希望成为将干细胞呈递至损害区域的简单、安全且迅速的方法。在此,我们在小鼠和大鼠中治愈全皮层皮肤创伤来检验这一假设。发现该治疗能够将完全愈合的时间减少25%,我们描绘了创伤中干细胞/祖细胞和相关细胞因子/生长因子的特性并且使用谱系示踪证实动员的CD133+干细胞在创伤区的血管生成和毛囊再生中的重要作用。
技术实现思路
本专利技术至少部分基于这样的发现:干细胞动员剂和免疫抑制剂可被用于促进或改善患者中的创伤愈合。事实上,如本专利技术的实施方案中所述的内源性干细胞的药理学扩增是吸引人的,因为它提供了向损伤区呈递干细胞的简单、迅速的方法。如本文所述,本专利技术人假设:用AMD3100(即普乐沙福(plerixafor))与低剂量的他克莫司组合动员骨髓干细胞将在一些实施方式中促进再上皮化以及在进一步实施方式中促进毛囊的再生,从而产生较迅速的正常皮肤的恢复。为检验该假设,我们首先检查普乐沙福、他克莫司或双重药物对全皮层皮肤切除的小鼠模型中的创伤愈合的效果。第二,我们描述了创伤区中干细胞/祖细胞和相关的细胞因子/生长因子的特征。最后,我们通过使用谱系示踪来评估动员的CD133+干细胞对创伤区的血管生成和毛囊再生的贡献。更具体地,在特定实施方式中,低剂量而非高剂量的他克莫司(FK-506)经由将产生SDF-1的巨噬细胞募集至创伤区来改善创伤愈合。另外,用普乐沙福与低剂量的他克莫司组合动员骨髓干细胞加速创伤愈合、促进再上皮化以及促进毛囊再生。事实上,低剂量的他克莫司与普乐沙福的组合通过促进皮肤组分的再上皮化和分化来改善创伤愈合。因此,在一方面,本专利技术提供了可用于改善患者的创伤愈合的方法和组合物。在一个实施方式中,用于改善患者的创伤愈合的方法包括向患者施用治疗有效量的干细胞动员剂和免疫抑制剂。在一些实施方式中,干细胞动员剂选自由AMD3100、AMD3465、TG-0054、BKT140、G-CSF、GM-CSF、SDF-1和SCF构成的组。在具体实施方式中,干细胞动员剂为CXCR4拮抗剂。在更具体的实施方式中,干细胞动员剂为AMD3100。在其它实施方式中,免疫抑制剂选自由他克莫司、环孢菌素、莫罗单抗-CD3(OrthocloneOKT3)、麦考酚酯和西罗莫司构成的组。在具体实施方式中,免疫抑制剂为他克莫司。在特定实施方式中,以低剂量施用免疫抑制剂。在某些实施方式中,干细胞动员剂和免疫抑制剂为相同化合物。在另一实施方式中,改善患者的创伤愈合的方法包括向患者施用治疗有效量的干细胞动员剂和低剂量的免疫抑制剂。在更具体的实施方式中,改善患者的创伤愈合的方法包括向患者施用治疗有效量的AMD3100和低剂量的他克莫司。在甚至更具体的实施方式中,低剂量的他克莫司为约0.01mg/kg至约0.05mg/kg。本专利技术还提供改善患者的创伤愈合的方法,其包括向患者施用治疗有效量的药剂(agent)和低剂量的免疫抑制剂,所述药剂动员CD34+和/或CD133+干细胞。在某些实施方式中,动员CD34+和/或CD133+干细胞的药剂为AMD3100并且免疫抑制剂为他克莫司。在另一方面,药剂充当干细胞动员剂和免疫抑制剂两者。在一个实施方式中,改善患者的创伤愈合的方法包括以足以将干细胞动员本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种用于改善患者的创伤愈合的方法,包括向所述患者施用治疗有效量的干细胞动员剂和免疫抑制剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.04.29 US 61/816,827;2013.11.22 US 61/907,6241.一种用于改善患者的创伤愈合的方法,包括向所述患者施用治疗有效量
的干细胞动员剂和免疫抑制剂。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述干细胞动员剂选自由AMD3100、
AMD3465、TG-0054、BKT140、G-CSF、GM-CSF、SDF-1和SCF构成的组。
3.如权利要求1所述的方法,其中所述干细胞动员剂为CXCR4拮抗剂。
4.如权利要求3所述的方法,其中所述干细胞动员剂为AMD3100。
5.如权利要求1所述的方法,其中所述免疫抑制剂选自由他克莫司、环孢
菌素、莫罗单抗-CD3、麦考酚酯和西罗莫司构成的组。
6.如权利要求5所述的方法,其中所述免疫抑制剂为他克莫司。
7.如权利要求1所述的方法,其中所述免疫抑制剂以低剂量施用。
8.如权利要求1所述的方法,其中所述干细胞动员剂和所述免疫抑制剂为
相同的化合物。
9.一种用于改善患者的创伤愈合的方法,包括向所述患者施用治疗有效量
的干细胞动员剂和低剂量的免疫抑制剂。
10.一种用于改善患者的创伤愈合的方法,包括向所述患者施用治疗有效
量的AMD3100和低剂量的他克莫司。
11.如权利要求10所述的方法,其中所述低剂量的他克莫司为约0.01mg/kg
至约0.05mg/kg。
12.一种用于改善患者的创伤愈合的方法,包括向所述患者施用治疗有效
量的药剂和低剂量的免疫抑制剂,所述药剂动员CD34+干细胞和/或CD133+干细
胞。
13.如权利要求12所述的方法,其中动员CD34+干细胞和/或CD133+干细
胞的所述药剂为AMD3100并且所述免疫抑制剂为他克莫司。
14.一种用于改善患者的创伤愈合的方法,...

【专利技术属性】
技术研发人员:孙兆黎乔治·梅尔维尔·威廉姆斯青·林
申请(专利权)人:约翰霍普金斯大学
类型:发明
国别省市:美国;US

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