The invention belongs to the technical field of biological detection, which relates to a primer set for LAMP detection of Vibrio cholerae LAMP detection primer group includes four specific primers, respectively. FIP:SEQ ID forward inner primer NO.1, reverse primer BIP:SEQ ID NO.2 medial, lateral forward primer F3:SEQ ID NO.3 and reverse B3:SEQ ID NO.4 inner primer. The detection methods include: 1. Extracting samples to be tested; DNA; 2, preparing LAMP detection reaction system; 3, using DNA extracted from step 1 as template, performing LAMP amplification reaction, and using real-time turbidimetric method to identify amplification results. The qualitative detection sensitivity of Vibrio cholerae can reach 6.63 * 10
【技术实现步骤摘要】
一种用于检测霍乱弧菌的LAMP检测用引物组及检测方法
:本专利技术涉及生物检测
,特别涉及一种用于检测霍乱弧菌的LAMP检测用引物组及检测方法。
技术介绍
:霍乱弧菌(Vibriocholerae,VC)是引起霍乱的病原菌,在世界上曾引起多次大流行,给人们的生命财产造成巨大的损失。自然情况下,人类是VC的唯一易感者,主要通过被病原菌污染的水源或食物经口传染,临床表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水,死亡率高,属于国际检疫传染病,在我国被列为甲类传染病。快速准确地诊断是及时发现疫情、迅速采取措施控制疫情的关键。目前,VC的检测方法主要有传统分离鉴定法、血清学方法、PCR方法、胶体金法等。传统的分离鉴定方法灵敏度和特异性虽然较高,但检测时间太长,至少需要3~5d,不适于快速检测要求;血清学方法主要用于VC细菌分型,以现有的血清检测,当新的血清型出现时,易发生漏检;PCR法虽然灵敏度高,但受设备、试剂盒、试剂等条件的限制,基层单位较难开展,不利于霍乱疫情的监测;免疫胶体金技术虽检测快速,没有特殊的实验室条件要求,但该技术阳性预测值低,最终确诊仍以细菌培养为准。因此,发展操 ...
【技术保护点】
一种用于检测霍乱弧菌的LAMP检测用引物组,其特征在于,由内引物对FIP/BIP和外引物对F3/B3组成,FIP、BIP、F3、B3具体如下:
【技术特征摘要】
1.一种用于检测霍乱弧菌的LAMP检测用引物组,其特征在于,由内引物对FIP/BIP和外引物对F3/B3组成,FIP、BIP、F3、B3具体如下:2.一种利用权利要求1所述的引物组检测霍乱弧菌的LAMP检测方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、提取待测样品DNA;步骤2、配制LAMP检测反应体系,反应体系包括引物:SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3、SEQIDNO.4;步骤3、以步骤1中提取的DNA为模版进行LAMP扩增反应,用实时浊度法鉴定扩增结果。3.如权利要求2所述的一种利用权利要求1所述的引物组检测霍乱弧菌的LAMP检测方法,其特征在于,LAMP检测反应体系具体为:2×...
【专利技术属性】
技术研发人员:郝俊虎,陈林,杨旭光,王芳焕,薛强,
申请(专利权)人:宁夏出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心,中检国研北京科技有限公司,
类型:发明
国别省市:宁夏,64
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