一种用于检测霍乱弧菌的LAMP检测用引物组及检测方法技术

技术编号:15876543 阅读:103 留言:0更新日期:2017-07-25 14:23
本发明专利技术属于生物检测技术领域,涉及一种用于检测霍乱弧菌的LAMP检测用引物组,LAMP检测引物组包括四条特异性引物,分别为正向内侧引物FIP:SEQ ID NO.1、反向内侧引物BIP:SEQ ID NO.2、正向外侧引物F3:SEQ ID NO.3和反向内侧引物B3:SEQ ID NO.4。检测方法包括:1、提取待测样品DNA;2、配制LAMP检测反应体系;3、以步骤1中提取的DNA为模版进行LAMP扩增反应,用实时浊度法鉴定扩增结果。本发明专利技术对霍乱弧菌定性检测灵敏度可达到6.63×10

Primer set for detecting LAMP of Vibrio cholerae and detection method thereof

The invention belongs to the technical field of biological detection, which relates to a primer set for LAMP detection of Vibrio cholerae LAMP detection primer group includes four specific primers, respectively. FIP:SEQ ID forward inner primer NO.1, reverse primer BIP:SEQ ID NO.2 medial, lateral forward primer F3:SEQ ID NO.3 and reverse B3:SEQ ID NO.4 inner primer. The detection methods include: 1. Extracting samples to be tested; DNA; 2, preparing LAMP detection reaction system; 3, using DNA extracted from step 1 as template, performing LAMP amplification reaction, and using real-time turbidimetric method to identify amplification results. The qualitative detection sensitivity of Vibrio cholerae can reach 6.63 * 10

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测霍乱弧菌的LAMP检测用引物组及检测方法
:本专利技术涉及生物检测
,特别涉及一种用于检测霍乱弧菌的LAMP检测用引物组及检测方法。
技术介绍
:霍乱弧菌(Vibriocholerae,VC)是引起霍乱的病原菌,在世界上曾引起多次大流行,给人们的生命财产造成巨大的损失。自然情况下,人类是VC的唯一易感者,主要通过被病原菌污染的水源或食物经口传染,临床表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水,死亡率高,属于国际检疫传染病,在我国被列为甲类传染病。快速准确地诊断是及时发现疫情、迅速采取措施控制疫情的关键。目前,VC的检测方法主要有传统分离鉴定法、血清学方法、PCR方法、胶体金法等。传统的分离鉴定方法灵敏度和特异性虽然较高,但检测时间太长,至少需要3~5d,不适于快速检测要求;血清学方法主要用于VC细菌分型,以现有的血清检测,当新的血清型出现时,易发生漏检;PCR法虽然灵敏度高,但受设备、试剂盒、试剂等条件的限制,基层单位较难开展,不利于霍乱疫情的监测;免疫胶体金技术虽检测快速,没有特殊的实验室条件要求,但该技术阳性预测值低,最终确诊仍以细菌培养为准。因此,发展操作简便、快速准确、易本文档来自技高网...
一种用于检测霍乱弧菌的LAMP检测用引物组及检测方法

【技术保护点】
一种用于检测霍乱弧菌的LAMP检测用引物组,其特征在于,由内引物对FIP/BIP和外引物对F3/B3组成,FIP、BIP、F3、B3具体如下:

【技术特征摘要】
1.一种用于检测霍乱弧菌的LAMP检测用引物组,其特征在于,由内引物对FIP/BIP和外引物对F3/B3组成,FIP、BIP、F3、B3具体如下:2.一种利用权利要求1所述的引物组检测霍乱弧菌的LAMP检测方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、提取待测样品DNA;步骤2、配制LAMP检测反应体系,反应体系包括引物:SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3、SEQIDNO.4;步骤3、以步骤1中提取的DNA为模版进行LAMP扩增反应,用实时浊度法鉴定扩增结果。3.如权利要求2所述的一种利用权利要求1所述的引物组检测霍乱弧菌的LAMP检测方法,其特征在于,LAMP检测反应体系具体为:2×...

【专利技术属性】
技术研发人员:郝俊虎陈林杨旭光王芳焕薛强
申请(专利权)人:宁夏出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心中检国研北京科技有限公司
类型:发明
国别省市:宁夏,64

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