纯化大环内酯类化合物的方法技术

提供一种纯化大环内酯尤其是他克莫司的方法，所述方法包括将大环内酯装到吸附树脂床上，并用合适洗脱剂如水和四氢呋喃的组合洗脱。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及通过使用吸附树脂的分离方法纯化大环内酯类化合物尤其是他克莫司、子囊霉素、西罗莫司、依维莫司或吡美莫司的方法。相关申请本申请要求2003年7月24日提交的美国临时申请顺序号60/490,070和2004年1月26日提交的美国临时申请顺序号60/539,363的权益，这些申请的所有内容通过引用结合到本文中。
技术介绍
大环内酯类化合物为具有一种或多种脱氧糖作为取代基的多元内酯环化合物。红霉素、阿奇霉素和克拉霉素为有抑菌和/或杀菌活性的大环内酯类化合物。他克莫司(FK 506)也为大环内酯抗生素，也为免疫抑制剂。他克莫司比环孢菌素更有效，据报道它对T-淋巴细胞有选择性抑制作用。吡美莫司为大环内酰胺并为子囊霉素衍生物，据报道它抑制T细胞和肥大细胞生成促炎细胞因子。默克索引(The Merck Index)1331(Maryadele J.O′Neil等编辑，第13版，2001)。据报道吡美莫司用作免疫抑制剂。同上。另一种大环内酯类化合物西罗莫司据报道为免疫抑制剂。在移植后给予西罗莫司与环孢菌素和皮质类固醇以避免移植排斥。Martindale(马丁代尔药典)The Complete Drug Reference 568(Sean C.Sweetman编辑，Pharmaceutical Press 33版，2002)。依维莫司为西罗莫司衍生物，据报道为用于器官移植的免疫抑制剂。马丁代尔药典，539。尽管已知一些合成路线，但大环内酯类化合物一般经发酵获得。所得大环内酯类化合物一般包含几种杂质，这些杂质可用各种方法检测，如高效液相色谱法(HPLC)。药用化合物中存在杂质是不合需要的，许多管辖机构(如美国的食品药品管理局)的卫生当局已制定关于药物中杂质可接受水平的准则。不言而喻，任何药物需要降低杂质水平的商业实用方法。专利技术概述在一方面，本专利技术涉及一种从大环内酯尤其是他克莫司、子囊霉素、西罗莫司(雷帕霉素)、依维莫司和吡美莫司中分离杂质(即降低其中的杂质水平)的方法。该方法包括以下步骤制备大环内酯装料(loading charge)；将装料装到湿吸附树脂床上；用洗脱剂洗脱树脂床，该洗脱剂包含THF或乙腈、水和任选的其他有机溶剂；收集洗脱液的主要组分(中心组分)，从主要组分中分离杂质减少的大环内酯。在另一方面，本专利技术涉及通过上述方法制备的大环内酯类化合物，尤其是他克莫司、子囊霉素、西罗莫司(雷帕霉素)、依维莫司和吡美莫司。专利技术详述本文使用的术语环境温度指约0℃至约40℃的温度，优选约10℃至约35℃。本文使用的术语减压指压力小于约760mm Hg。本文使用的术语反溶剂指在环境温度下通常为液体，大环内酯在其中最多有少量溶解的物质。本文使用的术语“杂质”涉及保留时间不同于所需大环内酯的任何化合物。例如可通过下文描述的HPLC方法测量不同的保留时间。本文使用的术语RRT 0.95和RRT 1.25分别指在HPLC分析中，子囊霉素和二氢他克莫司(它们为他克莫司的杂质)的相对保留时间(相对于他克莫司)为约0.95和1.25，如下文所描述。本文使用的与混合物或液体组合有关的术语体积百分比或％体积指体积分数，用下式计算(以A类物质为例)％体积A＝WtA×ρA/(WtA×ρA+WtB×ρB)其中WtA和WtB分别为A和B类物质的重量(克)，且ρA和ρB分别为A和B类物质的密度(g/ml)。在一个实施方案中，本专利技术提供一种分离大环内酯类化合物中杂质(即降低其中杂质水平)的层析方法。通过将大环内酯装到吸附树脂床上并用洗脱剂洗脱实现分离(降低杂质)，该洗脱剂包含THF或乙腈、水和任选的其他有机溶剂。实施本专利技术优选的大环内酯类化合物包括他克莫司、子囊霉素、西罗莫司、依维莫司和吡美莫司。当他克莫司为大环内酯时，减少的杂质至少包括子囊霉素和二氢他克莫司，用下文描述的HPLC定量。当子囊霉素为大环内酯时，减少的杂质至少包括他克莫司。使用的大环内酯可来自任何来源。在实施本专利技术中，用洗脱剂洗脱负载大环内酯装料的吸附树脂床，得到洗脱液，从而实现减少(分离)杂质。本领域熟知用于实施本专利技术的吸附树脂，且优选交联、非离子苯乙烯-二乙烯基苯材料，但可进行化学修饰。也已知丙烯酸型吸附树脂。吸附树脂有大量孔结构，其表面可吸附-然后解吸-各种化学物质。吸附和解吸受环境如所用溶剂的影响。在极性溶剂(如水)的存在下，吸附树脂表现为疏水行为。当使用非极性溶剂(如烃)时，吸附树脂可表现一些极性行为。一般吸附树脂有大网络结构，并有至少约300m2/g的表面面积。用于实施本专利技术的吸附树脂包括得自Rohm和Haas的AmberliteXAD树脂(多孔性芳族聚合物微球树脂)；XAD 4、XAD 7HP、XAD 16HP、XAD 761和XAD 1180，在此仅提及一些。也有用的有得自Mitsubishi(三菱)的Diaion吸附树脂；HP10、HP 20、HP 21、HP 30、HP 40、HP 50、SP 800、SP 825、SP 850、SP 875、SP 205、SP 206、SP 207、HP1MG和HP2MG，在此仅提及一些。用于实施本专利技术的优选吸附树脂的实例为AmberliteXAD 1180。Amberlite XAD 1180为大网络交联芳族聚合物，它为非离子型疏水性交联聚合物，其吸附性能源自它专利的大网络结构(包含连续聚合物相和连续孔相)、高表面面积和其表面的芳族性质。表面面积为500m2/g或更高。孔隙率为0.60ml/ml或更高。PDS 0205A-Jan.98-1/2的产品数据一览表给出该树脂的其他信息。在本专利技术方法的第一步中，将大环内酯的装料装到吸附树脂床上。装料可以大环内酯的有机溶剂溶液提供，所用有机溶剂混有反溶剂。或者，在装到吸附树脂床前，将大环内酯装料吸附(沉积)至吸附树脂的负荷部分(loading portion)。将大环内酯的任选含水有机溶剂溶液与部分吸附树脂和反溶剂混合。该吸附树脂可与用于制备床的树脂相同，或可为不同吸附树脂。吸附树脂的负荷部分可为床体积的约33％至约50％。然后将负荷部分并置在湿吸附树脂床以提供负载装料的床。优选用于制备溶液(装料通过其装载或沉积)的有机溶剂选自四氢呋喃(THF)、丙酮乙腈(ACN)、甲醇、乙醇、正丁醇、正丙醇、异丙醇、酯(如乙酸乙酯)和偶极非质子溶剂如二甲基甲酰胺(DMF)。最优选有机溶剂为THF、丙酮或CAN。当大环内酯为他克莫司时，THF和ACN为优选溶剂。优选反溶剂为水或直链或支链烷烃或环烷烃，如己烷、庚烷或环己烷。加入反溶剂降低大环内酯在溶液中的溶解度，并且被认为促进样品吸附至吸附树脂的负荷部分。缓缓加入反溶剂以避免大的浓度梯度，该梯度可导致大环内酯部分大量沉淀，这可导致淤塞和堵塞。优选溶剂反溶剂比为40％或更小。可以在配有搅拌器的任何便利容器(如搅拌釜反应器)中混合大环内酯溶液、吸附树脂的负荷部分和反溶剂。在一个具体实施方案中，吸附树脂的负荷部分包含在柱中，并与在再循环系统中流经柱的大环内酯溶液接触。逐渐将反溶剂引入流经和环绕吸附树脂负荷部分的溶液流，由此大环内酯样品逐渐被吸附至吸附树脂的负荷部分上。作为实例，当大环内酯为他克莫司时，溶液可为约100g/L，且反溶剂体积本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离大环内酯中杂质的方法，所述方法包括下列步骤：ａ）提供大环内酯装料，该大环内酯有初始水平的杂质，ｂ）将该装料装到吸附树脂床上，ｃ）用洗脱剂洗脱该负载的吸附树脂床得到洗脱液，该洗脱剂包含水和选自四氢呋喃和乙腈的有 机溶剂，和ｄ）收集至少一个包含该大环内酯的洗脱液组分。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：V克里，Z措维克，F兰塔尔，A措尔瓦西，
申请(专利权)人：特瓦药厂私人有限公司，
类型：发明
国别省市：HU[匈牙利]