一类大环内酯化合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一类大环内酯化合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用。大环内酯化合物其结构如式(Ⅰ)中，化合物1：β‑OH；或化合物2：α‑OH；或式(Ⅱ)中，化合物3：β‑OH；或化合物4：α‑OH；或式(Ⅲ)中，化合物5。本发明专利技术的大环内酯类化合物‑化合物2、化合物3、化合物4和化合物5是新的化合物，对肿瘤细胞或测试细菌具有明显的抑制作用，可以用于制备抗肿瘤或抑菌药物，用于治疗肿瘤或细菌感染，因此本发明专利技术为开发新的抗肿瘤或抑菌药物提供了备选化合物，对开发中国海洋药物资源具有重要的意义。

Macrolide compounds and their use in the preparation of antitumor drugs

The present invention discloses one kind of macrolide compound and its application in preparing antitumor medicine. Macrolide compounds such as the structure of formula (I), 1 compounds: OH or beta; compound 2: alpha OH; or (II), 3 compounds: OH or beta; compound 4: alpha OH; or (III) compounds, 5. Macrolide compounds compounds of the present invention 2, compound 3, compound 4 and compound 5 is a new compound has significant inhibitory effect on tumor cells or test bacteria, can be used for preparing anti-tumor or antibacterial agents for the treatment of tumors, or bacterial infection, so the invention for the development of new anti tumor or provide alternative antimicrobial compounds, has important significance to the development of marine drug resources Chinese.

【技术实现步骤摘要】
一类大环内酯化合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用
：本专利技术属于天然产物领域，具体涉及五个大环内酯类化合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
：长期以来，恶性肿瘤已成为严重危害人类生命和生活质量的主要疾病之一。据报道，恶性肿瘤已经成为我国居民首要死因，而且，随着经济的发展以及人们对环境保护的不力，恶性肿瘤的致死率还在不断增长。世界卫生组织预测，到2020年，将有2000万新发恶性肿瘤病例，其中死亡人数达1200万，且绝大部分将发生在发展中国家。对于恶性肿瘤的治疗，天然产物及其衍生物药物发挥着重要作用。据报道，1981年到2008年间，天然产物来源的抗肿瘤药物占上市抗肿瘤药物的60％以上，而且，新型天然产物及其衍生物作为新的抗肿瘤药物所占数量还在不断增加。
技术实现思路
：本专利技术的第一个目的是提供五个具有抗肿瘤活性的大环内酯类化合物及其药用盐。本专利技术的大环内酯类化合物或其药用盐，其结构如式(Ⅰ)、(Ⅱ)和(Ⅲ)所示：式(Ⅰ)中，化合物1：β-OH；或化合物2：α-OH；或式(Ⅱ)中，化合物3：β-OH；或化合物4：α-OH；或式(Ⅲ)中，化合物5。本专利技术人通过对海洋放线菌Streptomycessp.SCSIOZJ89发酵提取物的HPLC-DAD图谱分析，发现其所产次级代谢产物紫外吸收特征鲜明，通过摇床放大发酵和提取纯化，得到5个紫外吸收基本一致的同类化合物。经结构分析，其被确定为大环内酯类化合物，具体结构如式(Ⅰ)、(Ⅱ)和(Ⅲ)所示，化合物1：β-OH；或化合物2：α-OH；或式(Ⅱ)中，化合物3：β-OH；或化合物4：α-OH；或式(Ⅲ)中，化合物5。通过对化合物1、化合物2、化合物3、化合物4和化合物5的抗肿瘤活性评价，发现化合物1-5对人肺癌(A549)、人鼻咽癌(CNE2)、人宫颈癌(HeLa)、人肝癌(HepG2)、人乳腺癌(MCF-7)具有明显抑制作用。因此，本专利技术的第二个目的是提供化合物1、化合物2、化合物3、化合物4或化合物5在制备抗肿瘤药物中的应用。优选，所述的抗肿瘤药物为抗人肺癌、人鼻咽癌、人宫颈癌、人肝癌或人乳腺癌的药物。本专利技术的第三个目的是提供一种抗肿瘤药物，其特征在于，包括有效量的作为活性成份的如式(Ⅰ)、(Ⅱ)和(Ⅲ)所示的化合物1、化合物2、化合物3、化合物4或化合物5，或其药用盐，和药学上可以接受的载体。优选，所述的抗肿瘤药物为抗人肺癌、人鼻咽癌、人宫颈癌、人肝癌或人乳腺癌的药物。本专利技术的第四个目的是提供一种制备化合物1、化合物2、化合物3、化合物4和化合物5的方法，其特征在于，所述的化合物1、化合物2、化合物3、化合物4和化合物5是从海洋放线菌Streptomycessp.SCSIOZJ89的发酵产物中制备分离得到的。优选，具体步骤如下：A、制备海洋放线菌Streptomycessp.SCSIOZJ89的发酵产物；B、将海洋放线菌Streptomycessp.SCSIOZJ89的发酵产物进行离心分离，获得发酵液和菌丝体，发酵液用丁酮萃取，丁酮萃取液浓缩得发酵液浸膏；菌丝体用丙酮萃取，丙酮萃取液经浓缩得菌体浸膏，该浸膏用硅胶分离，采用氯仿/甲醇从100/0,98/2,96/4,94/6,92/8,90/10,80/20,50/50,0/100,v/v梯度洗脱顺序得9个组分A1-A9；氯仿/甲醇94/6洗脱得馏份-组分A4用氯仿/甲醇100/0,98/2,96/4,94/6,92/8,90/10,v/v梯度洗脱顺序得6个组分B1-B6，氯仿/甲醇96/4洗脱得馏份-组分B3用氯仿/甲醇100/0,98/2,96/4,94/6,92/8,v/v得5个组分C1-C5；氯仿/甲醇92/8洗脱得馏份-组分A5、氯仿/甲醇94/6洗脱得馏份-B4合并，然后用石油醚/乙酸乙酯P/E，80/20,70/30,60/40,55/45,50/50,40/60,30/70,20/80,v/v梯度洗脱顺序得到组分D1-D8，合并氯仿/甲醇94/6洗脱得馏份-组分C4、石油醚/乙酸乙酯40/60洗脱得馏份-D6和石油醚/乙酸乙酯30/70洗脱得馏份-D7，经高效液相纯化得到化合物5，合并组分氯仿/甲醇98/2洗脱得馏份-C2和氯仿/甲醇96/4洗脱得馏份-组分C3，经高效液相纯化得到化合物1、化合物4、化合物3和化合物2。所述的制备海洋放线菌Streptomycessp.SCSIOZJ89的发酵产物是以海洋放线菌Streptomycessp.SCSIOZJ89作为发酵菌株在放大发酵培养基中培养得到海洋放线菌Streptomycessp.SCSIOZJ89的发酵产物；所述的放大发酵培养基，按总质量分数100％计，包括可溶性淀粉0.5％，大豆粉0.5％，葡萄糖2％，酵母膏0.2％，蛋白胨0.2％，K2HPO40.05％，MgSO4·7H2O0.05％，NaCl0.4％，CaCO30.2％，粗海盐3％，pH7.2-7.4，余量为水。本专利技术的大环内酯类化合物-化合物1、化合物2、化合物3、化合物4和化合物5对肿瘤细胞具有明显的抑制作用，可以用于制备抗肿瘤药物，用于治疗肿瘤，因此本专利技术为开发新的抗肿瘤药物提供了备选化合物，对开发中国海洋药物资源具有重要的意义。本专利技术的海洋放线菌Streptomycessp.SCSIOZJ89于2016年11月22日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院中科院微生物研究所，其保藏编号为：CGMCCNO.13322。附图说明：图1是化合物2-5的1H-1HCOSY和部分HMBC相关信息，其中2代表化合物2，3代表化合物3，4代表化合物4，5代表化合物5。具体实施方式：以下实施例是对本专利技术的进一步说明，而不是对本专利技术的限制。实施例1：如式(Ⅰ)、(Ⅱ)和(Ⅲ)所示的化合物1、化合物2、化合物3、化合物4或化合物5的制备和结构鉴定一、如式(Ⅰ)、(Ⅱ)和(Ⅲ)所示的化合物1、化合物2、化合物3、化合物4或化合物5的制备1.种子培养：(1)种子培养基配方：按质量分数100％计，包括可溶性淀粉0.5％，大豆粉0.5％，葡萄糖2％，酵母膏0.2％，蛋白胨0.2％，K2HPO40.05％，MgSO4·7H2O0.05％，NaCl0.4％，CaCO30.2％，粗海盐3％，pH7.2-7.4，余量为水。按照配方将上述物质混合在一起，配好后分装于250mL的锥形瓶中，每瓶装50mL，121℃灭菌20分钟，做为备用的种子培养基。(2)种子的培养：将海洋放线菌Streptomycessp.SCSIOZJ89的菌丝体或孢子接入到上述种子培养基中，以200rpm的转速、在28℃下、摇床培养36小时得种子培养液。2.放大发酵培养：(1)放大发酵培养基配方：按总质量分数100％计，包括可溶性淀粉0.5％，大豆粉0.5％，葡萄糖2％，酵母膏0.2％，蛋白胨0.2％，K2HPO40.05％，MgSO4·7H2O0.05％，NaCl0.4％，CaCO30.2％，粗海盐3％，pH7.2-7.4，余量为水。按照配方将上述物质混合在一起，分批配好后共计21.8L放大发酵培养基，配好后分装于1000mL的锥形瓶中，每瓶装200mL，121℃灭菌20分钟，做为备本文档来自技高网...

【技术保护点】
大环内酯类化合物或其药用盐，其结构如式(Ⅰ)、(Ⅱ)或(Ⅲ)所示：

【技术特征摘要】
1.大环内酯类化合物或其药用盐，其结构如式(Ⅰ)、(Ⅱ)或(Ⅲ)所示：式(Ⅰ)中，化合物1：β-OH；或化合物2：α-OH；或式(Ⅱ)中，化合物3：β-OH；或化合物4：α-OH；或式(Ⅲ)中，化合物5。2.一种制备权利要求1中的化合物1、化合物2、化合物3、化合物4和化合物5的方法，其特征在于，所述的化合物1、化合物2、化合物3、化合物4和化合物5是从海洋放线菌Streptomycessp.SCSIOZJ89的发酵产物中制备分离得到的。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，具体步骤如下：A、制备海洋放线菌Streptomycessp.SCSIOZJ89的发酵产物；B、将海洋放线菌Streptomycessp.SCSIOZJ89的发酵产物进行离心分离，获得发酵液和菌丝体，发酵液用丁酮萃取，丁酮萃取液浓缩得发酵液浸膏；菌丝体用丙酮萃取，丙酮萃取液经浓缩得菌体浸膏，该浸膏用硅胶分离，采用氯仿/甲醇从100/0,98/2,96/4,94/6,92/8,90/10,80/20,50/50,0/100,v/v梯度洗脱顺序得9个组分A1-A9；氯仿/甲醇94/6洗脱得馏份-组分A4用氯仿/甲醇100/0,98/2,96/4,94/6,92/8,90/10,v/v梯度洗脱顺序得6个组分B1-B6，氯仿/甲醇96/4洗脱得馏份-组分B3用氯仿/甲醇100/0,98/2,96/4,94/6,92/8,v/v得5个组分C1-C5；氯仿/甲醇92/8洗脱得馏份-组分A5、氯仿/甲醇94/6洗脱的馏份-B4合并，然后用石油醚/乙酸乙酯P/E从80/20,70/30,60/40,55/45,50/50,40/6...

【专利技术属性】
技术研发人员：鞠建华，宋永相，李青连，胡云峰，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44