一种提高抗体纯度的细胞培养基和培养方法技术

技术编号:14192783 阅读:504 留言:0更新日期:2016-12-15 12:15
本发明专利技术涉及生物技术领域,具体涉及一种提高抗体纯度的细胞培养基和培养方法。本发明专利技术公开了一种自制补料培养基,所述培养基含有90mM~500mM半胱氨酸。并提供了一种细胞培养方法,包括以下步骤:在基础培养基中接种包含编码抗体核酸的哺乳动物细胞;进入细胞增殖期后补加所述自制补料培养基;监测细胞密度调整培养时间。通过控制自制补料培养基中半胱氨酸的浓度及加入时机、加入量,能显著提高抗体的纯度,且在提高抗体纯度的同时能够维持抗体表达量和正常的糖基化水平,保证了抗体的药效。

Cell culture medium and culture method for improving antibody purity

The invention relates to the technical field of biotechnology, in particular to a cell culture medium and a culture method for improving the purity of antibody. The invention discloses a self-made feed medium, which comprises 90mM to 500mM cysteine. It provides a method of cell culture, which comprises the following steps: Based on mammalian cell culture medium containing nucleic acid vaccination encoding antibody; enter the cell proliferation period after adding the self-made feeding medium; monitoring cell density adjust training time. Self feeding medium concentration of cysteine and adding amount of time, through control, can significantly improve the purity of antibody, and in improving the purity of antibody can maintain normal antibody expression and glycosylation level, to ensure the efficacy of antibody.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
,具体涉及提高抗体纯度的细胞培养基和培养方法
技术介绍
在生物医药行业,哺乳动物细胞作为重组蛋白药物的表达载体具有明显的优势,其能够完成重组蛋白后期复杂的翻译后修饰,能够保证产品中二硫键、糖基化等复杂蛋白结构的正确形成,从而能够保证重组蛋白的药性和药效,是一类重要的表达系统。近年来,用于单抗药物生产的动物细胞大规模培养技术发展迅速。该领域的技术进展主要集中在个性化培养基开发和工艺条件优化等方面。作为生物大分子的重组抗体,同时具备聚体、降解、糖基化修饰、氧化、脱酰基化、异构体、二硫键错配等多种变异形式。纯度作为抗体最重要的质量属性对抗体的分子效应功能具有决定作用。现有的提高抗体纯度的方法主要是上游缩短细胞培养周期或者下游纯化工艺牺牲收率,缩短细胞培养周期会降低抗体表达量,其他的糖基化水平也会改变;下游纯化工艺牺牲收率的方式虽然获得高纯度抗体,但是会增加生产成本。因此,亟需一种既不影响抗体表达量又能显著提高抗体纯度的细胞培养方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于:提供一种用于细胞培养尤其是哺乳动物细胞培养中高纯度抗体表达的自制补料培养基和培养方法。一方面,本本文档来自技高网...
一种提高抗体纯度的细胞培养基和培养方法

【技术保护点】
一种自制补料培养基,其特征在于,含有90mM~500mM半胱氨酸。

【技术特征摘要】
1.一种自制补料培养基,其特征在于,含有90mM~500mM半胱氨酸。2.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于,所述半胱氨酸的浓度为100mM~400mM。3.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于,所述半胱氨酸的浓度为120mM~300mM。4.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于,还含有酪氨酸和色氨酸,所述酪氨酸的浓度为200mM~400mM,所述色氨酸的浓度为50mM~150mM。5.根据权利要求1至4其中任意一项所述的培养基,其特征在于,所述自制补料培养基pH为10~12。6.一种使用权利要求1至5其中任意一项所述的培养基培养哺乳动物细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)在基...

【专利技术属性】
技术研发人员:程习文鄢成伟杨彬孙文正翁源灿邓崇飞
申请(专利权)人:广东东阳光药业有限公司
类型:发明
国别省市:广东;44

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