一种嵌合受体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种嵌合受体及其应用，其包括：第一胞外结构域，其包括特异性靶向4

【技术实现步骤摘要】
一种嵌合受体及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种嵌合受体及其应用。

技术介绍

[0002]未经过HLA配型同种异体细胞进行异源移植时，移植宿主的免疫细胞会对异源细胞产生免疫排斥(Host anti
‑
Graft，HVG，宿主抗移植物反应)，NK和T细胞对其攻击，导致移植细胞死亡，无法长时间发挥细胞功能。现异体器官移植主要依靠HLA配型来降低免疫排斥，同时服用免疫抑制剂对急性、慢性排斥进行抑制。
[0003]在通用化CAR
‑
T使用中，无法使用免疫抑制剂的方式来解决HVG问题。现有的方案如敲除T细胞HLA相关基因，并未能消除HVG反应：敲除B2M基因后CAR
‑
T细胞能躲避宿主T细胞攻击，但无法躲避NK细胞攻击。
[0004]在未解决HVG问题的情况下，现有的通用型CAR
‑
T细胞在FCA(氟达拉滨+环磷酰胺+阿伦单抗)深度清淋的患者中体内存续时间也只有1个月左右，无法达到个性化CAR
‑
T长达一年的体内存续时间，导致通用型CAR
‑
T细胞整体治疗效果不理想，患者治疗后复发率较高。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种抑制宿主抗外源免疫细胞HVG反应的嵌合受体，其特异识别4
‑1‑
BB靶标，并且不包括激活信号转导结构域，从而避免了与CAR共表达时胞内信号转导过强的问题，可有效提高对4
‑1‑
BB阳性NK/T细胞的杀伤持续性。
[0006]为此，本专利技术的第一方面提供一种嵌合受体(Chimeric Receptor，CR)，所述嵌合受体包括：
[0007](i)第一胞外结构域，所述第一胞外结构域包括特异性靶向4
‑
1BB的结构域；以及
[0008](ii)第一跨膜结构域；和
[0009](iii)第一胞内结构域，所述第一胞内结构域包括第一共刺激结构域，并且不包括刺激信号转导结构域；
[0010]所述第一胞外结构域还包括第一铰链区，所述第一铰链区与所述第一跨膜结构域相连接。
[0011]在一些实施方式中，所述嵌合受体包括：第一胞外结构域，所述第一胞外结构域包括特异性靶向4
‑
1BB的结构域；以及第一跨膜结构域；所述嵌合受体不包括胞内结构域。
[0012]在一些实施方式中，所述嵌合受体包括：第一胞外结构域，所述第一胞外结构域包括特异性靶向4
‑
1BB的结构域；以及第一跨膜结构域；第一胞内结构域，所述第一胞内结构域包括第一共刺激结构域，并且不包括刺激信号转导结构域。
[0013]进一步，所述特异性靶向4
‑
1BB的结构域包括抗4
‑
1BB抗体或其抗原结合片段、或4
‑
1BBL胞外结构域或其变体。
[0014]进一步，所述抗4
‑
1BB抗体或其抗原结合片段选自下组：Fab'片段、F(ab')2片段、
双特异性Fab二聚体(Fab2)、三特异性Fab三聚体(Fab3)、Fv、单链Fv蛋白(scFv)、双抗体、三抗体、四抗体、二硫键稳定的Fv蛋白(dsFv)和单结构域抗体(sdAb、骆驼科动物VHH、纳米抗体)。
[0015]进一步，所述抗4
‑
1BB抗体是人源化抗体或其抗原结合片段。
[0016]进一步，所述4
‑
1BBL为人4
‑
1BBL。
[0017]在一些实施方式中，所述4
‑
1BBL胞外结构域包括如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。
[0018]在一些实施方式中，所述第一铰链区包括选自下组蛋白质的铰链区的一种或两种以上的组合：IgG、CD8、CD28。
[0019]在一些实施方式中，所述第一铰链区包括CD8铰链区，其包括如SEQ IDNO：2所示的氨基酸序列。
[0020]在一些实施方式中，所述第一铰链区包括IgG的CH3结构域，其包括如SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列。
[0021]在一些实施方式中，所述第一铰链区包括IgG的CH3结构域和CD8铰链区。
[0022]在一些实施方式中，所述第一铰链区包括IgG的CH3结构域和CD8铰链区。
[0023]在一些实施方式中，所述第一跨膜结构域选自下组蛋白质的跨膜结构域：CD4、CD8、CD28、CD3ζ、CD34。
[0024]在一些实施方式中，所述第一跨膜结构域包括CD8跨膜结构域，其包括SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列。
[0025]进一步，所述第一共刺激结构域选自下组蛋白质的共刺激结构域中一个或多个：CD28、ICOS、4
‑
1BB、OX20、OX40、CD27、CD30、HVEM。
[0026]在一些实施方式中，所述第一共刺激结构域包括4
‑
1BB共刺激结构域，其包括如SEQ ID NO：5所示的氨基酸序列。
[0027]进一步，所述第一胞内结构域不包括来自CD3ζ的胞内结构域。
[0028]进一步，所述嵌合受体还包括第一信号肽或第一前导序列。
[0029]在一些实施方式中，所述第一信号肽或第一前导序列包括如SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列。
[0030]更进一步，所述嵌合受体分子还包括连接子，氨基酸序列如SEQ ID NO：21或SEQ ID NO：23所示。
[0031]在一些实施方式中，所述嵌合受体包括：4
‑
1BBL胞外结构域或其变体，IgG的CH3结构域，CD8铰链区，CD8跨膜结构域，4
‑
1BB共刺激结构域。
[0032]在一些实施方式中，所述嵌合受体包括：4
‑
1BBL胞外结构域或其变体，IgG的CH3结构域，CD8铰链区，CD8跨膜结构域。
[0033]在一些实施方式中，所述嵌合受体包括：4
‑
1BBL胞外结构域或其变体，CD8铰链区，CD8跨膜结构域。
[0034]在一些实施方式中，所述嵌合受体包括：4
‑
1BBL胞外结构域或其变体，CD8铰链区，CD8跨膜结构域，4
‑
1BB共刺激结构域。
[0035]在一些优选的实施方式中，所述嵌合受体包括：
[0036](i)第一胞外结构域，所述第一胞外结构域包括特异性靶向4
‑
1BB的结构域；以及
[0037](ii)第一跨膜结构域；和
[0038](iii)第一胞内结构域，所述第一胞内结构域包括第一共刺激结构域，并且不包括激活信号转导结构域。
[0039]第二方面，本专利技术提供一种分子组合，所述分子组合包括本专利技术第一方面所述的嵌合受体，和嵌合抗原受体(CAR)；所述嵌合抗原受体包括本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种嵌合受体，其特征在于，所述嵌合受体包括：(i)第一胞外结构域，所述第一胞外结构域包括特异性靶向4
‑
1BB的结构域；以及(ii)第一跨膜结构域；和(iii)第一胞内结构域，所述第一胞内结构域包括第一共刺激结构域，并且不包括激活信号转导结构域；所述第一胞外结构域还包括第一铰链区，所述第一铰链区与所述第一跨膜结构域相连接。2.如权利要求1所述的嵌合受体，其特征在于，所述特异性靶向4
‑
1BB的结构域包括抗4
‑
1BB抗体或其抗原结合片段、或4
‑
1BBL胞外结构域或其变体；优选地，所述4
‑
1BBL胞外结构域包括如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。3.如权利要求1所述的嵌合受体，其特征在于，所述第一铰链区包括选自下组蛋白质的铰链区的一种或两种以上的组合：IgG、CD8、CD28；优选地，所述第一铰链区包括CD8铰链区，其包括如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；优选地，所述第一铰链区包括IgG的CH3结构域，其包括如SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列；优选地，所述第一铰链区包括IgG的CH3结构域和CD8铰链区。4.如权利要求1所述的嵌合受体，其特征在于，所述第一跨膜结构域选自下组蛋白质的跨膜结构域：CD4、CD8、CD28、CD3ζ；优选地，所述第一跨膜结构域包括CD8跨膜结构域，其包括SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列。5.如权利要求1所述的嵌合受体，其特征在于，所述第一共刺激结构域选自下组蛋白质的共刺激结构域：CD28、ICOS、4
‑
1BB、OX20、OX40、CD27、CD30、HVEM；优选地，所述第一共刺激结构域包括4
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1BB共刺激结构域，其包括如SEQID NO：5所示的氨基酸序列。6.如权利要求1所述的嵌合受体，其特征在于，所述嵌合受体还包括第一信号肽或第一前导序列；优选地，所述第一信号肽或第一前导序列包括如SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列。7.一种分子组合，其特征在于，所述分子组合包括权利要求1
‑
6任一项所述的嵌合受体，和嵌合抗原受体；所述嵌合抗原受体包括：(iv)第二胞外结构域，所述第二胞外结构域包括抗原结合结构域；(v)第二跨膜结构域；以及(vi)第二胞内结构域，所述第二胞内结构域包括第二共刺激结构域，以及激活信号转导结构域。8.如权利要求7所述的分子组合，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括抗原结合结构域、CD8铰链区、CD8跨膜结构域以及第二胞内结构域。9.如权利要求8所述的分子组合，其特征在于，所述抗原结合结构域结合选自下组的抗原：BCMA、CD4、CD7、CD16、CD19、CD20、CD22、CD30、CD33、CD37、CD38、CD44、CD44v6、CD44v7/8、CD70、CD79a、CD79b、CD123、CD133、CD138、CD171、癌胚抗原；优选地，所述抗原结合结构域结合CD19、CD20、CD22、BCMA；
优选地，所述抗原结合结构域包括如SEQ ID NO：7所示的氨基酸序列。10.如权利要求8所述的分子组合，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘靖，张世都，叶群瑞，董军纪，宋益哲，李凯峰，李利佳，李文佳，
申请(专利权)人：广东东阳光药业有限公司，
类型：发明
国别省市：