一种多肽及其在改善阿尔茨海默病学习记忆损伤中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种多肽及其在改善阿尔茨海默病学习记忆损伤中的应用。本发明专利技术利用人工合成TAT蛋白转导结构域和P

【技术实现步骤摘要】
一种多肽及其在改善阿尔茨海默病学习记忆损伤中的应用


[0001]本专利技术涉及多肽的
，具体涉及一种多肽及其在改善阿尔茨海默病学习记忆损伤中的应用。

技术介绍

[0002]阿尔茨海默病(Alzheimer
’
s disease,AD)是最常见的神经退行性疾病，占痴呆患者60％以上，85岁及以上人群患病率达33.2％。AD早期表现为近期记忆障碍，晚期出现沟通障碍、迷失方向、精神错乱等症状。2050我国老年人将达到总人口1/3，AD将给社会带来沉重医疗负担。AD特征性病理变化包括淀粉样蛋白β(Aβ)形成的斑块、过度磷酸化Tau蛋白形成的神经纤维缠结、神经元和突触丢失。AD无法治愈，靶向Aβ和Tau的临床试验均未达到预期。
[0003]突触由突触前和突触后组成，是神经元与神经元或其它细胞的功能连接，是大脑记忆存储和信息传递的基本单元。突触障碍包括突触丢失、突触传递异常、树突棘萎缩等，是导致学习记忆损伤的重要原因。突触障碍在AD早期已出现，与认知功能损伤最为密切相关，突触障碍可用于预测AD临床症状。可溶性Aβ和Tau寡聚体可引起突触毒性并通过神经环路进行传播。AD被认为是一种突触障碍疾病，靶向突触障碍可改善小鼠AD样症状，因此，部分临床试验将突触完整性作为AD治疗的主要或次要终点。尽管突触障碍是AD学习记忆损伤的先决条件，但突触障碍的潜在机制仍不明确，目前仍缺乏有效缓解和阻止突触障碍的治疗方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服上述
技术介绍
的不足，提供一种多肽及其在改善阿尔茨海默病学习记忆损伤中的应用，该多肽由与UBE2K蛋白竞争性结合到GluN2B受体的氨基酸序列组成的小分子多肽TAT
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1082，通过运用到在体的小鼠阿尔茨海默病模型上，有效发挥其阻断UBE2K(Ubiquitin Conjugating Enzyme E2 K)与GluN2B受体(Glutamate Ionotropic Receptor NMDA Type Subunit 2B)的结合，使得GluN2B受体的泛素化水平降低，蛋白水平升高，从而改善阿尔茨海默病学习记忆损伤，为改善阿尔茨海默病学习记忆损伤提供方法。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供一种多肽，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
[0006]本专利技术还提供一种上述的多肽在改善阿尔茨海默病学习记忆损伤中的应用。
[0007]本专利技术还提供一种上述的多肽在制备用于改善阿尔茨海默病学习记忆损伤药物的应用。
[0008]本专利技术还提供一种用于改善阿尔茨海默病学习记忆损伤的药物，所述药物的有效成分为上述的多肽。
[0009]进一步地，所述药物还含有一种或多种药学上可接受的赋形剂或/和载体的结合。
[0010]再进一步地，所述药物的剂型为注射剂或口服制剂。
[0011]更进一步地，所述载体为稳定剂、分散剂、乳化剂、增溶剂、缓冲剂、防腐剂、润滑剂、保水剂或稀释剂中的一种或多种。
[0012]本专利技术一种多肽在改善阿尔茨海默病学习记忆损伤中的应用，将其通过腹腔注射，发现其可有效增加GluN2B蛋白水平，改善突触损伤，提高小鼠的学习记忆能力，为改善阿尔茨海默病学习记忆损伤提供方法。
[0013]专利技术人经过大量实验研究发现，UBE2K与GluN2B在细胞和小鼠中均有相互结合，过表达UBE2K能降低GluN2B蛋白水平，而抑制UBE2K能增加GluN2B蛋白水平。针对这一发现，专利技术人将TAT穿膜肽(YGRKKRRQRRR)与P
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1082(GNAAKRRKQQYKDSL)连接，得到具有生物活性的小分子多肽TAT
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1082，通过小鼠腹腔注射方式，使TAT
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1082多肽进入血液跨越血脑屏障并被大脑神经元摄取发挥其生物功能。
[0014]小分子多肽TAT
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1082在改善阿尔茨海默病学习记忆损伤中的应用，其应用过程如下：
[0015](1)TAT
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1082多肽在改善阿尔茨海默病学习记忆损伤中的应用
[0016]APP/PS1是常用的AD模型小鼠，在12月龄时表现出明显的学习记忆损伤和突触障碍。取20只12月龄体重相近APP/PS1雄性小鼠合笼共养1周后，随机选取10只小鼠给予15mg/kg TAT
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1082多肽溶液，其他10只小鼠腹腔注射给予15mg/kg TAT
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Scramble多肽溶液，连续注射14天后进行新事物识别和Morris水迷宫实验，溶液均由多肽粉末用注射用生理盐水进行稀释配置，现配现用。实验发现，注射了TAT
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Scramble对照溶液的小鼠对新旧事物喜好无明显差别，而注射了TAT
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1082溶液的小鼠对新事物表现出更高的喜好。Morris水迷宫实验发现注射了TAT
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1082溶液的小鼠学习记忆能力明显高于注射TAT
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Scramble对照溶液的小鼠。
[0017]免疫共沉淀发现，UBE2K与GluN2B在N2a细胞和C57BL/6小鼠海马中均有相互结合。在离体培养14天的原代神经元，免疫荧光染色发现UBE2K与GluN2B在神经元内有共定位。在N2a细胞中过表达UBE2K能降低GluN2B蛋白水平，而抑制UBE2K能增加GluN2B蛋白水平。在N2a细胞中过表达UBE2K，在给予10μM TAT
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P
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1082溶液处理后，通过免疫印迹，发现TAT
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1082可以有效逆转UBE2K引起的GluN2B蛋白水平降低。通过上述系列实验证明，TAT
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1082多肽可以改善阿尔茨海默病学习记忆损伤。
[0018](2)TAT
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1082多肽在改善阿尔茨海默病突触损伤中的作用
[0019]小鼠Morris水迷宫实验后，采用Golgi染色分析小鼠突触数量、蘑菇状树突棘比例、突触复杂性的改变。发现与注射了TAT
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Scramble对照溶液的小鼠相比，注射了TAT
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1082溶液的小鼠树突棘数量、蘑菇状树突棘比例、突触复杂性都明显升高，GluN2B泛素化水平降低而蛋白水平升高。通过上述实验证明TAT
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1082多肽可以改善阿尔茨海默病突触损伤。
[0020]与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：
[0021]其一，本专利技术将TAT穿膜肽(YGRKKRRQRRR)与P
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其特征在于：所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。2.如权利要求1所述的多肽在改善阿尔茨海默病学习记忆损伤中的应用。3.如权利要求1所述的多肽在制备用于改善阿尔茨海默病学习记忆损伤药物的应用。4.一种用于改善阿尔茨海默病学习记忆损伤的药物，其特征在于：所述药物的有效成分为权利要求1所述的多肽。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：王雄，程黎明，谢家钊，鲁艳军，沈娜，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属同济医院，
类型：发明
国别省市：