本发明专利技术公开了一种早期筛查实体瘤或癌症的酶联免疫检测试剂盒及应用。本发明专利技术的试剂盒以SCNH2多肽作为抗原，与兔抗人SCNH2的特异性单克隆抗体结合反应，然后与酶标记的兔的二抗进行结合，并使用相应的底物进行显色，显色后添加显色硫酸或磷酸终止液终止反应，在相应的吸收光下测定产物。通过实验证明：本发明专利技术用于检测SCNH2的抗人SCNH2的单克隆抗体特异性高、灵敏度高；并且检测结果因采用酶联免疫专业设备避免了人为操作的误差；可有效、方便地对液体活检样中的SCNH2进行精确的定量检测。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，具体涉及一种早期筛查实体瘤或癌症的酶联免疫检测试剂盒及应用。
技术介绍
癌症的发生已经成为每个人身边的最大健康隐患。世界卫生组织公布的《全球癌症报告2014》显示，2012年我国癌症患者新增307万，死亡约220万；肺癌、肝癌、食道癌、胃癌和结直肠癌的新增病例和死亡率也远高于世界平均值；2013年亚太抗癌大会上甚至有专家宣称，我国每年新增癌症患者数量已占全球的20％以上，而且癌症高发的势头丝毫没有逆转趋势。随着社会的高速发展癌症也年轻化，癌症的发病年龄已经提前到40岁左右，逐渐成为人类第一致死性疾病。积极预防、早期发现和早期治疗是对付肿瘤最有效的办法。随着人们经济水平的提高，很多人虽然对自己的健康要求高了，但是由于工作压力比较大，多数人没有意识到已经处在亚健康状态或者处在没有症状的早期癌症阶段了。因此血液(血浆和/或血清)和/或尿液的早期筛查对临床早期的癌症或肿瘤发现、确定分期、治疗方案、以及提高治疗效率等具有很大的意义。癌症的检测和诊断一直以来都是一个棘手的难题。目前，癌症检测和诊断还没有一些标准化的通用手段，普遍采用的结肠镜检查、活体组织检查和PET－CT等方法侵入性强，不可避免造成机体创伤，不仅给患者带来极大的痛苦，操作起来也极为不便，而且费用昂贵、周期比较长，一般人群比较难以承担或承受，还只局限在某些癌种。例如针对结肠癌的结肠镜检查、针对乳癌的乳房X线检查、针对前列腺癌的PSA检查以及子宫颈癌的子宫颈抹片检查等等。但其它的癌症，就没有一些很好的检查方法了，医生只能在这些癌症症状出现后才可以做出诊断，从而失去最佳治疗时机。另外，患者只有在出现了某些影响生活的症状时才去医院进行检查，若是癌症的话，对于大多数人来说，这个时期的癌症已经处于中晚期了，贻误了时机，留给自己的治疗窗口就非常小了。研究发现，血液中存在的肿瘤特异性靶基因、肿瘤细胞和肿瘤生长因子可以作为一种标志物来进行诊断、治疗和预后监测。因此，体液检查是早期癌症诊断的一个重要方法，可以通过检测血液或尿液中各肿瘤标志物指标的变化来判别是否有癌症风险。目前，如何便捷地通过测试液体活检样及早地诊断早期癌症和肿瘤便成为了癌症诊断的热点领域。癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(C－19)、神经元烯醇化酶(NSE)、糖类抗原19(CA19-9)、糖类抗原125(CA125)、鳞状细胞癌抗原(SCCAg)、甲胎蛋白(AFP)、前列腺特异抗原(PSA)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)等是目前临床上较常用的肿瘤标志物，但是这些标志物在癌症的早期诊断中的价值目前尚无定论(杨德昌等，2001；车国卫等，2003)。SCNH2是Apelin家族的一个成员，但是其信号通路与Apelin家族的其它已知成员的信号通路完全不同。SCNH2是一个16个氨基酸的多肽生长因子，其氨基酸序列为L-V-Q-P-R-G-S-R-N-G-P-G-P-W-Q-G-NH2(Fang,et.al.,OJCD,2013(3):37-51)。在大多数的哺乳动物或有袋目哺乳动物体内，SCNH2是非常保守的一个序列，在低等的脊椎动物中消失了。SCNH2在17天的小鼠胚胎的未分化细胞核中是高表达，一旦细胞分化，例如成骨细胞中SCNH2的水平很高，但是分化后的骨细胞中SCNH2就消失了(Fang,et.al.,OJCD,2013(3):37-51)。另外，癌组织芯片免疫组织化学染色的结果显示，SCNH2在各种实体瘤中的表达水平显著高于其正常的组织，例如，和正常人相比，90.2％的乳腺癌、96.6％结直肠癌、87.5％的肺癌和75.6％的卵巢癌中SCNH2的水平显著增加。另外，癌症患者血浆中的SCNH2的含量也明显地高于正常人的含量(Fang,et.al.,OJCD,2013(3):37-51)。这些证据都表明SCNH2与癌症和胚胎发育有很强的关联，是一个非常好的与癌症关联的特异性生物标记。SCNH2不仅可以促进各种细胞包括不同来源的肿瘤细胞的分裂增殖，尤其在促进血管生成的能力比其同家族多肽生长因子Apelin-13高。在鸡胚绒毛膜血管再生的模型中，100匹克摩尔浓度(pM)的SCNH2与100纳摩尔浓度(nM)的血管内皮生长因子(VEGF)促进血管生成的能力相当，在1匹克摩尔浓度(pM)时，在体促进血管生成的能力显著高于VEGF的作用。甚至在0.1pM时，仍然具有很强的促血管生成的作用。SCNH2同时还可以显著地促进癌细胞的迁移和浸润。SCNH2的促细胞增殖、血管生成、癌细胞迁移和浸润的作用几乎完全可以被抗SCNH2的抗体抑制(Fang,et.al.,OJCD,2013(3):37-51)。以上证据证明，极微量的SCNH2如0.1pM就可以起到其它生长因子如VEGF、Apelin-13很高剂量如1,000倍剂量100nM的生物功效，而且其在各种实体瘤中的表达水平急剧升高(Fang,et.al.,OJCD,2013(3):37-51)，因此，测定血液中的SCNH2的水平对于癌症的预警筛查、早期筛查、检测诊断、化疗效果检测、手术切除癌症的彻底性检测和肿瘤的复发监控等将具有很好的临床意义。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供抗SCNH2的单克隆抗体。本专利技术提供的抗SCNH2的单克隆抗体由保藏号为CGMCCNo.11599的杂交瘤细胞株产生的。本专利技术的另一个目的是提供一株分泌抗SCNH2的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本专利技术提供的杂交瘤细胞株的名称为SCNH-MoAb，其分类命名为鼠杂交瘤细胞株，该细胞株于2015年11月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏号为CGMCCNo.11599。本专利技术还有一个目的是提供上述单克隆抗体或上述杂交瘤细胞株的新用途。本专利技术提供了上述单克隆抗体或上述杂交瘤细胞株在如下1)-6)中至少一种中的应用：1)检测或辅助检测待测样品中SCNH2含量；2)制备检测或辅助检测待测样品中SCNH2含量的试剂或试剂盒；3)筛查早期实体瘤和/或癌症；4)制备筛查早期实体瘤和/或癌症的产品；5)监测癌症治疗效果和/或监测癌症有无复发；6)制备监测癌症治疗效果和/或监测癌症有无复发的产品。上述应用中，所述癌症为结直肠癌、胃癌和/或胰腺癌。本专利技术的最后一个目的是提供一种检测或辅助待测样品中SCNH2含量的酶联免疫试本文档来自技高网...
【技术保护点】
抗SCNH2的单克隆抗体，由保藏号为CGMCC No.11599的杂交瘤细胞株产生的。
【技术特征摘要】
1.抗SCNH2的单克隆抗体，由保藏号为CGMCCNo.11599的杂交瘤细胞株产生
的。
2.一株分泌抗SCNH2的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其保藏号为CGMCC
No.11599。
3.权利要求1所述的单克隆抗体或权利要求2所述的杂交瘤细胞株在如下1)-6)
中至少一种中的应用：
1)检测或辅助检测待测样品中SCNH2含量；
2)制备检测或辅助检测待测样品中SCNH2含量的试剂或试剂盒；
3)筛查早期实体瘤和/或癌症；
4)制备筛查早期实体瘤和/或癌症的产品；
5)监测癌症治疗效果和/或监测癌症有无复发；
6)制备监测癌症治疗效果和/或监测癌症有无复发的产品。
4.根据权利要求4或5所述的应用，其特征在于：所述癌症为结直肠癌、胃癌
和/或胰腺癌。
5.一种检测或辅助待测样品中SCNH2含量的酶联免疫试剂盒，包括独立包装的
权利要求1所述的单克隆抗体、SCNH2多肽和酶标记的二抗。
6.根据权利要求所述的5所述的试剂盒，其特征在于：
所述试剂盒还包括记载所述单克隆抗体的工作浓度和...
【专利技术属性】
技术研发人员：方昌阁，
申请(专利权)人：美国爱普德诊断技术有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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