一种制备胰凝乳蛋白酶的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备胰凝乳蛋白酶的方法。本发明专利技术的技术方案是将动物胰脏经过绞碎，灵活运用胰酶水解、丙酮沉淀、磷酸缓冲液盐溶、硫酸铵盐析等现代蛋白纯化技术，制备胰凝乳蛋白酶。本发明专利技术操作简单、成本低，非常适用于规模化大生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体地说是灵活运用胰酶水解、丙酮沉淀、磷酸缓冲液盐溶、硫酸铵盐析等现代蛋白纯化技术，从合格的动物胰脏中制备胰凝乳蛋白酶的方法。
技术介绍
胰凝乳蛋白酶chymotrypsin，是一种典型的丝氨酸蛋白酶，脊椎动物的消化酶。EC 3.421.1。在胰脏中以酶前体物质胰凝乳蛋白酶原的形态生物合成，随胰液分泌出去。在小肠受到胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的一定的分解，转变成活性的胰凝乳蛋白酶。胰凝乳蛋白酶经济价值极高，在医药方面主要作为治疗药物:(1).用于创伤或手术后伤口愈合(2)抗炎及防止局部水肿、积血、扭伤血肿(3)乳房手术后浮肿、中耳炎、鼻炎等(4)本品对眼球睫状韧带有选择性松解作用，故可用于白内障摘除，使晶状体比较容易地移去。药用的胰凝乳蛋白酶主要从牛胰脏中提取，而本专利技术是灵活运用胰酶水解、丙酮沉淀、磷酸缓冲液盐溶、硫酸铵盐析等现代蛋白纯化技术，使用磷酸盐、丙酮、硫酸铵等价格便宜的辅料，制备胰凝乳蛋白酶，不仅在一定程度上降低了成本，且产品的收率也能达到20万单位/kg胰脏。
技术实现思路
本专利技术的目的是从合格的动物胰脏中提取胰凝乳蛋白酶。本专利本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备胰凝乳蛋白酶的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：（1） 水解：将新鲜或冷冻动物胰脏绞碎置于容器中，加入丙酮搅拌脱水，离心得沉淀物，加入水及胰酶搅拌溶解，用氢氧化钠溶液调至pH值，保温搅拌，再加入硅藻土充分搅拌，过滤；（2）沉淀：收集滤液，加入丙酮搅匀，静置，虹吸弃去上层丙酮清液，然后用丙酮洗涤沉淀物，过滤甩干，干燥；得胰凝乳蛋白酶粗品；（3）提纯：将粗品用磷酸缓冲液溶解，搅拌混合，静置，然后加入硅藻土拌匀，过滤；往滤液中加入硫酸铵，过滤后可得盐析物；将盐析物再溶于碳酸缓冲液，然后在搅拌下逐滴加入饱和硫酸铵溶液，静置，过滤；（4）滤取晶体并用水冲洗，冷冻干燥，即可得胰凝乳蛋白酶。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘乃山，赵叶华，刘翠珍，
申请(专利权)人：青岛康原药业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37