一种唾液保存液及其制备方法和用途技术

技术编号:12986362 阅读:84 留言:0更新日期:2016-03-04 13:01
本发明专利技术公开了一种唾液保存液及其制备方法和用途,所述唾液保存液包括如下组分和含量:氯化锂0.1-2mol/L,Tris-HCl1-50mmol/L,尿素0.1-2mol/L,SDS0.1-2%(w/v),EDTA1-10mmol/L,乙醇10-90%(v/v),体系pH范围在7-10之间。本发明专利技术的唾液保存液用于保存唾液,能够长期保持细胞中DNA的完整性,并且能够避免细菌等微生物的滋生。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学
,尤其涉及一种唾液保存液及其制备方法和用 途。
技术介绍
人体组织及体液中提取得到的核酸DNA样本在法医鉴定、疾病检测与治疗等领域 应用广泛。当前科研人员和临床医生主要用抗凝血提取DNA,然而抗凝血保存时间稍长后出 现凝集现象对提取过程造成不便。同时,通过采血提取DNA还有如下几点不便;(1)对采血 人员要求有专业的培训;(2)耗费人力,需要有人辅助完成;(3)部分人必理对抽血无法接 受,甚至出现晕血等状况;(4)通量低,无法大量随时随地采集样本。 近些年来,科研和医药领域逐渐采用唾液取样的方式获取个体的DNA,因为唾液里 有一些口腔上皮细胞和唾液腺来源的白细胞,送些细胞里面有DNA。唾液样本采集相对于血 液样本采集来讲,对个体无创伤且无痛、操作简便、便于大量采样。此外,室温条件下保存时 间较长的唾液样本仍然可W提取得到完整的基因组DNA。 唾液样本中含有大量人体分泌的体液,其中包含粘蛋白、球蛋白、消化酶和白蛋白 等物质,多种有机物的存在容易滋生大量的微生物,如何避免微生物的生长同时保证脱落 细胞中基因组DNA的完整,成为唾液保存液的关键作用所在。 公布号为CN102440234A的中国专利技术专利申请公开了一种人体唾液保存固定液及 其制备与应用,该唾液保存固定液W藏糖、Tris-HCl、氯化镇、异硫氯酸脈和水为主要成分, 可用于唾液保存。但是,由于含有藏糖成分,虽然可W很好的保持该唾液保存固定液的粘度 并维持细胞渗透压,但是容易引起细菌等微生物的滋生;氯化镇作为核酸酶的激活剂,容易 引起DNA的降解;异硫氯酸脈作为变性剂虽可W抑制核酸酶的活性,但是容易引起细胞的 破裂,使得DNA处于暴露状态,易于断裂。
技术实现思路
针对现有技术的不足,本专利技术提供一种唾液保存液及其制备方法和用途,所述唾 液保存液用于保存唾液,能够长期保持细胞中DNA的完整性,并且能够避免细菌等微生物 的滋生。 根据本专利技术的第一方面,本专利技术提供一种唾液保存液,其包括如下组分和含 量:氯化裡 0.l-2mol/L,Tris-HCll-50mmol/L,尿素 0.l-2mol/L,SDS0. 1-2 % (w/v), 邸TAl-lOmmol/L,己醇10-90% (v/v),体系抑范围在7-10之间。 其中,w/v表示质量体积分数,v/v表示体积分数。 在第一方面中,氯化裡W摩尔浓度计含量为0. 1-2111〇1/1,典型但非限定性的含量 例女Π0. 12mol/L、0. 15mol/L、0. 2mol/L、0. 3mol/L、0. 5mol/L、0. 8mol/L、l. 0mol/L、l. 2mol/ L、l. 5mol/L、l. 8mol/L、l. 9mol/L、0. 1-0. 5mol/L、0. 2-0. 8mol/L、0. 1-1. 2mol/L、0. 5-lmol/L、0.8-1. 5mol/L。 在第一方面中,Tris-HClw摩尔浓度计含量为l-50mmol/l,典型但非限定性的 含量例女口 2mmol/L、5mmol/L、8mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L、25mmol/L、32mmol/ L、38mmol/L、42mmol/L、48mmol/L、l-20mmol/L、2-30mmol/L、l-42mmol/L、2〇-35mmol/L、 l〇-45mmol/L。 在第一方面中,尿素W摩尔浓度计含量为0.l-2mol/l,典型但非限定性的含量例 女口 0. 12mol/L、0. 15mol/L、0. 2mol/L、0. 3mol/L、0. 5mol/L、0. 8mol/L、l. 0mol/L、l. 2mol/L、 1. 5mol/L、l. 8mol/L、l. 9mol/L、0. 1-0. 5mol/L、0. 2-0. 8mol/L、0. 1-1. 2mol/L、0. 5-lmol/L、 0. 8-1. 5mol/L〇 在第一方面中,SDS(十二烷基硫酸钢)W质量体积分数计含量为0. 1-2%,典型 但非限定性的含量例如 0. 12%、0. 15%、0. 2%、0. 3%、0. 5%、0. 8%、1. 0%、1. 2%、1. 5%、 1. 8%、1. 9%、0. 1-0. 5%、0. 2-0. 8%、0. 1-1. 2%、0. 5-1%、0. 8-1. 5%。 在第一方面中,邸TA(己二胺四己酸)W摩尔浓度计含量为1-lOmmol/L,典型但 非限定性的含量例如 1. 2mmol/L、1. 5mmol/L> 1. 8mmol/L>2. 2mmol/L>3mmol/L>3. 8mmo1 / L、4. 5mmol/L、5mmol/L、7mmol/L、8mmol/L、8. 8mmol/L、9. 2mmol/L、l-8mmol/L、l-6mmol/L、 l-5mmol/L。 在第一方面中,己醇W体积分数计含量为10-90%,典型但非限定性的含量例如 10%、12%、15%、18%、20%、25%、35%、40%、50%、58%、62%、70%、78%、85%、88%、 10-60 %、20-50 %、20-80 %、30-85 %。 在第一方面中,体系pH范围在7-10之间,典型但非限定性的pH值例如7. 2、7. 5、 7. 8、8. 2、8. 5、9. 0、9. 4、9. 5、9. 8、7-9、7-8. 5、7-8、7. 5-8. 5。 作为优选方案,第一方面的唾液保存液包括如下组分和含量;氯化裡0. 1-1. 2mol/ L,Tris-HCll-42mmol/L,尿素 0. 1-1. 2mol/L,SDS0. 1-1. 2 % (w/v),邸TAl-6mmol/L,己醇 10-60% (v/v),体系抑范围在7-8. 5之间。 作为进一步优选方案,第一方面的唾液保存液包括如下组分和含量;氯化裡 0. 5-lmol/L,Tris-肥 12〇-35mmol/L,尿素 0. 5-lmol/L,SDS0. 5-1 % (w/v),邸TAl-5mmol/L, 己醇20-50% (v/v),体系抑范围在7-8之间。 作为最优选方案,第一方面的唾液保存液包括如下组分和含量;氯化裡0. 67mol/ L,Tris-HC133mmol/L,尿素 0. 67mol/L,SDS0. 6% (w/v),邸TA3. 3mmol/L,己醇 30% (v/v), 体系抑范围在7-8之间。 在第一方面中,所述唾液保存液的溶剂为无菌水。一般而言,所述唾液保存液由氯 化裡、Tris-HCl、尿素、SDS、邸TA、己醇和无菌水组成,不再包含其它组分,因此本专利技术中"包 括"也可W替换为"由……组成"的表达方式。但是,为了其它特定目的,本专利技术的唾液保存 液还可W包括苯扎氯倭和/或苯甲醇,其中苯扎氯倭是常用的医用杀毒剂,常用于伤口消 毒中,加入苯扎氯倭能够进一步抑制细菌等微生物滋生。 作为优选方案,所述唾液保存液包含苯扎氯倭0. 01-5% (w/v),苯甲醇10% -90% (v/v) 〇 在第一方面的唾液保存液中,尿素、己醇和SDS作为变性剂,可W将唾液中本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种唾液保存液,其特征在于,包括如下组分和含量:氯化锂0.1‑2mol/L,Tris‑HCl 1‑50mmol/L,尿素0.1‑2mol/L,SDS 0.1‑2%(w/v),EDTA 1‑10mmol/L,乙醇10‑90%(v/v),体系pH范围在7‑10之间。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:耿春雨李巧玲韩鸿雁叶睿蒋慧章文蔚
申请(专利权)人:深圳华大基因股份有限公司
类型:发明
国别省市:广东;44

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