本发明专利技术涉及微小核苷酸has-miR939在高血压诊断中的应用。本发明专利技术优点在于：本发明专利技术收集高血压前期，高血压患者和正常人的血浆对全基因组miR表达谱进行研究。研究结果揭示了一系列miRs与高血压前期和高血压相关，这些差异表达的miRs有助于阐释高血压发病的分子机制；为高血压前期和高血压的进展评估提供分子标记物；为有效控制血压，治疗高血压前期和高血压提供全新的治疗靶点，同时采用单一miR或结合多个miRs的拮抗剂、模拟剂，为高血压前期和高血压的治疗提供全新的手段。
【技术实现步骤摘要】
微小核苷酸has-miR939在高血压诊断中的应用 本申请是申请日2013年11月26日，申请号201310605650. 4,专利技术创造名称为微 小核苷酸在高血压诊断和制备降血压药物中的应用的分案申请。
本专利技术涉及微小核苷酸新用途，具体地说，是微小核苷酸（microRNA)has_miR939 在高血压诊断中的应用。
技术介绍
高血压（hypertension)是一种常见的以动脉血压持续升高为主要表现的慢 性疾病，指在静息状态下动脉收缩压>HOmmHg和/或舒张压> 90mmHg。而收缩压在 120-139mmHg和/或舒张压在80-89mmHg之间称为高血压前期或正常高值。 高血压是心脑血管病最主要的危险因素，其脑卒中、心肌梗死、心力衰竭及慢性肾 脏病等主要并发症，不仅致残、致死率高，而且严重消耗医疗和社会资源，给家庭和国家造 成沉重负担。大量长期的临床观察表明高血压前期也是心脑血管疾病和肾病的独立危险因 素。我国人群50年来高血压患病率的明显上升趋势。根据2002年调查数据，我国18岁以 上成人高血压患病率为18. 8%，估计目前我国约有2亿高血压患者，每10个成年人中就有2 人患有高血压，约占全球高血压总人数的1/5。高血压前期在我国的发病率约为44%-60%， 以中青年为主；其中45%的高血压前期在十年内发展为高血压，是我国高血压患者的后备 军。国内外的实践证明，高血压是可以预防和控制的疾病，降低高血压患者的血压水平，可 明显减少脑卒中及心脏病事件，显著改善患者的生存质量，有效降低疾病负担。 微小核苷酸（microRNA，miR)通常由15-22个核苷酸组成，是一类短链的，保守的 非编码RNAs。miR对基因表达具有重要的调控功能，主要通过降解目标mRNA或抑制其翻译 而达到抑制基因转录后表达的效应。miR介导的基因表达调控特点是一个miR通常有多个 靶基因，涉及多个信号通路；而一个基因可同时受到多个miR的调控，因此miR相关的基因 表达调控具有网络状及相关对话的特点。miR的生物学效应涉及广泛的生物学过程，包括 细胞增殖、分化、生长、凋亡等。miRNAs表达异常涉及多种病理生理状态的发生机制，包括 器官发育、衰老、肿瘤、心脏疾病、神经退行性病变等。因此，miRs是理解疾病发生发展的重 要分子生物学环节，同时亦是相关疾病治疗的重要靶点。基于miRs的治疗模式主要包括两 方面的途径：miR拮抗剂（miRantagonists)或抑制剂（microRNAinhibitors)和miR模 拟剂（microRNAmimics)。miR拮抗剂主要用于抑制在疾病状态下内源性miRs表达或功能 的上调，而miR模拟剂主要是用来恢复疾病过程中内源性miRs表达或功能的下调。通过对 miR的调节，可对其调控的一系列靶基因的表达进行协同有效的调节，从而起到对疾病的干 预效应。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供微小核苷酸has-miR939在制备诊 断高血压的医疗器械中的应用。 本专利技术的第二个目的是，提供微小核苷酸has_miR939在制备评估高血压的疾病 进展的医疗器械中的应用。 本专利技术的第三个目的是，提供微小核苷酸has-miR939作为靶点在筛选降血压及 靶器官保护的药物中的应用。 为实现上述第一个目的，本专利技术采取的技术方案是：微小核苷酸has_miR939在制 备诊断高血压的医疗器械中的应用，所述的诊断高血压的医疗器械以微小核苷酸作为诊断 分子标记物。 为实现上述第二个目的，本专利技术采取的技术方案是：微小核苷酸has-miR939在制 备评估高血压的疾病进展的医疗器械中的应用，所述的医疗器械以微小核苷酸作为诊断分 子标记物。 为实现上述第三个目的，本专利技术采取的技术方案是：微小核苷酸has-miR939作为 靶点在筛选降血压及靶器官保护的药物中的应用。 本专利技术优点在于： 本专利技术收集高血压前期，高血压患者和正常人的血浆对全基因组HIiR表达谱进行研 究。研究结果揭示了一系列miRs与高血压前期和高血压相关，这些差异表达的miRs有助 于阐释高血压发病的分子机制；为高血压前期和高血压的进展评估提供分子标记物；为有 效控制血压，治疗高血压前期和高血压提供全新的治疗靶点，同时采用单一miR或结合多 个miRs的拮抗剂、模拟剂，为高血压前期和高血压的治疗提供全新的手段。 【附图说明】 图1.在正常vs高血压前期，正常vs高血压和高血压前期vs高血压两两比较分 析中具有显著差异(/?〈〇. 05)的miRs进行交集。 图2.在正常vs高血压前期，正常vs高血压和高血压前期vs高血压两两比较分 析中表达差异倍数大于2的miRs进行交集。 【具体实施方式】 下面结合附图对本专利技术提供的【具体实施方式】作详细说明。 实施例1 在本实施方案中，本专利技术主要通过miR表达谱芯片的研究手段，探讨并明确了高血压 前期及高血压形成过程中差异表达的miRs。这一研究首次揭示高血压前期及高血压相关 的表达变化的miRs，不仅有助于更加全面地阐明高血压发病的分子机制，同时为高血压疾 病进展的评估提供了一系列全新的分子标志物，并提供了一系列全新的基于miR的治疗靶 点，为基于miR的降低血压及高血压病靶器官保护的治疗手段的研发奠定了良好的基础。 -、方法 1.临床研究样本收集 用于本专利技术的样本全部来自本院，并且所有研究对象都认真阅读并签署知情同意书， 符合伦理学标准。研究对象均为男性，年龄在36-50岁之间。在不使用药物的情况下，使 用水银血压计对研究对象动脉血压进行测量，并重复三次。收缩压< 120mmHg和舒张压 < 90mmHg纳入正常对照组；收缩压彡HOmmHg和/或舒张压彡90mmHg的研究对象纳入高 血压组；而使用24小时动态血压计监测全天平均收缩压在120-139mmHg和/或舒张压在 80-89mmHg的研究对象纳入高血压前期组。所有研究对象通过进行心电图和其他生化指标 检测排除患有心脏病，肾病和糖尿病，同时使用EDTA抗凝采血管收集2ml血液。收集的血 样离心（3000转/分）10分钟，取上层血浆用于本研究。 2.血浆miR表达谱芯片 米用mirVana?miRNAIsolationKit(Cat#AM1561,Ambion，Austin,TX，US)并 且根据生产厂商提供的标准操作流程进行血浆样品的totalRNA抽提，抽提所得total RNA经AgilentBioanalyzer2100(Agilenttechnologies,SantaClara,CA,US) 电泳质检合格后备用。实验样品RNA采用AgilentmiRNA芯片配套的试剂盒，miRNA CompleteLabelingandHybKit(Cat#519〇-〇456,Agilenttechnologies,Santa Clara,CA,US)，按照标准操作流程的标记部分对样品中的miRNA分子进行荧光标记， 用于AgilenthumanmiRNAmicroarray进行全基因组miR表达谱分析。芯片试验按本文档来自技高网...
【技术保护点】
微小核苷酸has‑miR939在制备诊断高血压的医疗器械中的应用，所述的诊断高血压的医疗器械以微小核苷酸作为诊断分子标记物。
【技术特征摘要】
1. 微小核苷酸has-miR939在制备诊断高血压的医疗器械中的应用，所述的诊断高血 压的医疗器械以微小核苷酸作为诊断分子标记物。2. 微小核苷酸has-miR939在制...
【专利技术属性】
技术研发人员：张腾，陈瑜，贾成林，杨琴波，王培伟，李黎，崔金刚，杜宵烨，宁冰冰，刘丽，
申请(专利权)人：上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院，
类型：发明
国别省市：上海;31
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