用于同时检测沙门菌枸橼菌变形菌和爱德华菌的多重PCR引物及其设计方法技术

用于同时检测沙门菌枸橼菌变形菌和爱德华菌的多重PCR引物及其设计方法，涉及沙门氏菌等的检测。沙门氏菌引物对应的PCR扩增片段为526bp，弗氏枸橼酸杆菌引物对应的PCR扩增片段为161bp，奇异变形杆菌引物对应的PCR扩增片段为396bp，迟缓爱德华菌引物对应的PCR扩增片段为330bp。1设计多重PCR引物组合；2对引物组合中的引物进行筛选，保留不能合成引物二聚体的引物；3判断所保留引物的竞争优劣状态，将步骤2保留不能合成引物二聚体的引物的GC%和碱基数进行比较，选取GC含量高的判断为竞争状态优势引物，转步骤5；否则转步骤4；4再次筛选竞争状态劣的引物；5对竞争状态优引物扩增。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及沙门氏菌、弗氏枸橼酸杆菌、奇异变形杆菌和迟缓爱德华菌的检测，尤其是涉及一种用于同时检测沙门氏菌、弗氏枸橼酸杆菌、奇异变形杆菌和迟缓爱德华菌的多重PCR引物及其设计方法。
技术介绍
沙门氏菌、弗氏枸橼酸杆菌、奇异变形杆菌、迟缓爱德华菌均属于肠杆菌科，可通过食物、伤口传播。除了引起食物中毒还能引起人和动物机体的多系统感染。沙门氏菌为肠杆菌 科细菌较早的成员，具有呼吸和发酵两种代谢类型，存在于温血及冷血动物体内、食物和环境中，是一种常见的病原菌，可以引起伤寒、肠伤寒、胃肠炎和败血症等相关疾病。沙门菌的血清型很多，给鉴定带来很大困难。沙门菌在自然界分布比较广泛，在外界环境中能生存较久，在水和土壤中能生存数周到数月，在冰库中甚至能存活半年以上。近年来，由于抗生素的滥用，该菌对氯霉素的耐药菌株明显增多，有的菌株对庆大霉素、卡那霉素、氨苄青霉素等也耐药，这使得食品安全中对该菌的检测投入了大量的人力物力。弗氏枸橼酸杆菌，也被称为弗氏朽1檬酸杆菌。曾被归于埃希菌属。朽1檬酸杆菌属的细菌，具有如肠杆菌科的菌体、表面和鞭毛的相应抗原，有研究表明，朽1檬酸杆菌中许多血清型的抗原与沙门菌属和埃本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于同时检测沙门氏菌、弗氏枸橼酸杆菌、奇异变形杆菌和迟缓爱德华菌的多重PCR引物，其特征在于为：S.spp.F1：5’?GCCGGTAAACTACACGATGA?3’；S.spp.R1：5’?GAGTTACTGAACCAACAGCT?3’；C.freu.F1：5’?AACATAGCGATGGACAACTGA?3’；C.freu.R1：5’?TTAGCAAAAATTTAAGCCGGT?3’；P.mira.F1：5’?TTTATCAATAGCCTCAAACCCT?3’；P.mira.R1：5’?TGCGTCACCCTCTAACTCATCC?3’；E.tarda.F1：5’?CTGGGCAAGTAT...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈琼，孔繁德，徐淑菲，赵冉，周昱，杨涛，陈永锋，连玉华，
申请(专利权)人：厦门市农产品质量安全检验测试中心，厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：