与GLP-2受体特异性结合的药物融合体制造技术

本发明专利技术公开了一类结合GLP-2R短肽的药物融合体，还公开了该类药物融合体的制备方法及利用该药物融合体治疗炎性肠道疾病、克罗恩病及短肠综合症的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程领域，涉及一类与GLP-2受体结合的特异性药物融合体及其应用。主要涉及通过基因工程手段将具有活性的、能与GLP-2受体有效结合的多肽片段(幻 通过连接链与由(X)n镜像氨基酸序列组成的多肽片段(X’)n连接在一起，在连接链处有聚合物、脂肪酸和糖修饰任一种修饰。所形成的药物融合体包含2段反向重复的多肽片段序列(幻 与(X’)n。本专利技术还涵盖了该多肽及其修饰产物在治疗炎性肠道疾病、克罗恩病及短肠综合症中的应用。
技术介绍
肠胃道是消化、吸收营养的主要场所，当机体的肠胃道遭到破坏时，肠胃道对营养物质的消化和吸收能力下降。很多生长因子如表皮生长因子、转化生长因子、胰岛素样生长因子-I都参与肠上皮生长的调控，能再生、修复损伤的肠粘膜。但缺乏特异性，常常伴随机·体的不良反应。近年来研究发现，类胰高糖素肽-2 (Glucagon-like peptide-2, GLP-2)通过与其受体(胰高糖素样肽-2受体,Glucagon-like peptide-2 receptor, GLP-2R)结合，可有效减少胃排空和分泌，并调节小肠内膜细胞的生长、增殖和修复，抑制其凋亡。该药增加了这些细胞的数量，后者可增加小肠吸收、减少腹泻。因此补充足够的GLP-2成为炎性肠道疾病、克罗恩病及短肠综合症治疗的关键(Estall et al. , Current PharmaceuticalDesigns, 2006, V12:1731-1750. )0目前基于该机理开发的用于糖尿病治疗的多肽主要基于内源性GLP-2(胰高糖素样肽-2)改造的多肽-替度鲁肽(Teduglutide)。为降低二肽基肽酶对上述多肽的酶切，该肽将GLP-2的N端第二位的丙氨酸突变为甘氨酸。但这类多肽分子量比较小，因此应用于临床时患者治疗的依从性不佳。为延长该类小肽的半衰期，一般通用的做法是将该类活性多肽进行聚合物的化学修饰、微球包埋或蛋白融合(包括Fe融合和人血白蛋白融合)。但上述的几种常规解决手段存在下述潜在问题(I) PEG修饰的长效化制剂，其聚合物直接修饰在GLP-2或其类似物的尾部。由于聚合物和GLP-2或其类似物相比，其分子体积较大，存在的空间位阻效应会影响GLP-2与其受体(GLP-2R)的有效结合，造成体内生物学活性显著下降；(2)Fc融合多肽后其半衰期的延长并不如所预期的那样显著(US Pat.No. 6，756，480，引入这里作为参考)；(3)其它形式如人血白蛋白融合或微球包埋在患者体内有引发免疫原性降低治疗效果的风险。尽管替度鲁肽已经在美国处于注册的状态，但患者在需要每天用药一次，患者的依从性不佳。目前未有长效的、高活性的GLP-2受体激动剂。因此，在炎性肠道疾病及相关领域中，存在进一步改良GLP-2受体激动剂的极大的、迫切的需要，以在临床上发挥更佳的治疗效果。
技术实现思路
针对上述不足，本专利技术提供了下述构型的化合物权利要求1.具有下式的与GLP-2受体特异性结合的药物融合体2.根据权利要求I所述的药物融合体，其结构特征在于所述药物融合体中包含2段反向重复的多肽序列(互为镜像的(幻 与(X’)n)，所述的2段重复序列((幻 与(X’)n)通过连接链Y连接在一起；在连接链的部位有聚合物、脂肪酸或糖其中任一种修饰；X与Y间和X’与Y间不存在或有1-20个氨基酸残基间隔。3.根据权利要求I和权力要求2所述，η是2。4.根据权利要求I和权力要求2所述，η是I。5.根据权利要求1-4所述，药物融合体中连接链Y包含一个可发生化学修饰的氨基酸位点。6.根据权利要求1-4所述，药物融合体中X选自 在SEQ ID No: I、No: 2给出的序列; (a)的氨基酸序列中，具有在一个或多个位置的氨基酸被丝氨酸替换； Ca)的氨基酸序列中，具有在一个或多个位置的氨基酸被甘氨酸替换； Ca)的氨基酸序列中，具有在一个或多个位置的氨基酸被丙氨酸替换。7.根据权利要求1-5项所述的药物融合体中，连接链Y长度为3-20个氨基酸，所述连接链包括但不限于SEQ ID N0:3、SEQ ID NO :4给出的氨基酸序列。8.任一项在前权利要求所述，制备的药物融合体中X片段的N端和X’片段的C端为组氨酸。9.根据权利要求5所述修饰，可发生化学修饰的氨基酸位点为半胱氨酸。10.任一项在前权利要求所述，药物融合体的化学修饰，包括但不限于脂肪酸修饰、聚乙二醇修饰、包含乙氧基重复结构的嵌段共聚物修饰、糖修饰任一种。11.根据权利要求10所述修饰，是通过Z末端的化学反应基团和连接链Y上游离的半胱氨酸反应进行修饰，制备药物融合体。12.根据权利要求10所述修饰制备的药物融合体中Z为脂肪酸，所述脂肪酸的碳链长度为5-30个。13.根据权利要求10所述修饰制备的药物融合体中Z为聚乙二醇，所述聚乙二醇的分子量范围为5000-40000道尔顿之间。14.根据权利要求10所述修饰制备的药物融合体中Z为包含乙氧基重复结构的嵌段共聚物，所述的包含乙氧基重复结构的嵌段共聚物的分子量范围为5000-40000道尔顿之间。15.根据权力要求13所述的药物融合体，聚乙二醇包括线性的聚乙二醇和分枝型聚乙二醇。16.任一项在前权利要求所述的药物融合体的X片段，选自GLP-2(1-33)或其类似物。17.—种编码权利要求1-9、权利要求16任一项的多肽的核苷酸序列。18.—种包含权利要求17的表达载体的宿主细胞。19.权利要求18的宿主细胞为真核细胞。20.权利要求18的宿主细胞为原核细胞。21.任一项在前权利要求所述的药物融合体在治疗炎性肠道疾病的应用。22.任一项在前权利要求所述的药物融合体在治疗克罗恩(Chron’s)疾病的应用。23.任一项在前权利要求所述的药物融合体在治疗短肠综合症的应用。全文摘要本专利技术公开了一类结合GLP-2R短肽的药物融合体，还公开了该类药物融合体的制备方法及利用该药物融合体治疗炎性肠道疾病、克罗恩病及短肠综合症的方法。文档编号A61P29/00GK102949731SQ20111040447公开日2013年3月6日 申请日期2011年12月8日 优先权日2011年9月16日专利技术者于鹏展 申请人:西藏海思科药业集团股份有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有下式的与GLP?2受体特异性结合的药物融合体：X是能结合胰高糖素样肽?2受体（Glucagon?like?peptide?2?receptor,?GLP?2R）的多肽片段；Y是连接链；X’是X的镜像多肽片段；Z是聚合物、脂肪酸或糖类中的一种；b不存在，或是独立的、包括1?20个氨基酸残基的多肽片段；n=1?8。548502dest_path_image001.jpg

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：于鹏展，
申请(专利权)人：西藏海思科药业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：