【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及新型酰基转移酶基因及其利用。本专利技术的酰基转移酶基因也可以是甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)基因及/或甘油磷酸O-酰基转移酶(GNPAT)基因。
技术介绍
脂肪酸是构成磷脂、三酰甘油等脂质的重要成分。含有2个以上不饱和键的脂肪酸总称为多不饱和脂肪酸(PUFA)。作为具体例子，已知有花生四烯酸、二高-Y-亚麻酸、 二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸等，已报道了各种生理活性(非专利文献I)。该多不饱 和脂肪酸中，有一些种类是动物不能在体内合成的。因此，对于此种多不饱和脂肪酸，作为必需脂肪酸必须从食物中摄取。在动物体内，多不饱和脂肪酸存在于多种多样的脏器和组织中。例如，花生四烯酸是从提取自动物的肾上腺或肝脏的脂质中分离的。但是，在动物脏器中只含有少量的多不饱和脂肪酸，因此仅靠从动物脏器提取·分离的多不饱和脂肪酸，无法得到足够的供给量。为此，开发出了培养各种微生物来获得多不饱和脂肪酸的方法。其中，被孢霉属 (Mortierella)微生物是众所周知的有效地生产含有花生四烯酸等多不饱和脂肪酸的脂质的微生物。而且，还进行了利用植物来生产多不饱和脂肪酸的尝试。已知多不饱和脂肪酸构成三酰甘油等储存脂质，蓄积在微生物的菌体内或植物种子中。作为储存脂质的三酰甘油在生物体内如下生成。通过甘油-3-磷酸酰基转移酶向甘油-3-磷酸转移酰基而生成溶血磷脂酸。而后，通过溶血磷脂酸酰基转移酶向溶血磷脂酸转移酰基而生成磷脂酸。而后，磷脂酸通过磷脂酸磷酸酶脱磷酸化而生成二酰甘油。最后，通过二酰甘油酰基转移酶向二酰甘油中转移酰基而生成三酰甘油。上述三酰甘油生物合成途径、磷脂生物...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.02.03 JP 2010-0221251.一种核酸，其特征在于，为以下(a) (g)中任一项所述的核酸(a)核酸，其包含编码由序列号2、序列号5或序列号9表示的氨基酸序列中I或多个氨基酸发生缺失、取代或附加的氨基酸序列组成，且具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/ 或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的碱基序列；(b)核酸，其包含与由序列号I、序列号4或序列号8组成的碱基序列的互补碱基序列所组成的核酸在严谨条件下杂交，且编码具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的碱基序列；(c)核酸，其包含与由序列号I、序列号4或序列号8组成的碱基序列的同一性为70% 以上的碱基序列所组成，且编码具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的喊基序列；(d)核酸，其包含编码与由序列号2、序列号5或序列号9组成的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列所组成，且具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的喊基序列；(e)核酸，其包含与编码由序列号2、序列号5或序列号9表示的氨基酸序列组成的蛋白质的碱基序列的互补碱基序列所组成的核酸在严谨条件下杂交，且编码具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的碱基序列；(f)核酸，其包含与由序列号7或序列号12组成的碱基序列的互补碱基序列所组成的核酸在严谨条件下杂交，且具有编码具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的外显子的碱基序列；(g)核酸，其包含与由序列号7或序列号12组成的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列所组成，且具有编码具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的外显子的碱基序列。2.根据权利要求I中所述的核酸，其特征在于，为以下(a) (g)中任一项所述的核酸(a)核酸，其包含编码由序列号2、序列号5或序列号9表示的氨基酸序列中I 80个氨基酸发生缺失、取代或附加的氨基酸序列组成，且具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/ 或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的碱基序列；(b)核酸，其包含与由序列号I、序列号4或序列号8组成的碱基序列的互补碱基序列所组成的核酸在2 X SSC、50°C的条件下杂交，且编码具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/ 或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的碱基序列；(c)核酸，其包含与由序列号I、序列号4或序列号8组成的碱基序列的同一性为90% 以上的碱基序列所组成，且编码具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的喊基序列；(d)核酸，其包含编码与由序列号2、序列号5或序列号9组成的氨基酸序列的同一性为90%以上的氨基酸序列所组成，且具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的喊基序列；(e)核酸，其包含与编码由序列号2、序列号5或序列号9表示的氨基酸序列组成的蛋白质的碱基序列的互补碱基序列所组成的核酸在2XSSC、50°C的条件下杂交，且编码具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的碱基序列；(f)核酸，其包含与由序列号7或序列号12组成的碱基序列的互补碱基序列所组成的核酸在2 X SSC, 500C的条件下杂交，且具有编码具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的外显子的碱基序列；(g)核酸，其包含与由序列号7或序列号12组成的碱基序列的同一性为90%以上的碱基序列所组成，且具有编码具有甘油-3-磷酸酰基转移酶活性及/或甘油磷酸酰基转移酶活性的蛋白质的外显子的碱基序列。3.—种核酸，其特征在于，为以下(a) (d)中任一项所述的核酸(a)核酸，其包含序列号I、序列号4或序列号8表示的碱基序列或其部分序列；(b)核酸，其包含编码由序列号2、序列号5或序列号9表示的氨基酸序列组成的蛋白质的碱基序列或其部分序列；(c)核酸，其包含序列号3、序列号6或序列号11表示的碱基序列或其部分序列；(d)核酸，其包含序列号7或序列号12表示的碱基序列或其部分序列。4.一种核酸，其特征在于，为以下(a) (g)中任一项所述的核酸(a)核酸，其包含编码由序列号2、序列号5或序列号9表示的氨基酸序列中I或多个氨基酸发生缺失、取代或附加的氨基酸序列所组成，且具有以下i) V)中任一种活性的蛋白质的喊基序列i)与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸组成相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸组成可形成棕榈酸的比率高、棕榈油酸的比率低的脂肪酸组成的活性； )与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸含有率相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸含有率实现高含有率的活性；iii)与未表达所述蛋白质的宿主的三酰甘油即TG量相比，表达所述蛋白质的酵母的 TG量实现高TG量的活性；iv)与酿酒酵母的甘油-3-磷酸酰基转移酶缺陷即“GPAT缺陷”互补的活性；v)可使通过含有编码所述蛋白质的核酸的重组载体转化的宿主中的花生四烯酸生产量比未用所述载体转化的宿主中的生产量提高了的活性。(b)核酸，其包含与由序列号I、序列号4或序列号8组成的碱基序列的互补碱基序列所组成的核酸在严谨条件下杂交，且编码具有以下i) V)中任一种活性的蛋白质的碱基序列i)与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸组成相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸组成可形成棕榈酸的比率高、棕榈油酸的比率低的脂肪酸组成的活性； )与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸含有率相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸含有率实现高含有率的活性；iii)与未表达所述蛋白质的宿主的三酰甘油即TG量相比，表达所述蛋白质的酵母的 TG量实现高TG量的活性；iv)与酿酒酵母的GPAT缺陷互补的活性；v)可使通过含有编码所述蛋白质的核酸的重组载体转化的宿主中的花生四烯酸生产量比未用所述载体转化的宿主中的生产量提高了的活性。(c)核酸，其包含与由序列号I、序列号4或序列号8组成的碱基序列的同一性为70% 以上的碱基序列所组成，且编码具有以下i) V)中任一种活性的蛋白质的碱基序列i)与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸组成相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸组成可形成棕榈酸的比率高、棕榈油酸的比率低的脂肪酸组成的活性；ii)与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸含有率相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸含有率实现高含有率的活性；iii)与未表达所述蛋白质的宿主的三酰甘油即TG量相比，表达所述蛋白质的酵母的 TG量实现高TG量的活性；iv)与酿酒酵母的GPAT缺陷互补的活性；v)可使通过含有编码所述蛋白质的核酸的重组载体转化的宿主中的花生四烯酸生产量比未用所述载体转化的宿主中的生产量提高了的活性。(d)核酸，其包含编码与由序列号2、序列号5或序列号9组成的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列所组成，且具有以下i) V)中任一种活性的蛋白质的碱基序列i)与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸组成相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸组成可形成棕榈酸的比率高、棕榈油酸的比率低的脂肪酸组成的活性； )与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸含有率相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸含有率实现高含有率的活性；iii)与未表达所述蛋白质的宿主的三酰甘油即TG量相比，表达所述蛋白质的酵母的 TG量实现高TG量的活性；iv)与酿酒酵母的GPAT缺陷互补的活性；v)可使通过含有编码所述蛋白质的核酸的重组载体转化的宿主中的花生四烯酸生产量比未用所述载体转化的宿主中的生产量提高了的活性。(e)核酸，其包含与编码由序列号2、序列号5或序列号9表示的氨基酸序列组成的蛋白质的碱基序列的互补碱基序列所组成的核酸在严谨条件下杂交，且编码具有以下i) V)中任一种活性的蛋白质的喊基序列i)与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸组成相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸组成可形成棕榈酸的比率高、棕榈油酸的比率低的脂肪酸组成的活性； )与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸含有率相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸含有率实现高含有率的活性；iii)与未表达所述蛋白质的宿主的三酰甘油即TG量相比，表达所述蛋白质的酵母的 TG量实现高TG量的活性；iv)与酿酒酵母的GPAT缺陷互补的活性；v)可使通过含有编码所述蛋白质的核酸的重组载体转化的宿主中的花生四烯酸生产量比未用所述载体转化的宿主中的生产量提高了的活性。(f)核酸，其包含与由序列号7或序列号12组成的碱基序列的互补碱基序列所组成的核酸在严谨条件下杂交，且具有编码具有以下i) V)中任一种活性的蛋白质的外显子的碱基序列i)与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸组成相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸组成可形成棕榈酸的比率高、棕榈油酸的比率低的脂肪酸组成的活性； )与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸含有率相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸含有率实现高含有率的活性；iii)与未表达所述蛋白质的宿主的三酰甘油即TG量相比，表达所述蛋白质的酵母的 TG量实现高TG量的活性；iv)与酿酒酵母的GPAT缺陷互补的活性；v)可使通过含有编码所述蛋白质的核酸的重组载体转化的宿主中的花生四烯酸生产量比未用所述载体转化的宿主中的生产量提高了的活性。(g)核酸，其包含与由序列号7或序列号12组成的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列所组成，且具有编码具有以下i) V)中任一种活性的蛋白质的外显子的碱基序列i)与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸组成相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸组成可形成棕榈酸的比率高、棕榈油酸的比率低的脂肪酸组成的活性； )与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸含有率相比，表达所述蛋白质的酵母的脂肪酸含有率实现高含有率的活性；iii)与未表达所述蛋白质的宿主的三酰甘油即TG量相比，表达所述蛋白质的酵母的 TG量实现高TG量的活性；iv)与酿酒酵母的GPAT缺陷互补的活性；v)可使通过含有编码所述蛋白质的核酸的重组载体转化的宿主中的花生四烯酸生产量比未用所述载体转化的宿主中的生产量提高了的活性。5.根据权利要求4中所述的核酸，其特征在于，为以下(a) (g)中任一项所述的核酸(a)核酸，其包含具有编码由序列号2、序列号5或序列号9表示的氨基酸序列中I 80个氨基酸发生缺失、取代或附加的氨基酸序列组成，且具有以下i) V)中任一种活性的蛋白质的外显子的喊基序列i)与未表达所述蛋白质的宿主的脂肪酸组成相比，表达所述蛋白质的...
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