本发明专利技术涉及一种黑果枸杞中硬质酰基甘油的制备方法，该方法包括以下步骤：⑴微孔树脂除杂：将黑果枸杞醇提物用乙醇溶液溶解后上微孔树脂柱分离，并进行台阶梯度洗脱，洗脱物经减压干燥，即得硬脂酰基甘油粗品；⑵硅胶柱层析分离：将硬脂酰基甘油粗品经硅胶柱色谱分离、洗脱后收集馏分，采用薄层色谱检测收集Rf值为0.1~0.2的馏分，该馏分经减压干燥，即得呈无色油状的纯度大于95%的1-[(12E,16E)-12, 16-二十碳二烯酰基]-2-[(E,E)-7, 11-十八碳二烯酰基]-3-硬脂酰基甘油。本发明专利技术工艺简单、回收率高，所获得的1-[(12E,16E)-12,16-二十碳二烯酰基]-2-[(E,E)-7,11-十八碳二烯酰基]-3-硬脂酰基甘油具有很好的降血脂的作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种硬质酰基甘油的制备方法，尤其涉及一种黑果枸杞中硬质酰基甘 油的制备方法及其应用。
技术介绍
黑果枸杞rwiAeflica? Murr.)系前科（Solanaceae)枸杞属L.) 植物，主要分布于青藏高原柴达木盆地，据《晶珠本草》、《四部医典》及《维吾尔药志》记载： 藏医以其成熟的果实入药，治疗心热病、心脏病、尿道结石、癣疥、齿龈出血，民间作滋补强 壮及降压药。现代研宄表明黑果枸杞中的化学成分主要包括花色苷类及脂肪烃类、花色苷 类化合物以其显著的抗氧化活性被人熟知，然而医药经典中有关该药材的记载的主要药理 活性(降压活性）的相关化合物还未发现。 目前，从黑果枸杞中制备脂肪烃类化合物的文献未见报道，中国专利 (CN101982192B、CN01912480B及101991709B)报道采用醇提取、膜处理、大孔树脂等过程富 集黑果枸杞中花色苷类组分，从黑果枸杞中获取规模化1--2--3-硬脂酰基甘油的制备研宄未见文献报 道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、易规模化的黑果枸杞中硬质酰 基甘油的制备方法。 本专利技术所要解决的另一个技术问题是提供该硬质酰基甘油的应用。 为解决上述问题，本专利技术所述的一种黑果枸杞中硬质酰基甘油的制备方法，包括 以下步骤： ⑴微孔树脂除杂： 将按常规方法制得的深蓝色浸膏状的黑果枸杞醇提物用其质量5~10倍的体积分数 50~70%乙醇溶液溶解，过滤得到滤液A，该滤液A上微孔树脂柱分离后依次用2~5倍柱体积 的85%~95%乙醇溶液、90%~100%的丙酮溶液进行台阶梯度洗脱，收集90%~100%的丙酮溶液 洗脱物，该90°/『100%的丙酮溶液洗脱物经减压干燥，即得呈深黄色油状的硬脂酰基甘油粗 品；所述黑果枸杞醇提物与所述微孔树脂比例为I g :30 mL ; ⑵硅胶柱层析分离： 将所述硬脂酰基甘油粗品经硅胶柱色谱分离后，用3~5倍柱体积的石油醚-乙酸乙酯 混合溶剂洗脱，并按每份500~1000 mL收集馏分，采用薄层色谱检测收集Rf值为0. 1~0. 2的 馏分，该馏分经减压干燥，即得呈无色油状的纯度大于95%的I--2__3_硬脂酰基甘油。 所述步骤⑴和所述步骤⑵中减压干燥条件是指真空度为0. 06~0. 09 MPa，温度为 50~70 °C〇 所述步骤⑵中石油醚-乙酸乙酯混合溶剂是指将石油醚、乙酸乙酯的按20 :1~18 : 3的体积比混合而得。 所述步骤⑵中硅胶柱的尺寸为50 mm ~200 mmX80 mm~200 mm。 所述步骤⑵中薄层色谱检测的条件是指展开剂为石油醚、乙酸乙酯的按19 :1的 体积比混合而成的混合溶剂，显色剂为体积浓度10%的浓硫酸乙醇溶液。 如上所述的一种黑果枸杞中硬质酰基甘油的制备方法制得的硬质酰基甘油在制 备降血脂药物或保健食品中的应用，其特征在于：该硬质酰基甘油作为有效成分按常规方 法与药学上可接受的任何载体制成各类降血脂药用制剂，或作为有效成分按常规方法与食 品科学上可接受的任何载体制成各类保健类食品。 本专利技术与现有技术相比具有以下优点： 1、本专利技术采用微孔树脂富集，可获取纯度约70%的硬脂酰基甘油粗品，且树脂柱可以 再生循环使用，平均价格低廉，易于规模化。 2、本专利技术采用硅胶柱层析分离，可分离到纯度为95%的1--2--3-硬脂酰基甘油。 3、本专利技术原料要求不高，一般野生或种植的黑果枸杞醇提物即可，易于批量备料。 4、本专利技术工艺简单、回收率高。 5、本专利技术所获得的 1--2--3-硬脂酰基甘油经测试，具有很好的降血脂的作用。 ⑴造模：采用高脂饲料喂养法复制高血脂症小鼠动物模型。也就是正常组用常规 饲料喂养，其他各组用高脂饲料喂养。所有小鼠均可自由摄食与饮水，于造模的第五周开 始，尾静脉取血，检测空腹小鼠血清中TC的浓度，并将空腹TC值大于7 mmol/L视为高血脂 症造模成功者。可以用于给药实验。 ⑵给药：Nm组和Md组小鼠灌胃给予蒸馏水(剂量：0. 4 mL/d)，Ps组小鼠给予辛伐 他汀（6. 7 mg/Kg/d)，CU C2、C3组给予实施例1~3中分离到的化合物（340 mg/Kg/d)。连 续灌胃给药4周，每周称量各组小鼠体重一次。给药结束后，使用生化试剂盒对各组小鼠的 血清指标TC、TG、LDL-C进行测定。 ⑶结论：高脂饲料喂养4周后，模型组小鼠的体重、血清中的TC含量显著性的高于 正常组（P〈0. 01或P〈0. 05)，这表明本次实验高脂造模方法切实可行；给药结束后，模型组 小鼠的体重、TC、TG及LDL-C均显著性高于正常组；与模型组小鼠相比，辛伐他汀阳性组、实 施例1~3组均能显著性地改善小鼠的血脂异常情况（P〈0. 05或P〈0. 01)。具体见表1。 表 1 【附图说明】 下面结合附图对本专利技术的【具体实施方式】作进一步详细的说明。 图 1 为本专利技术 1--2--3-硬脂酰基甘油的 1H NMR核磁图谱. 图2为本专利技术1--2--3-硬脂酰基甘油的13C NMR核磁图谱。【具体实施方式】 实施例1 一种黑果枸杞中硬质酰基甘油的制备方法，包括以下步骤： ⑴微孔树脂除杂： 将1000 g按常规方法制得的深蓝色浸膏状的黑果枸杞醇提物用其质量5倍的体积分 数50%乙醇溶液溶解，过滤得到滤液A，该滤液A上微孔树脂柱分离后依次用2倍柱体积 的95%乙醇溶液、2倍柱体积的100%的丙酮溶液进行台阶梯度洗脱，收集100%的丙酮溶 液洗脱物，该100%的丙酮溶液洗脱物经减压干燥，即得呈深黄色油状的硬脂酰基甘油粗品 266. 4 g〇 其中：黑果枸杞醇提物与微孔树脂比例为I g :30 mL。 减压干燥条件是指真空度为0. 09 MPa，温度为50 °C。 ⑵硅胶柱层析分离： 将硬脂酰基甘油粗品经硅胶柱色谱分离后，用8倍柱体积的石油醚-乙酸乙酯混合溶 剂洗脱，并按每份500 mL收集馏分，采用薄层色谱检测收集Rf值为0. 1~0. 2的馏分，该馏 分经减压干燥，即得呈无色油状的纯度大于95%的1--2--3-硬脂酰基甘油183.7 g。 其中：减压干燥条件是当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种黑果枸杞中硬质酰基甘油的制备方法，包括以下步骤：⑴微孔树脂除杂：将按常规方法制得的深蓝色浸膏状的黑果枸杞醇提物用其质量5~10倍的体积分数50~70%乙醇溶液溶解，过滤得到滤液A，该滤液A上微孔树脂柱分离后依次用2~5倍柱体积的85%~95%乙醇溶液、90%~100%的丙酮溶液进行台阶梯度洗脱，收集90%~100%的丙酮溶液洗脱物，该90%~100%的丙酮溶液洗脱物经减压干燥，即得呈深黄色油状的硬脂酰基甘油粗品；所述黑果枸杞醇提物与所述微孔树脂比例为1 g：30 mL；⑵硅胶柱层析分离：将所述硬脂酰基甘油粗品经硅胶柱色谱分离后，用3~5倍柱体积的石油醚‑乙酸乙酯混合溶剂洗脱，并按每份500~1000 mL收集馏分，采用薄层色谱检测收集Rf值为0.1~0.2的馏分，该馏分经减压干燥，即得呈无色油状的纯度大于95%的1‑[(12E,16E)‑12, 16‑二十碳二烯酰基]‑2‑[(E, E)‑7, 11‑十八碳二烯酰基]‑3‑硬脂酰基甘油。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：党军，张莉，王启兰，陶燕铎，邵赟，梅丽娟，刘增根，岳会兰，
申请(专利权)人：中国科学院西北高原生物研究所，
类型：发明
国别省市：青海;63
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