重组人钙调磷酸酶B亚基的应用制造技术

本发明专利技术涉及蛋白领域，特别涉及重组人钙调磷酸酶B亚基的应用。本发明专利技术提供了rhCNB在制备杀伤和/或抑制肝癌细胞Bel-7402的药物中的应用。连续给药6次后，注射用rhCNB 10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg剂量给药组对人肝癌细胞Bel-7402实体瘤的生长均具有较好的抑制作用。在此后的检测结果显示，高、中和递增剂量组效果优于低剂量给药组，治疗效果与注射用重组人白介素-2、羟喜树碱阳性对照相当。末次给药后d7检测结果表明，高剂量组对肿瘤细胞增殖的控制效果最佳(p〈0.01)，优于其它剂量组和阳性对照组，羟喜树碱给药组和递增剂量组对肿瘤细胞增殖的控制效果相当(p〈0.05)。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白领域，特别涉及重组人钙调磷酸酶B亚基的应用。
技术介绍
钙调磷酸酶(Calcineurin,CN)是目前所知唯一一种依赖Ca2+/CaM(钙调素)的蛋白磷酸酶，由A，B亚基以1：1的比例组成。A亚基(CNA)是催化亚基，B亚基(CNB)是调节亚基。CN在免疫激活通路中发挥重要作用，示T细胞活化的关键没。CN作为大分子酶蛋白，易失活，不稳定，而CNB作为该酶的调节亚基，能促进CNA的活性，且相对分子质量小，性质稳定。由研究表明CNB能刺激T细胞和NK细胞增殖以及增强NK细胞的杀伤活性，增强巨噬细胞吞噬能力等免疫功能，且重组人钙调磷酸酶B亚基(RecombinanthumanCalcineurinBsubunit,rhCNB)是开发中的基因工程创新肿瘤药物。但目前未见rhCNB对肝癌细胞Bel-7402杀伤或抑制作用的相关报道。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供重组人钙调磷酸酶B亚基的应用。本专利技术采用IVISKinetics小动物活体成像系统，研究注射用rhCNB对BALB/c裸小鼠荷人肝癌细胞Bel-7402原位癌的治疗作用，进一步考察受试物注射用rhCNB对特定类型肿瘤细胞的杀伤和(或)抑制作用，探索受试物产生药效作用的时效和量效关系，为药物的有效性和其它毒理学相关试验提供依据。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了rhCNB在制备杀伤和/或抑制肝癌细胞Bel-7402的药物中的应用。在本专利技术的一些具体实施方案中，rhCNB在制备杀伤和/或抑制肝癌细胞Bel-7402的药物中的应用中所述rhCNB的给药剂量为不少于10mg/kg。在本专利技术的一些具体实施方案中，rhCNB在制备杀伤和/或抑制肝癌细胞Bel-7402的药物中的应用中所述rhCNB的给药剂量为10mg/kg～160mg/kg。在本专利技术的一些具体实施方案中，rhCNB在制备杀伤和/或抑制肝癌细胞Bel-7402的药物中的应用中所述rhCNB的给药浓度为0.5mg/mL～2mg/mL。在本专利技术的一些具体实施方案中，rhCNB在制备杀伤和/或抑制肝癌细胞Bel-7402的药物中的应用中所述rhCNB的给药方式为静脉注射给药；每日给药1次，连续给药15日或者首次给药剂量为10mg/kg，每3日提高1倍剂量递增给药，依次为10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg、160mg/kg。本专利技术还提供了rhCNB在制备治疗BALB/c裸小鼠荷人肝癌细胞Bel-7402原位癌移植瘤的药物中的应用。在本专利技术的一些具体实施方案中，rhCNB在制备治疗BALB/c裸小鼠荷人肝癌细胞Bel-7402原位癌移植瘤的药物中的应用中所述rhCNB的给药剂量为不少于10mg/kg。在本专利技术的一些具体实施方案中，rhCNB在制备治疗BALB/c裸小鼠荷人肝癌细胞Bel-7402原位癌移植瘤的药物中的应用中所述rhCNB的给药剂量为10mg/kg～160mg/kg。在本专利技术的一些具体实施方案中，rhCNB在制备治疗BALB/c裸小鼠荷人肝癌细胞Bel-7402原位癌移植瘤的药物中的应用中所述rhCNB的给药浓度为0.5mg/mL～2mg/mL。在本专利技术的一些具体实施方案中，rhCNB在制备治疗BALB/c裸小鼠荷人肝癌细胞Bel-7402原位癌移植瘤的药物中的应用中所述rhCNB的给药方式为静脉注射给药；每日给药1次，连续给药15日或者首次给药剂量为10mg/kg，每3日提高1倍剂量递增给药，依次为10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg、160mg/kg。在实验期间，除阳性对照注射用顺铂高剂量给药组动物以外，其余动物的一般症状观察和体重与溶媒对照组比较无明显差异。连续给药6～15次过程中，注射用rhCNB各剂量给药对肿瘤细胞增殖的控制与溶媒对照组比较均具有不同程度的统计学意义。停止给药后第7日检测结果显示：与溶媒对照组比较，G给药组对肿瘤细胞增殖的控制均具有显著统计学意义，p〈0.01，DZ、X给药组具有统计学意义，p〈0.05。连续给药6次后，注射用rhCNB10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg剂量给药组对人肝癌细胞Bel-7402实体瘤的生长均具有较好的抑制作用。在此后的给药过程中检测结果显示，高、中和递增剂量组效果优于低剂量给药组，治疗效果与注射用重组人白介素-2、羟喜树碱阳性对照相当。末次给药后d7检测结果表明，高剂量组对肿瘤细胞增殖的控制效果最佳(p〈0.01)，优于其它剂量组和阳性对照组，羟喜树碱给药组和递增剂量组对肿瘤细胞增殖的控制效果相当(p〈0.05)。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。图1示实验各组肿瘤生物发光检测数据其中横坐标“1～7”分别表示“给药前、首次给药后d3、d6、d9、d12、d15和末次给药后恢复期d7”；“G—注射用rhCNB高剂量组(40mg/kg)”“Z—注射用rhCNB中剂量组(20mg/kg)”、“D—注射用rhCNB低剂量组(10mg/kg)”、DZ—注射用rhCNB剂量递增组(10mg/kg→20mg/kg→40mg/kg→80mg/kg→160mg/kg，10mg/kg为初始剂量，连续给药3d提高一个剂量，以此类推)”；纵坐标为生物发光检测强度；图2示活体成像图；图3示实验组剖检图；图4示阳性对照组剖检图。具体实施方式本专利技术公开了重组人钙调磷酸酶B亚基的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。本专利技术依据“细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究技术指导原则”和“抗肿瘤药物药效学指导原则”，采用IVISKinetics小动物活体成像系统，动态分析注射用rhCNB对BALB/c裸小鼠荷人肝癌细胞Bel-7402原位癌的治疗作用。首先建立BALB/c裸小鼠荷人肝癌细胞Bel-7402皮下移植瘤模型，然后建立BALB/c本文档来自技高网...

【技术保护点】
rhCNB在制备杀伤和/或抑制肝癌细胞Bel‑7402的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.rhCNB在制备杀伤和/或抑制肝癌细胞Bel-7402的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述rhCNB的给药剂量为
不少于10mg/kg。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述rhCNB的给药剂
量为10mg/kg～160mg/kg。
4.根据权利要求1至3任一项所述的应用，其特征在于，所述rhCNB的
给药浓度为0.5mg/mL～2mg/mL。
5.根据权利要求1至4任一项所述的应用，其特征在于，所述rhCNB的
给药方式为静脉注射给药；每日给药1次，连续给药15日或者首次给药剂量
为10mg/kg，每3日提高1倍剂量递增给药，依次为10mg/kg、20mg/kg、
40mg/kg、80mg/kg、160mg/kg。
6.rhCNB在...

【专利技术属性】
技术研发人员：田树红，符健，韩克胜，黄宗文，韩丽芳，
申请(专利权)人：海口奇力制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：海南;66