动物钙调磷酸酶基因转化水稻提高其耐盐耐寒性的方法技术

动物钙调磷酸酶基因转化水稻并提高其耐盐耐寒性的方法，它属于植物品种改良的生物技术。它有以下具体步骤：第一步：通过ＰＣＲ方法获得去除Ｃ－末端自我抑制区的小鼠钙调磷酸酶催化亚基基因；第二步：采用质粒ｐＣＡＭＢＩＡ１３００构建植物表达载体；第三步：采用农杆菌介导法将该钙调磷酸酶催化亚基基因遗传转化到水稻中；第四步：分子杂交鉴定、可溶性总蛋白的提取和钙调磷酸酶活性分析；第五步：Ｔ１代转基因水稻幼苗抗盐、抗寒性分析。第六步：对水稻耐盐相关基因ＯｓＣＤＰＫ７和ｒａｂ１６Ａ的表达进行分析。利用本发明专利技术的方法能够明显提高转基因水稻的抗盐，抗低温等逆境的能力，为培育高产、抗逆和优质水稻提供一种十分有效的方法。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物品种改良的生物技术，具体说是动物钙调磷酸酶基因遗传转化水稻以提高水稻抗逆性的方法。
技术介绍
水稻是世界上近一半人口的主要粮食，水稻的生长和产量主要受低温、干旱和高盐等不利环境的影响。在我国受干旱、高盐侵害的稻田约占栽培面积的1/5，而且有日趋严重的趋势。因此，尽快培育出具有广泛抗逆性的高产、优质水稻新品种对于我国的农业发展具有深远意义。现有植物品种改良常采用两种方法，一种是传统杂交育种，一种是转基因技术。传统杂交育种方法存在以下不足(1)传统杂交育种中基因转移一般只能在生物物种内个体间进行，基因来源有一定限制；(2)传统杂交育种是对整个基因组进行操作，引起的变异较大，可预见性较差；(3)传统杂交育种一般历时较长，传统育种方法培育出一种新品种需要7到8年的时间，而利用基因工程技术培育新品种所需时间是原来的一半。转基因技术培育新品种的方法具有以下优点(1)转基因技术所转移的基因不受生物体间亲缘关系的限制，动物、植物、微生物的基因可以相互转移；(2)转基因技术是对某个基因进行操作，可准确预知其后代表现；(3)转基因技术大大缩短了选育的时间和工作量。所以，采用转基因技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
动物钙调磷酸酶基因转化水稻并提高其耐盐耐寒性的方法，其特征在于有以下具体步骤：第一步：通过ＰＣＲ方法获得去除Ｃ－末端自我抑制区的小鼠钙调磷酸酶催化亚基基因，ＰＣＲ反应所用的引物是：ｐ２７０：５′　ｇｃｇｃｃｇｇｔｇｃ　ｇｇｔｃｇｇｇｇｔｇｔｇｃａ　３′；Ｐ２７１：５′　ｇａｃａｃｔｃｔｃａ　ｃｔｃｔｃｔｔｃｔｃ　ｔｇ　３′；第二步：采用质粒ｐＣＡＭＢＩＡ１３００构建植物表达载体，在本专利技术中，所构建的植物表达载体携带小鼠的去除Ｃ－末端自我抑制区的钙调磷酸酶催化亚基基因，该植物表达载体转化到根癌农杆菌ＥＨＡ１０５中；第三步：采用农杆菌介导法将该钙调磷酸酶催化亚基基因遗传转化到水稻中，并得到了Ｔ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱大海，马旭俊，钱前，李家洋，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学，
类型：发明
国别省市：93[中国|哈尔滨]