本发明专利技术属于与GLP-1类似物和聚乙二醇结合的脂质体及其制备方法。该发明专利技术是在脂质末端的一部分被巯基化的脂质体上通过二硫键结合了含聚乙二醇部分的化合物，并通过二硫键进一步结合了GLP-1类似物而得到的脂质体，相对于包含在脂质体中的1摩尔巯基化脂质，所述PEG的结合量和所述GLP-1类似物的结合量分别为15-50mol％和0.5-10mol％。该脂质体在保留的GLP-1多肽生物活性的同时，增加了GLP-1类似物在血液中的稳定性，延长了GLP-1类似物在体内的半衰期。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种脂质体，具体涉及与GLP-I类似物和/或聚乙二醇结合的、具有优良的血浆稳定性和治疗效果的脂质体，及其制备技术。
技术介绍
作为向特定部位输送大量药剂的手段，提出了将药剂封入脂质体，使抗体结合到脂质体表面的方法。特别是在癌的治疗领域，有许多关于其中封入了抗肿瘤药、与抗体结合的脂质体的有效性的报道(Konno等，Cancer Tes.，47，4471，1987，特开昭58-134032号公报。进而，作为对脂质体存在的问题，即封入物的漏出、脂质体的凝集以及在网状内皮器官中的捕获等的改善方法，提出了向脂质体上结合聚乙二醇的方法(特开平1-249717号公报、特开平 2-149512 号公报、Klibanovet, A. L,等，FEBS Lett.，268，235，1990) · 在特开平4-346918号公报中，公开了与蛋白质结合的含有药剂的脂质体，其特征在于具有蛋白质和包含聚乙二醇部分的化合物残基，所述蛋白质和化合物残基分别通过各自的硫巯基与内含药剂的脂质体表面的马来酰亚胺基结合。这种脂质体是使结合在抗体上的硫巯基和结合在含聚乙二醇部分的化合物上的硫巯基与脂质体表面的马来酰亚胺基反应来制备的，它的特征在于如通过历来的脂质体所观察到的那样，在肝脏、脾脏等网状内皮系统中的非特异性摄入得到抑制，实现了靶向性的化学疗法。多肽、蛋白类药物与传统药物相比，不仅具有用药剂量小、疗效好、毒副作用低等突出优点，而且还具有不同于传统药物的一些特性1)多肽、蛋白质分子的化学结构决定其活性，影响活性的结构因素主要为氨基酰及其排序、末端基团、肽链和二硫键位置等。此夕卜，药物的空间结构即二维、三维结构也同样影响生物活性。2)多肽、蛋白质药物体内外不稳定性。蛋白质药物在体内外环境可能经受多种复杂的化学降解和物理变化而失活，如凝聚、沉淀、消旋化、水解、脱酰氨基等。3)蛋白质药物半衰期短、清除率高、分子量大、易受体内酶和细菌以及体液的破坏、非注射给药生物利用度低，一般都仅为百分之几。因此，如何设计出安全、有效和稳定的转运多肽、蛋白类药物的新型给药系统是当今制剂工作者和制药业面临的一个重大难题。GLP-I刺激胰岛素分泌而不出现低血糖，这种葡萄糖依赖性的促胰岛素分泌特性，避免了糖尿病治疗中常存在的产生低血糖症的危险；对受损胰岛β细胞的修复作用、刺激β细胞的增殖和分化、增加胰岛素的敏感性，能从根本上改善2型糖尿病患者的症状，使开发GLP-I作为一种2型糖尿病治疗药物具有广阔的前景。然而，天然的GLP-I生物半衰期短，在体内很快被二肽基肽酶IV(dipeptidyl peptidase IV,DPP_IV)降解，同时,在肾脏被肾小球滤过，被肾小管上的酶代谢。到目前为止，在糖尿病、肥胖领域，脂质体制剂应用于多肽药物GLP-I类似物，目的延长GLP-I类似物的血浆稳定性的研究鲜有报道。为了克服上述现有技术的缺点，本专利技术提供一种含有GLP-I类似物的聚乙二醇脂质体，在保留GLP-I类似物生物活性的同时，延长GLP-I类似物在血浆中的半衰期。
技术实现思路
本专利技术提供一种新型脂质体，所述脂质体是将含聚乙二醇部分的化合物，通过二硫键结合到脂质末端的，相对于包含在脂质体中的Imol巯基化脂质，所述化合物的结合量为15_50mol% ;提供所述脂质体为使疏基化脂质的疏基与添加了硫疏基的含聚乙_■醇部分的化合物氧化反应得到的脂质体的上述脂质体；提供所述化合物结合到脂质体表面的上述脂质体；提供所述聚乙二醇为聚乙二醇的上述脂质体；提供所述化合物为具有2个聚乙二醇基团的化合物的上述脂质体；提供所述聚乙二醇的分子量为2，000-7, 000道尔顿的上述脂质体；提供所述聚乙二醇的分子量为约5，000道尔顿的上述脂质体；提供脂质体的表面进一步结合了 GLP-I类似物的上述脂质体。而且，提供将GLP-I类似物通过二硫键结合到脂质末端的一部分被巯基化的脂质体上而得到的脂质体，相对于包含在脂质体中的Imol巯基化脂质，所述GLP-I类似物的结合量为 O. 5-10mol%o·因此，本专利技术提供一种新型脂质体，所述脂质体是将含聚乙二醇部分的化合物，通过二硫键结合到脂质末端的一部分被巯基化的脂质体上而得到的脂质体，相对于包含在脂质体中的Imol巯基化脂质,所述化合物的结合量为15-50mol%。进一步，本专利技术提供一种新型脂质体，所述脂质体是将含聚乙二醇部分的化合物的结合量相对于I摩尔巯基化脂质为15-30mol%。上述脂质体为使疏基化脂质的疏基与添加了硫疏基的含聚乙_■醇部分的化合物氧化反应得到的脂质体的上述脂质体；所述化合物结合在所述脂质体的表面。上述脂质体为使疏基化脂质的疏基与添加了硫疏基的含聚乙_■醇部分的化合物为具有2个聚乙二醇基的化合物，其中所述聚乙二醇的分子量为2，000-7，000道尔顿，所述聚乙二醇的分子量优选为约5，000道尔顿。上述脂质体中所述脂质体的表面进一步结合了抗体，所述脂质体是将抗体通过硫醚基结合到脂质末端的一部分被马来酰亚胺化的脂质体上而形成的，该抗体的结合量相对于脂质体中所含的I摩尔马来酰亚胺化脂质为O. l-2mol%，其中所述抗体的结合量相对于I摩尔马来酰亚胺化脂质优选为O. 4-0. 7mol%。上述脂质体，它是使具有马来酰亚胺基的脂质体与来自抗体的含硫基团反应，形成硫醚键而得到的脂质体。上述脂质体，其中所述抗体为GAH抗体，其中所述抗体为抗体片段F (ab’)2，其中所述脂质体的表面进一步结合了含聚亚烷基二醇部分的化合物。此外，本专利技术提供了一种作为糖尿病/肥胖治疗药的上述脂质体；以及使用所述脂质体的糖尿病/肥胖治疗方法。本专利技术的脂质体的特征在于具有优良的血浆稳定性，和较好的降糖活性。并且聚乙二醇的结合量少于历来的脂质体，因此，本专利技术的脂质体可以避免由聚乙二醇引起的副作用。而且从工业生产性的观点出发也是有利的。实施本专利技术优选方案构成本专利技术脂质体的脂质的例子包括但不限于下述物质天然卵磷脂(例如蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂)，二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)，二肉豆蘧酰磷脂酰胆碱((DMPC)，二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)，二油酰磷脂酰胆碱((DOPC)、二肉豆蘧酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、二棕榈酰磷脂酸(DPPA)、二棕榈酰磷脂酰甘油(DPPG)、二肉豆蘧酰磷脂酸(DMPA)等磷脂，鞘糖脂、甘油糖脂等糖脂、脂肪酸、两亲性二烷基二甲铵、聚甘油烷基醚、聚氧乙烯烷基醚等。可以单独使用这些脂质，或是将两种或两种以上结合使用，也可以与胆固醇等非极性物质、胆留醇衍生物结合使用。在本专利技术的脂质体中，为了结合含聚亚烷基二醇的化合物以及根据需要的多肽衍生物，使用例如巯基化磷脂酰乙醇胺等被巯基化的脂质(在本说明书中称为“巯基化脂质”)作为脂质体重要组成部分。巯基化脂质相对于全脂质的比例通常约为O. 5-10%。 用巯基化磷脂酰乙醇胺的例子来进行说明，这种化合物是由具有与氨基的反应性的含巯基乙酸酯的化合物与磷脂酰乙醇胺(PE)的氨基反应得到的。所述含巯基乙酸酯的化合物可以含己酰基、苯甲酰基、苯基丁酰基等残基。可以使用的PE有二棕榈酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)，二肉豆蘧酰磷脂酰乙醇胺(DMP本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种脂质体，所述脂质体是将含聚乙二醇部分的化合物，通过二硫键结合到脂质末端的一部分被巯基化的脂质体上而得到的脂质体，相对于包含在脂质体中的1mol巯基化脂质，所述化合物的结合量为15？50mol％。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：曹亮，
申请(专利权)人：艾韦特溧阳医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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