脂质囊泡组合物和使用方法技术

本发明专利技术提供了包含稳定化多层囊泡的递送系统，以及其组合物、合成方法和使用方法。所述稳定化多层囊泡可包含预防剂、治疗剂和/或诊断剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请根据35 U. S. C. § 119(e)，本申请要求于2010年3月19日提交的题为“MICR0-ANDNANOPARTICLES WITH SELF-ASSEMBLED LIPID COATINGS FOR SURFACE DISPLAY OF DRUGSSUCH AS VACCINE ANTIGENS AND ADJUVANTS”的美国临时申请序列号61/315，485和于2010年3月 31 提交的题为 “INTERBILAYER CROSSLINKED MULTI LAMELLAR VESICLES” 的美国临时申请序列号61/319，709的权益，二者的全部内容通过引用并入本文。联邦政府资助研究在NIH的资助No. CA140476和国防部的资助No. W911NF-07-D-0004号的政府支持下进行本专利技术。政府享有本专利技术的某些权利。
技术介绍
脂质体被广泛用作小分子的递送载剂；但是，在脂质体中实现许多大分子药物的高水平包封仍然是困难的，而且许多药物制剂从脂质体泄露得太快而不能维持有用的药物递送动力学。虽然通过微颗粒和纳米颗粒进行的药物递送可以包封蛋白质和小分子药物，但其仍通常产生总质量非常低的单位颗粒质量的包封药物，通常为 10 μ g药物/mg颗粒左右。此外，用于合成高分子颗粒的有机溶剂以及这些颗粒中的疏水/酸性环境可破坏治疗。(参见 Zhu 等，Nat. Biotechnol. 2000 18:52-57。)
技术实现思路
本专利技术提供了具有较高负载能力和较长释放谱的具有新颖性和创造性的药物递送系统，所述较高负载能力是同时封闭(sequester)高水平的疏水和亲水试剂二者的能力。这些递送系统的一些方面包括具有交联脂质双层的稳定化多层脂质囊泡(在本文中称为双层间交联多层囊泡(interbilayer-crosslinked multilamellar vesicle)或 ICMV)。如实施例所示，本专利技术的囊泡具有出乎意料的提高的包封效力(例如，在一些情况下，是简单脂质体效率的100倍)，并且它们能够通过缓慢且持续的动力学释放所包封的(或者以另外方式截留的)试剂，即使在血清的存在下也是如此，这使得它们成为高度符合理想的体内持续递送载剂。此外，如在本文中更详细地描述的，本专利技术的囊泡可以在水性环境中合成，从而避免常见于多种现有技术方法的严苛条件，包括使用有机溶剂和/或酸性环境。因此，这些合成方法更适于多种试剂，包括使用这些现有技术方法通常会在结构上和/或功能上受影响的那些。因此，所得囊泡不含有机溶剂，并可以仅包含脂质(包括生物可降解脂质)和包封或嵌入其中的任意试剂。本专利技术部分基于如在本文中更详细地描述的本专利技术囊泡的这些和其他令人惊讶且出乎意料的性质。因此，本专利技术提供了这些稳定化囊泡，包含这些囊泡的组合物、制造这些囊泡的方法及其使用方法。因此，一方面，本专利技术提供了在脂质双层之间具有交联的多层脂质囊泡，或者在脂质双层之间具有交联的多个多层脂质囊泡或多层脂质囊泡群。所述多个可以是但不限于1-103、1-104、1-105、1-106、1-107、1-108或1-109。在下文中描述了囊泡的多个方面，应当理解除非另有说明，否则这些方面等同地应用多个囊泡或囊泡群。应当理解，本专利技术的囊泡包含内部邻近(或并列)双层的组分之间的连接，而非仅仅是外部(或者最外面)的双层或双层表面的组分之间的交联。在一些实施方案中，囊泡包含官能化脂质。在一些实施方案中，官能化脂质是马来酰亚胺官能化脂质。官能化脂质可以是磷酸乙醇胺但不限于此。在一些实施方案中，囊泡包含官能化的脂质双层组分，并优选直接地官能化。在一些实施方案中，囊泡包含磷酸胆碱，例如但不限于D0PC。在一些实施方案中，囊泡包含磷酸甘油，例如但不限于D0PG。在一些实施方案中，囊泡包含DOPC、DOPG和官能化脂质例如但不限于官能化磷酸乙醇胺。官能化脂质可以是包含马来酰亚胺的。在一些实施方案中，囊泡包含DOPC、DOPG和马来酰亚胺官能化脂质。官能化脂质可以是马来酰亚胺官能化的磷酸乙醇胺例如但不限于MPB。在一些实施方案中，DOPC DOPG 官能化脂质的摩尔比是40 10 50。在一些实施方案中，囊泡可以包含DOPC和MPB。在一些实施方案中，囊泡可以包含D0PC、D0TAP和MPB。在一些实施方案中，DOPC DOTAP :官能化脂质的摩尔比是40 10 50。在一些实施方案中，官能化脂质以至少25%的摩尔百分比存在。在一些实施方案中，囊泡包含试剂，包括一种或者更多种试剂。本文所使用的一种或更多种试剂意指彼此不同的一种或者更多种试剂。在一些实施方案中，所述试剂是预防齐U、治疗剂或诊断剂。在一些实施方案中，所述试剂是抗原。在一些实施方案中，所述试剂是蛋白质抗原，包括全蛋白抗原。在一些实施方案中，所述试剂是佐剂。佐剂可以是但不限于TLR激动剂如TLR4激动剂、TLR7激动剂、TLR8激动剂和TLR9激动剂。在一些实施方案中，囊泡包含抗原和至少两种佐剂如TLR4激动剂和TLR7激动剂。在一些实施方案中，所述试剂是蛋白质。在一些实施方案中，囊泡的每mg脂质(或颗粒)包含超过300 μ g试剂,或者每mg脂质(或颗粒)超过400yg试剂。在一些实施方案中，囊泡的每mg脂质(或颗粒)包含300 试剂。在一些实施方案中，囊泡的每mg脂质(或颗粒)包含325 μ g试剂，或者每mg脂质(或颗粒)407 μ g试剂。在一些相关实施方案中，试剂可以是蛋白质抗原。在一些实施方案中，试剂被包封于囊泡中。在一些实施方案中，试剂存在于囊泡的核心。在一些实施方案中，试剂存在于脂质双层之间。在一些实施方案中，囊泡包含核心中的一种试剂和脂质双层之间的另一种试剂。在一些实施方案中，核心中的试剂可以是抗原如蛋白质抗原，脂质双层之间的试剂可以是佐剂例如但不限于MPLA。在一些实施方案中，抗原在核心中，两种佐剂在内部脂质双层之间。在一些实施方案中，两种佐剂是MPLA和R-848。在一些实施方案中，囊泡包含核心中的一种试剂和外部双层中的另一种试剂。在一些实施方案中，核心中的试剂可以是抗原如蛋白质抗原，外部双层中的试剂可以是佐剂例如但不限于MPLA。在一些实施方案中,抗原在核心中,两种佐剂在外部双层中。在一些实施方案中，抗原在核心中，一种或更多种佐剂在内部双层之间和/或在外部双层表面上。在一些实施方案中，两种佐剂是MPLA和R-848。在一些实施方案中，囊泡缀合聚乙二醇(PEG)。在一些实施方案中，囊泡可以表面缀合PEG。在另一方面，本专利技术提供了包含任意前述多层脂质囊泡(或囊泡群)和可药用载体的组合物。在另一方面，本专利技术提供了包含任意前述多层脂质囊泡(或囊泡群)和适于冻干的赋形剂的组合物。在一些实施方案中，适于冻干的赋形剂包含蔗糖。囊泡可以单独使用或者与其他试剂(包括本文所述的任意试剂)组合使用。在一些实施方案中，他们不与细胞一起施用，他们也不与细胞缀合(或者以另外的方式物理连接)(例如在施用于对象之前)。但是，囊泡可以缀合靶配体以将他们靶向特定细胞或机体中的位点。在另一方面，本专利技术提供了一种方法，其包括使包含官能化脂质的脂质体与多价(例如，二价)阳离子接触以形成融合脂质体，并使本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：达雷尔·J·欧文，文宰显，
申请(专利权)人：麻省理工学院，
类型：
国别省市：