抗过敏特异性IgY及其制剂制造技术

本发明专利技术公开了一种抗过敏特异性ＩｇＹ及其制备方法，本发明专利技术制备方法包括下列步骤：筛选出引致过敏性疾病的过敏原，在筛选和分类组合各种过敏原的基础上，分别制备单一或复合的过敏原抗原，制备免疫球蛋白ＩｇＥ抗原，制备免疫蛋，制备抗各种过敏原特异性ＩｇＹ粗提物，抗各种过敏原特异性ＩｇＹ粗提物和抗ＩｇＥ特异性ＩｇＹ粗提物的纯化，制备抗某一种特定过敏原的特异性复合ＩｇＹ。本发明专利技术特异性ＩｇＹ制剂用于哮喘等过敏性疾病的预防和治疗具有特效、安全、使用方便的特点。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种抗体及其制备方法，特别是涉及一种抗各种过敏性疾病的复合IgY及其制备方法。
技术介绍
过敏症是一种最为常见的多发病，对人类健康构成极大危害。全世界不知有多少人终生饱尝这种疾病的折磨，甚至造成残废或猝死。在印度，“过敏症”发病率占人口总数高达11-12％；在美国仅花粉过敏症的人群发病率就高达15％，每年要耗资6亿美元治疗这种疾病；而在中国，据不完全统计，各种过敏性疾病的患者有上亿人之多。有报道显示，全世界每年仅用于治疗支气管哮喘的医疗费用就超过30亿美元，由于这类疾病而导致的误工、误学及早亡所造成的损失更是无法计算。过敏性疾病，是一种由外界抗原物质作用于体内发生的不正常的免疫反应。临床表现如支气管哮喘和支气管炎、过敏性鼻炎、过敏性喉水肿(喉炎)、过敏性皮肤炎等，症状顽固，治疗起来相当困难。通常采用激素类和拟肾上腺素等化学药物治疗。令人遗憾的是，目前广泛应用的治疗方案及其药物都仅仅是局部抗炎或短暂纾缓症状的、不完善的治标手段，而不是“病因治疗”。更重要的是，所带来的副作用都相当大。如应用皮质激素会引致中枢神经系统和肌肉骨骼以及内分泌方面的不良反应，并可诱发口咽部和食道真菌感染，以及疱疹病毒感染；尤其对小儿危害更大，使小儿生长受抑、影响小儿骨骼和性腺等方面的发育。采用拟肾上腺素能药和β2-受体激动剂，还会引起高血压、心律失常等心血管疾病及出现骨骼肌震颤(如手抖)，甚至造成患者肾上腺皮质功能不全或衰竭；严重时会引起心脏停搏而死亡。国际医学界根据长期观察和统计分析揭示，过度使用β2-受体激动剂等是前几年哮喘死亡率不断增加的祸根。鉴于局部抗炎和平喘等治疗方法存在的严重缺陷，针对过敏性疾病是由于某种“过敏原”导致人体发生“特异反应”(变态反应)而引起的机理，于某种“过敏原”导致人体发生“特异反应”(变态反应)而引起的机理，医学界研究开发了一种特异性免疫方法(“脱敏疗法”)，通过反复注射特异性过敏原刺激机体产生“封闭抗体”，和再次进入机体的“过敏原”结合为复合物而被网状内皮系统清除。这种方法被称为“过敏症”的“最新疗法”，但是在实施中却存在着许多困难和危险性。不但起效慢、疗程长(长达2-5年)而难于坚持；而且，注射后容易出现乏力、关节痛、荨麻疹等不良反应，还会诱发支气管痉挛和过敏性休克等严重不良反应，甚至造成死亡。因此，严重影响了这种本来是先进的“最新疗法”的推广应用。目前的现状是，虽然近几十年来全世界有关过敏性疾病的治疗药物和设备不断问世，但是，过敏性疾病的发病率，不仅未能下降，甚至还出现哮喘的患病率和死亡率反而逐年增加的反常现象。残酷的现实表明，至今全世界尚未找到一种根治过敏性疾病特别是哮喘的安全可靠的方法。因此，研究开发一种从病发根源上入手、副作用又小的有效治疗方法和药物，对于使千百万患者彻底摆脱过敏性疾病的煎熬、保障人民身心健康、提高广大国民健康素质，无疑具有十分重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种对哮喘等过敏性疾病特效、安全、使用方便的抗体制剂及其制备方法。本专利技术目的是通过如下技术方案实现的1、筛选出引致过敏性疾病的过敏原A、花粉症过敏原蒿属花粉、豚草花粉、狗尾草、梯牧草、黑麦、树木花粉如法国梧桐、枫、杨、榆、柏、构、桑、柳、松、悬铃木、桦、银杏等。同时也可依据对多数过敏症患者的“特异性皮肤试验”结果的统计分析，来筛选决定本地区主要的致敏花粉种类。再根据这些致敏花粉的“抗原交叉性”，进行分类组合，确定有代表性的几种花粉过敏原。也可根据各地最常见的有代表性的致敏花粉所鉴定出的过敏原蛋白质或抗原成份，如豚草、艾草为Hrt VI(学名)、鸭茅为Arab aI(学名)、垂枝桦木为Dac gI(学名)、扁柏为BetVI(学名)、杉木为CryIC(学名)等等有代表性的、最常见的过敏原蛋白质或抗原成份作为这部分致敏花粉的代表性过敏原。还可以根据筛选出的致敏花粉种类，选用已商品化的若干种致敏花粉浸出液或萃取剂作为有代表性的花粉过敏原。B、尘螨过敏原与过敏性疾病关系最密切的螨有4种，即屋尘螨、粉尘螨、宇尘螨和多毛螨。这4种螨之间具有共同抗原成份。其中屋尘螨是导致尘螨过敏性疾病的最重要的过敏原。屋尘螨有I、II、III、IV、V等五种抗原决定簇。可根据本地大多数过敏症患者“特异性皮肤试验”的统计结果，从目前最常用的、已商品化的各种尘螨过敏原的“抗原交叉性”，进行分类组合。市面上的“粉尘螨注射液”也可直接选用。C、霉菌过敏原将空气中最常见、孢子播散数量最大和致敏性最强的真菌进行分离和筛选，保留纯菌种，进行实验室培养，可制成各种真菌过敏原浸出液。然后，根据这些有代表性的致敏真菌的“抗原交叉性”进行分类组合。D、蟑螂过敏原采用已商品化的蟑螂抗原成份或蟑螂浸出液(如“黑胸大蠊”萃取液)，也可用当地蟑螂自制浸出液，或将蟑螂剪去翅膀后，放入高速匀浆机搅成浆汁，作为制备抗原的基础原材料。E、宠物过敏原可采用宠物的皮脂腺分泌物、唾液或尿蛋白的萃取液制作过敏原。也可选用这些宠物有代表性过敏原蛋白质直接作抗原的原材料。如猫的主要过敏原蛋白质为Fel dI，狗唾液的过敏原蛋白质为Ca dI。2、在筛选和分类组合各种过敏原的基础上，分别制备单一或复合的过敏原抗原。将各组别单一或混合的过敏原提取液或制剂，按1-10∶1-10比例加入福氏佐剂，再放入高速匀浆机中，高速搅拌形成油包水乳液，即制成单一或复合过敏原抗原； 也可以直接将花粉、尘螨、霉菌、蟑螂碎片、宠物皮毛屑等加入福氏佐剂混合后放入高速匀浆机中，以10000～30000rpm转速进行高速粉碎匀化，形成油包水液；制得含全菌和菌体成份或含全部致敏蛋白质成份的复合抗原；3、制备免疫球蛋白IgE抗原可以从人体特别是过敏症患者的血清中提取IgE，也可购买现成的IgE免疫球蛋白作为抗原原料。将IgE免疫球蛋白按1-10∶1-10比例配以福氏佐剂，放入高速匀浆机中，高速粉碎匀化，即制成IgE抗原；4、制备免疫蛋应用本公司已申请的专利技术(专利申请号00101270.3和02121244.9)，用各种单一或复合过敏原抗原以及IgE抗原，分别对产蛋鸡进行免疫；每隔二周再强化注射一次，计免疫三次；第一次免疫20天后，检取鸡所产免疫蛋，并对应不同的抗原，对所检取的免疫蛋进行编码标记；以上免疫方法和注射频率可根据实际情况适当调整和变化；也可应用上述同样的免疫技术，用各种单一或复合过敏原抗原以及IgE抗原，分别对产蛋鸭进行免疫；5、抗各种过敏原特异性IgY特异性IgY粗提物的制备流动水逐个洗净免疫蛋，再用酒精擦洗消毒；用打蛋机击破蛋，蛋黄筛取出蛋黄，搅打蛋黄均匀，按蛋黄液量加入4-6倍蒸馏水稀释，搅拌均匀，用1.0N的Hcl调整PH至5.5-6.0，2-6℃静置12-24小时，虹吸得取上清液，称A液；将以上沉淀液以8000rpm离心20分种，得取上清液，称B液；将A液和B液混和均匀，超滤，得到超滤浓缩液，加入2.0％海藻酸钠液，至终浓度为1.0‰，搅拌直至浑浊沉淀，加入2.0％氯化钙液，至终浓度1.0‰，搅拌均匀，2-6℃静置过夜，8000rpm离心30分种，取上清液，进而通过细菌过滤器除菌，得到无菌滤液，冷冻干燥，即为IgY粗提物，最后把所制备的抗各种不同抗原的IgY粗提物进本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗过敏特异性ＩｇＹ，其特征在于该抗过敏特异性ＩｇＹ的制备方法包括下列步骤：　　　　筛选出引致过敏性疾病的过敏原，在筛选和分类组合各种过敏原的基础上，分别制备单一或复合的过敏原抗原；制备免疫球蛋白ＩｇＥ抗原；制备免疫蛋，制备抗各种过敏原特异性ＩｇＹ粗提物，制备抗ＩｇＥ特异性ＩｇＹ粗提物；抗各种过敏原特异性ＩｇＹ粗提物和抗ＩｇＥ特异性ＩｇＹ粗提物的纯化；制备抗某一种或多种特定过敏原的特异性复合ＩｇＹ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：包晟，杨荣，
申请(专利权)人：雅臣药业集团远东有限公司，
类型：发明
国别省市：94[中国|深圳]