重组病毒、保持该重组病毒的大肠杆菌及其制备方法技术

本发明专利技术在于提供一种保持目标病毒基因组的性状的重组病毒的制备方法。该重组病毒的制备方法特征在于：在目标病毒基因组中互相呈逆向编码的２种基因的ｐｏｌｙＡ信号间的区域插入外源基因。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及对疫苗开发或基因治疗载体开发等有用的重组病毒制备方法、保持单 纯疱疹病毒II型的基因组全长的重组病毒和保持该重组病毒的大肠杆菌。
技术介绍
为了制备称为基因治疗载体或多价疫苗的重组病毒，必须在病毒基因组的任一区 域插入外源基因。但是，得到的重组病毒存在缺失原来的基因治疗载体或疫苗的病毒基因 组的基因，或使其性状变化的问题。作为重组病毒的制备技术的现有的方法，已知有利用标记(TK，LacZ)基因的培养 细胞内的同源重组法(非专利文献1)和利用黏端质粒的培养细胞内的同源重组法(非专 利文献2、等，但这些现有的方法均是涉及要插入的外源基因一方的技术，而没有着眼于被 插入一方病毒基因组。而单纯疱疹病毒(HSV :herpes simplex virus)感染症是由HSV-1或HSV-2的感 染引起的。HSV-I主要感染以口腔、上呼吸道粘膜为中心的上半身，诱发口腔炎或唇疱疹。 另一方面，HSV-2主要感染以生殖器为中心的下半身，诱发生殖器疱疹。HSV的疫苗仍没有 被开发。此外，HSV作为基因治疗载体也有用，有几例进入临床试验阶段。为了开发病毒的疫苗或基因治疗载体，需要重组病毒制本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组病毒的制备方法，其特征在于：　　在目标病毒基因组中互相呈逆向编码的２种基因的ｐｏｌｙＡ信号间的区域（除了ＨＳＶ－１的ＵＬ３－ＵＬ４之间）插入外源基因。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】JP 2008-5-30 2008-1426621.一种重组病毒的制备方法，其特征在于在目标病毒基因组中互相呈逆向编码的2种基因的POlyA信号间的区域(除了 HSV-I 的UL3-UL4之间)插入外源基因。2.如权利要求1所述的重组病毒的制备方法，其特征在于外源基因选自杆状病毒质粒、报告基因、编码具有免疫原性的蛋白质的基因和用于基 因治疗的基因。3.一种实质上保持野生型病毒基因组的全长的重组病毒基因组导入大肠杆菌的制备 方法，其特征在于将在目标病毒基因组中互相呈逆向编码的2种基因的polyA信号间的...

【专利技术属性】
技术研发人员：川口宁，森本智美，
申请(专利权)人：国立大学法人东京大学，
类型：发明
国别省市：JP[日本]